Липополисахаридная кандидат-вакцина для профилактики эндотоксического и септического шока

• Автор: Маркина, Анна Александровна
• Шифр специальности: 03.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ЕЕ Сепсис - актуальная проблема современной медицины

1.2. Строение липополисахарида

1.2.1 ЛипидА

1.2.2. Олигосахарид кора

1.2.3.0-полисахарид

1.3. Этиология сепсиса

1.4. Патогенез сепсиса
1.4.1. Генерализованный васкулит
1.4.2. Гиперкоагуляция
1.4.3. Синдром диссеминированного внутрисосудистого свёртывания крови
1.4.4. Полиорганная недостаточность
1.5. Клеточный механизм сепсиса
1.5.1. Распознавание ЛИС и активация рецепторного комплекса ТЕЯ4-МО-2
1.5.2. Му088-зависимый путь передачи сигнала. Активация транскрипционного фактора 1МГкВ
1.5.3. Му088-независимый путь передачи сигнала. Активация транскрипционного фактора ИНЭ
1.5.4. Особенности функционирования системы врождённого иммунитета при септическом шоке
1.6. Агонисты и антагонисты ТЕГМ
1.7. Современные подходы к терапии и профилактике эндотоксического и септического шока
1.7.1. Терапия сеспсиса в клинике
1.7.2. Нейтрализация провоспалительных цитокинов в кровотоке
1.7.3. Антагонисты бактериальных эндотоксинов
1.7.4. Модификация анти-эндотоксинового статуса
1.7.5. Другие подходы к профилактике шоковых состояний

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Определение прирогенности БУП энтеробактерий
2.2.2. Изучение противошокового действия БУП энтеробактерий на различных моделях эндотоксического шока
2.2.3. Исследование иммунопрофилактики септического шока на модели экспериментального перитонита
2.2.4. Оценка эффективности связывания ЛИС энтеробактерий с липополисахарид-связывающим белком ЬВР
2.2.5. Изучение иммуногенности БУП энтеробактерий в эксперименте
2.2.6. Оценка безопасности дизентерийной вакцины «Флексвак» в клинических исследованиях
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Экспериментальное моделирование эндотоксического и септического шока
3.1.1. О - гал а кто з а м и г г о ва я модель эндотоксического шока
3.1.2. Прямая модель эндотоксического шока
3.1.3. Разработка и оптимизация модели экспериментального перитонита (СЬР-модель)
3.2. Установление возможности профилактики эндотоксического шока при предварительном введении мышам (СВАхС57В1/6)П БУП Злоппе!
3.3. Установление возможности профилактики септического шока при предварительном введении мышам (СВАХС57В1/6)Е1 БУП бАояие/
3.4. Разработка кандидат-вакцины для профилактики эндотоксического шока
3.5. Индукция ЛПС-специфических антител и коррекция анти-эндотоксинового статуса при иммунизации мышей (СВАХС57В1/6)Е1 НЭТ-ЛПС энтеробактерий
3.6. Профилактика развития септического шока на модели экспериментального перитонита при иммунизации мышей (СВАХС57В1/6)П НЭТ-ЛПС энтеробактерий
3.7. Клинические исследования безопасности НЭТ-ЛПС энтеробактерий
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Комплексный подход к моделированию шоковых состояний

4.2. Установление возможности профилактики эндотоксического шока при предварительном введении мышам (CBA> 4.3. Установление возможности профилактики септического шока при предварительном введении мышам (CBAxC57Bl/6)Fl БУП S.sonnei
4.4. Разработка кандидат-вакцины для профилактикики эндотоксического шока
4.5. Модификация анти-эндотоксинового статуса при иммунизации мышей (CBA> 4.6. Профилактика развития септического шока на модели экспериментального перитонита при иммунизации мышей (CBAxC57Bl/6)Fl НЭТ-ЛПС эитеробактерий
4.7. Клинические исследования безопасности НЭТ-ЛПС энтеробактерий
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

(Matsuda N., Hattori Y., 2006). При отсутствии стимуляции NFkB находится в цитоплазме в неактивном состоянии в комплексе с ингибиторным белком 1кВ. Активация NFkB начинается со сборки высокомолекулярного белкового комплекса - сигналосома, состоящего из ингибиторных киназ NFkB - IKKa, IKKß, IKKy. TAK1 в цитоплазме в активирует сигналосом, который, в свою очередь, фосфорилирует 1кВ. 1кВ убиквитинируется, отсоединяется от NFkB и подвергается деградации в протсасомах (Palsson-McDermott Е.М., O’Neill L.A., 2004). Димеры NFkB (р65/р50) перемещаются в ядро и активируют транскрипцию генов-мишеней (Zhong H. et al., 2002).
ЛПС активирует транскрипцию более 1000 различных генов в макрофагах (Bjorkbacka H. et al., 2004). Идентифицировано более 150 генов, которые имеют на своих промоторных участках сайт связывания с NFkB. Среди них гены 27 цитокинов и хемокинов (ИЛ-1, -2, -6, -8, -9, -11, 12, -15, ИФН-ß, ФИО), белков, обеспечивающих иммунологическое распознавание (МНС), презентацию антигенов, адгезию нейтрофилов (Dobrovolskaya М.A., Vogel S.N., 2002).
1.5.3. Му088-независимый путь передачи сигнала. Активация транскрипционного фактора IRF
Исследования с использованием МуБ88-нокаутных мышей показали, что передача сигнала от TLR4 происходит как по MyD88-зависимому, так и по MyD88-независимому сигнальным путям. У мышей без MyD88 была отмечена слабая активация NFkB, происходящая с задержкой по сравнению с группой мышей дикого типа, и они были устойчивы к летальному действию ЛПС. Более того, у MyD88-HOKayTHbix мышей активация транскрипционного фактора IRF-3 и индукция ИФН-ß в ответ на ЛПС осталась неизменной (Palsson-McDermott Е.М., O’Neill L.A., 2004). Таким образом, по Му088-независисмому пути происходит активация транскрипционного фактора IRF-3.
Сортировочный белок TRAM напрямую взаимодействует с TR1F и активированным TLR4, обеспечивая СВЯЗЫВаПИС И ЗКТИВЗЦИЮ СИГНаЛЬНОГО адаптерного белка TRIF с TLR4 (Kagan J.C. et al., 2008). Адаптерный белок TRIF при гиперэкспрессии способен активировать NFkB, хотя и не так сильно как по Му088-зависимому пути. В экспериментах с использованием TRIF-нокаутных мышей активация NFkB в ответ на ЛПС оставалась практически на том же уровне,