Роль пресинаптических рианодиновых рецепторов в регуляции кинетики секреции квантов ацетилхолина в нервно-мышечных синапсах на разных стадиях постнатального онтогенеза

• Автор: Хузахметова, Венера Фаритовна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 146 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Современные представления о временных параметрах процесса вызванной квантовой секреции медиатора и механизмах их модуляции в синапсах химического типа

2.2. Фазное синхронное освобождение квантов медиатора в синаптическом контакте

2.3. Задержанное асинхронное освобождение квантов медиатора

2.4. Кальций - главный модулятор интенсивности фазного синхронного и задержанного асинхронного освобождения квантов медиатора

2.5. Рианодиновые рецепторы: строение и участие в регуляции секреции

2.6. Участие внутриклеточных РиР в Са2+-сигнализации

2.7. Роль РиР в синаптической пластичности

2.8. Взаимодействие РиР с потенциал-зависимыми кальциевыми каналами

2.9. Особенности передачи возбуждения в развивающихся синапсах теплокровных
3. МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ
3.1. Экстраклеточная регистрация синаптических ответов
3.2. Регистрация токов действия нервного окончания и одноквантовых токов концевой пластинки
3.3. Анализ параметров одноквантовых ТКП
3.4. Оценка временных параметров секреции квантов медиатора
3.5. Флуоресцентное окрашивание
3.6. Иммуногистохимический анализ

3.7. Статистическая обработка результатов
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Синхронное и асинхронное освобождение при разных частотах ритмической стимуляции двигательного нерва в синапсах взрослых животных
4.2. Синхронное и асинхронное освобождение при разных частотах ритмической стимуляции двигательного нерва в синапсах новорожденных животных
4.3. Изменение флуоресцентного кальциевого ответа при ритмической стимуляции при блокаде рианодиновых рецепторов
4.4. Анализ секреции квантов медиатора в синапсах взрослых животных в присутствии блокаторов рианодиновых рецепторов
4.4.1 Параметры синхронного и асинхронного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах взрослых животных при действии рианодина
4.4.2. Параметры вызванного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах взрослых животных при действии ТМВ-
4.4.3. Параметры вызванного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах взрослых животных при действии дантролена
4.4.4. Параметры вызванного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах взрослых животных при действии рианодина в условиях близких к физиологическим
4.5. Анализ синхронной и асинхронной секреции квантов медиатора в синапсах новорожденных животных при блокаде рианодиновых рецепторов
4.5.1. Параметры синхронного и асинхронного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах 6-ти дневных животных в присутствии блокаторов рианодиновых рецепторов
4.5.2. Параметры синхронного и асинхронного освобождения

квантов ацетилхолина в синапсах 10-ти дневных животных в присутствии блокаторов рианодиновых рецепторов
4.6. Иммуногистохимический анализ наличия дигидропиридин-чувствительных кальциевых каналов в синапсах животных разного возраста
4.7. Участвуют ли дигидропиридин-чувствительные кальциевые каналы в модуляции временных параметров секреции в синапсах новорожденных и взрослых животных?
4.7.1. Параметры синхронного и асинхронного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах новорожденных животных при блокировании Ь-типа кальциевых каналов
4.7.2. Параметры синхронного и асинхронного освобождения квантов ацетилхолина в синапсах взрослых животных при блокировании Ь-типа кальциевых каналов
4.8. Исследование параметров синхронного и асинхронного освобождения квантов медиатора в синапсах взрослых животных при изменении активности дигидропиридин-чувствительных кальциевых каналов в условиях пролонгированного пресинаптического потенциала действия
4.8.1. Изменение интенсивности фазной синхронной и задержанной асинхронной секреции медиатора при блокаде Ь-типа Са2+-каналов на фоне действия 4-аминопиридина в синапсах взрослых животных
4.9. Анализ синхронного и асинхронного освобождения медиатора при активации рианодиновых рецепторов на фоне блокады Ь-типа Са2+-каналов
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

обработка синапсов кофеином (Wilson, 1973; Narita et al., 1989; Krizaj et al., 1999), рианодином (0.1 - 1.0 мкМ) (Nishimura et al., 1990; Балезина и др., 2001), цАДФ-рибозой (Mothet et al., 1998; Brailuiu, Miyamoto, 2000) или ионами кальция (с помощью кондиционирующего залпа импульсов или калиевой деполяризации терминали) (Narita et al., 1989) приводит к увеличению вызванного освобождения медиатора в виде увеличения амплитуды одиночных ВПСП или амплитуды ПКП, а блокада РиР с помощью дантролена, высоких доз рианодина вызывает снижение амплитуды одиночных ответов на 20% в холинергических синапсах буккального ганглия апплизии (Fossier et al., 1998; 1999) и на 30-50% в нервно-мышечных синапсах позвоночных (Narita et al., 1989; Балезина, Букия, 2001).
Приведенные данные свидетельствуют об участии депонированного кальция и Са2+-индуцированного освобождения Са2+ в запуске одиночных вызванных ответов в синапсах. Показано, что в терминалях «быстрых» центральных синапсов мозга млекопитающих (Wu et al., 1999; Bollman et al., 2000), моторных периферических синапсов (Narita et al., 1989; Зефиров, Черанов, 2000), в пресинаптических активных зонах нейронов зрительного (Lenzi et al., 1999) и слухового анализатора (Beutner et al., 2001) при генерации одиночного ПД может происходить наложение Са2+-микродоменов и образование Са2+-макродомена. Даже при удалении источника освобождения Са2+ в аксоплазму на 100 нм от места докирования везикулы (в активной зоне), этот Са2+ способен оказывать влияние на готовность и экзоцитоз везикулы (Neher, 1998), а следовательно и на кинетику освобождения медиатора.
2.8. Взаимодействие РиР с потенциал-зависимыми кальциевыми каналами
Как показали проведенные ранее исследования на нервно-мышечных синапсах лягушки и мыши, понижение внеклеточной концентрации ионов кальция приводило к более выраженной асинхронности поздней фазы секреции, что проявлялось в расширении гистограммы распределения синаптических