Роль различных типов антиген-презентирующих клеток в регуляции апоптоза лимфоцитов и репликации ВИЧ-1 при ВИЧ-инфекции

• Автор: Макарова, Маргарита Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 165 с. : 34 ил.

Перечень сокращений, принятых в диссертации

АИФ апоптоз индуцирующий фактор

АПК антиген-презентирующие клетки

АФК активные формы кислорода

БАВ биологически активные вещества

ГК глюкокортикоиды

ДК дендритные клетки

ДМСО димегилсульфоксид

ИДК интердигитальные дендритные клетки

мкАТ моноклональные антитела

мкл микролитр

МП митохондриальный потенциал
МС 540 флюорохром мероцианин
ПКГ программированная клеточная гибель
ФГА фитогемагглютинин
ФС фосфатидилсерин
ФСБ фосфатно-солевой буфер
ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота
ЭК эндотелиальные клетки
ЭТС эмбриональная телячья сыворотка
ВСБ. антигсн-распознающий рецептор В-клеток
СП кластер дифференцировки
СМХ-Коэ хлорометил-Х-розамин
ПЮСб дигексилокарбоцианина йодид
Б1ТС флюоресцеин изотиоцианат
т-СЬССР хлорофенилгидразон карбонила цианид
ТСК антиген-распознающий рецептор Т-клеток
РЕ фикоэритрин
Р1 пропидия йодид

A'Fn,

РегСР
трансмембранный митохондриальный потенциал
аллофикоцианин
перридин хлорофильный белок

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. АПОПТОЗИЕГО РОЛЬ ПРИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ
1Л. 1. Апоптоз как вид клеточной гибели
1Л .2. Регуляция апоптоза
1Л .3. Роль апоптоза в норме и при патологии
1.1.4. Роль апоптоза в патогенезе ВИЧ-инфекции
1.2. АНТИГЕН-ПРЕЗЕНТИРУЮЩИЕ КЛЕТКИ (АПК) ПРИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ
1.2.1. Роль различных типов АПК в регуляции иммунного ответа
1.2.2. Взаимоотношения АПК и Т-клеток при ВИЧ-инфекции
1.3. БЕЛОК ВИЧ-1 ИеШ ЕГО РОЛЬ В РЕГУЛЯЦИИ ВИРУСНОЙ РЕПЛИКАЦИИ И АПОПТОЗА ЛИМФОЦИТОВ 75 ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Характеристика исследуемого материала
2.2. Методы выделения и культивирования клеток
2.3. Методы исследования апоптоза лимфоцитов периферической крови
2.4. Методы оценки репликации ВИЧ-1
2.5. Реактивы и оборудование
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Роль эндотелиальных клеток в репликации ВИЧ-1.
3.2. Роль эндотелиальных клеток в регуляции апоптоза продуктивно инфицированных и неинфицированных
С04+ - лимфоцитов.
3.3. Профессиональные антиген-презентирующие клетки и их роль

изучены. Описание всех возможных путей ГК-индуцированного апоптоза не входит в задачу данного обзора литературы. Обозначим лишь некоторые:
а) показано, что ГК повышают экспрессию кальмодулина, регулирующего уровень внутриклеточного Са2+, что является одной из предпосылок для развития апоптоза (Baughman G., 1991.). Другими исследователями также было показано, что добавление в культуру клеток физиологических концентраций Дн приводило к 3-4-х кратному увеличению уровня внутриклеточного Са2+, а блокада этого процесса добавлением кальций-связывающих агентов блокировала ГК-индуцированный апоптоз (McConkeyD., 1989).
б) под влиянием ГК повышается экспрессия тканевой трансглутаминазы, связывающей различные белки. Предполагается, что данный процесс приводит к образованию апоптотических телец, а также препятствует выделению хемоаттрактантов для клеток воспаления (Tenniswood М.Р., 1992; Guenette R.S., е.а.)
в) под действием ГК в клетках снижается продукция ИЛ-2 (Helmberg А., 1995), а добавление в среду культивирования тимоцитов цитокинов ИЛ-2 и ИЛ-4 блокирует ГК-индуцированный апоптоз (Perrin -Wolf М., 1995; Rebollo А., 1995).
Помимо непосредственного воздействия на клетку и их апоптогенного эффекта, ГК играют важную роль в процессах элиминации клеток, подвергшихся апоптозу. В частности, было показано, что инкубация макрофагов с метилпреднизолоном, гидрокортизоном и дексаметазоном усиливает фагоцитоз как нейтрофилов, так и Эф, уже имеющих признаки апоптоза (Lui Y., 1999). Кроме того, существенное влияние ГК на синтез цитокинов (например, ИЛ-4, ИЛ-5), необходимых для выживаемости ряда клеток (в частности, Эф), может оказывать существенное влияние на процессы их гибели по механизму апоптоза.
На процессы ПКГ оказывают влияние и другие гормоны. В частности, андрогены, секретируемые семенниками, являются одним из факторов