Участие эндотелина-1 в развитии реноваскулярной гипертензии у крыс с интактными семенниками и у гонадэктомированных половозрелых самцов

• Автор: Илатовская, Мария Евгеньевна
• Шифр специальности: 03.03.01, 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 161 с. : ил.

Оглавление
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Функция почек в поддержании артериального давления

1.1 Физиологические механизмы почки участвующие в регуляции артериального

давления

1.1.1 Основные механизмы авторегуляции в почке

1.1.2 Регуляция реабсорбции натрия и воды

1.1.3 Концентрирование мочи в собирательных трубках и роль вазопрессина

1.2 Роль нервной системы в регуляции работы почки

2 Реноваскулярная гипертензия
2.1 Патогенез реноваскулярной гипертензии
2.2 Патологические проявления в почках на фоне реноваскулярной гипертензии
2.2.1 Патогенез ишемической нефропатии и интерстициального фиброза
2.2.2 Роль чувствительного к гипоксии транскрипционного фактора Н1Е
3 Эндогенный вазоактивный пептид эндотелии-
3.1. Синтез эндотелина-1 в организме животных
3.1.1. Ферментативные пути синтеза эндотелина-
3.2. Рецепторы, взаимодействующие с эндотелином-1 в сердечно-сосудистой системе..
3.3. Предполагаемая роль эндотелина-1 в гипертензии
3.4. Роль эндотелина-1 в фиброгенезе и повреждении почек
3.5. Применение ингибиторов эндотелинпревращающего фермента
3.6. Эндотелиновая система почек
3.6.1 Синтез эндотелина-1 в почках
3.6.2 Экспрессия рецепторов к эндотелину-1 в почках
3.6.3 Эндотелин-1 как модулятор тонуса почечных сосудов и клубочковой фильтрации
3.6.4 Эндотелин-1 как регулятор реабсорбции натрия
3.6.5 Эндотелин-1 изменяет чувствительность собирательной трубки к вазопрессину
3.7 Участие эндотелина-1 в работе нервной системы
4 Участие андрогенов в регуляции работы почек и сердечно-сосудистой системы
4.1 Синтез и механизмы действия андрогенов
4.2 Влияние половых гормонов на патологические процессы при гипертензии
4.3 Влияние андрогенов на функции почки посредством ренин-ангиотензиновой системы
4.4 Влияние тестостерона на развитие экспериментальных патологий почек
4.5 Половые отличия в эффектах вазопрессина
4.6 Половые отличия и влияние андрогенов на систему эндотелина
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Животные и протокол хронического эксперимента
1.1 Деление животных на экспериментальные группы
1.2 Проведение кастрации
1.3 Проведение операции для моделирования реноваскулярной гипертензии
1.4 Методы применения ингибитора эндотелинпревращающего фермента
1.5 Оценка прироста массы тела экспериментальных крыс
1.6 Оценка гипертрофии левого отдела сердца
2. Метод измерения систолического артериального давления плетизмографическим методом
(«с хвоста»)
3. Методы изучения биохимических показателей функции почки и ее водовыделительной
функции
3.1 Сбор мочи в метаболических камерах
3.2 Сбор крови для определения биохимических показателей функции почки
3.3 Применение аналитических методов для оценки функции почки
4. Гистологическое исследование почек
5. Биохимические методы
5.1 Количественное определение эндотелина-1 в плазме крови и моче
экспериментальных крыс
5.2 Количественное определение тестостерона в крови

5.3 Количественное определение ангиотензина-2 в плазме крови
5.4 Количественное определение общей продукции оксида азота
6. Статистическая обработка результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ
I. ИЗУЧЕНИЕ РОЛИ ПОЧЕЧНОГО СИНТЕЗА ЭТ-1 В МОДЕЛИ РЕНОВАСКУЛЯРНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ 1П13 У КРЫС С ИНТАКТНЫМИ СЕМЕННИКАМИ
1 Влияние хронического применения ингибитора эндотелинпревращающего фермента РР
на развитие реноваскулярной гипертензии
1.1 Динамика изменения САД у ложнооперированных крыс и крыс с реноваскулярной
гипертензией на фоне хронического применения РР
1.2 Влияние реноваскулярной гипертензии и ингибитора ЭПФ РР36 на массу тела экспериментальных крыс в течение четырех недель после операции
1.3 Влияние ингибитора ЭПФ РР36 на вес левого отдела сердца у крыс с реноваскулярной гипертензией и у ложнооперированных животных
1.4 Изучение содержания ангиотензина-2 в плазме крови крыс с реноваскулярной гипертензией на фоне хронического применения ингибитора ЭПФ
2 Изучение эффективности применения ингибитора ЭПФ РР
2.1 Изучение влияния хронического применения ингибитора ЭПФ РР36 на содержание ЭТ-1 в плазме крови у крыс с реноваскулярной гипертензией и у нормотензивных животных
2.2 Изучение влияния хронического применения ингибитора ЭПФ РР36 на экскрецию ЭТ-1 с мочой у крыс с реноваскулярной гипертензией и у нормотензивных животных
3 Влияние хронического применения ингибитора ЭПФ РР36 на выделительную функцию почек и водно-солевой баланс у крыс с реноваскулярной гипертензией и у
ложнооперированных животных
3.1 Влияние ингибитора ЭПФ РР36 на содержание креатинина и мочевины в сыворотке крови
3.2 Влияние ингибитора ЭПФ РР36 на клиренс эндогенного креатинина у крыс с реноваскулярной гипертензией и у ложнооперированных животных
3.3 Влияние ингибитора ЭПФ РР36 на осмоляльность и ионный состав плазмы крови.
3.4 Влияние ингибитора ЭПФ РР36 на осмоляльность мочи
3.5 Влияние хронического применения ингибитора ЭПФ РР36 на осмотический клиренс
и клиренс осмотически свободной воды

фосфорамидона. В этой модели ингибиторы вводили в виде внутривенной инъекции за 5 минут до 45-минутной ишемии с последующей реперфузией. Выяснили, что блокаторы, в особенности SM-19712, снижали почечное содержание ЭТ-1, повышенное после ишемии-реперфузии и улучшали как морфологическую структуру ткани (снижение степени тубулярного некроза, количества белковых цилиндров в канальцах, уменьшение сжатия ткани и гемморагии в медуллярном слое), так и выделительную и осморегулирующую функцию почки. А именно, ингибиторы повышали клиренс креатинина, снижали содержание креатинина и мочевины в крови, уменьшали избыточный диурез гипотоничной мочи, восстанавливали нормальные значения осмоляльности мочи и фракционной экскреции натрия (Matsumura Y. и др., 2000).
Другие созданные ингибиторы ЭПФ, как оказалось, помимо снижения активности ЭПФ, также в различной степени ингибировали активность НЭП. Их испытания на экспериментальных моделях оказались довольно успешными, возможно, благодаря дополнительному протективному эффекту снижения деградации предсердного натриуретического пептида (ANP). Поэтому дальнейшие исследования уже велись в основном на ингибиторах, снижающих активность обоих ферментов (двойной эффект). Единственным ингибитором ЭПФ, который дошел до стадии клинических испытаний, является даглутрил (SLV-306) — вещество с двойным эффектом (Kirkby N.S. и др., 2008), которое исследуют на пациентах с диабетической нефропатией. Хотя не все запущенные клинические исследования с этим препаратом завершены, как заключают исследователи одного завершенного исследования, возможно, даглутрил может быть использован при гипертонии, ассоциированной с диабетом 2 типа, поскольку снижает систолическое АД на 7,5 мм рт.ст. Однако с другой стороны, ожидания исследователей не полностью оправдались, поскольку даглутрил не влиял на уровень альбуминурии у этих пациентов, а также изредка приводил к умеренным перифирическим отекам, что говорит о недостаточном протективном эффекте в почках (Parvanova А. и др., 2013).
Таким образом, можно заключить, что основные перспективы применения ингибиторов ЭПФ, как специфических, так и обладающих двойной направленностью эффекта, лежит в области почечных патологий, ассоциированных с гипертензией. Однако, как будет описано далее, ЭТ-1 обладает не только патологическими эффектами в почках, но и является важным компонентом регуляции нормальной функции почек.
Согласно современным представлениям, ЭТ-1 играет важную роль в стимуляции экскреторной функции почки в норме, при солевой нагрузке и при введении избыточной жидкости. При этом, показано, что практически весь ЭТ-1, синтезируемый в почках, выводится с мочой (Goddard J. и др., 2007), и весь ЭТ-1 в моче имеет почечное происхождение (Abassi Z.A. и др., 1992; Dhaun N., Goddard J., Webb D.J., 2006). В связи с этим почечный ЭТ-1 и его