Регуляторные изменения артерий почек у крыс при сахарном диабете 1 типа

• Автор: Болеева, Галина Сергеевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 124 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ИЗМЕНЕНИЯ СИСТЕМЫ КРОВООБРАЩЕНИЯ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ

1.1 Изменения параметров системной гемодинамики и скорости кровотока в разных органах

1.2 Изменения экскреторной функции почек

1.3 Функциональные изменения артерий разных органов

1.3.1 Изменения симпатической иннервации

1.3.2 Изменения регуляции сокращения гладкой мышцы сосудов

1.3.2.1 Общая характеристика механизмов регуляция сокращения гладкой мышцы сосудов

1.3.2.2 Влияние диабета на регуляцию сокращения гладкой мышцы сосудов

1.3.3 Изменения секреторной функции эндотелия
1.3.3.1 Регуляторные факторы, секретируемые эндотелием сосудов
1.3.3.2 Изменение секреторной функции эндотелия при сахарном диабете
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Экспериментальные животные
2.2 Моделирование сахарного диабета 1 типа у крыс
2.3 План проведения исследований
2.4 Оценка морфологических и функциональных изменений в организме крыс с сахарным диабетом 1 типа
2.4.1 Измерение концентрации глюкозы в крови
2.4.2 Исследование почечной функции в метаболических камерах
2.4.2.1 Методика проведения эксперимента в метаболических камерах
2.4.2.2 Методики определения показателей в образцах крови и мочи
2.5 Методика денервации левой почки у крыс
2.6 Методики исследования артериальных сосудов
2.6.1 Подготовка к эксперименту
2.6.2 Визуализация адренергических нервных волокон в артериях почки
2.6.3 Исследование реакций изолированных артерий

2.6.3.1 Принцип метода
2.6.3.2 Удаление эндотелия
2.6.3.3 Нормализация (определение оптимального растяжения препарата)
2.6.3.4 Активация препарата
2.6.3.5 Материалы (фармакологические агенты), использовавшиеся в экспериментах на изолированных сосудах
2.6.3.6 Протоколы экспериментов
2.6.3.7 Обработка результатов экспериментов на изолированных сосудах
2.7 Статистическая обработка результатов
3 РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1 Характеристика модели индуцированного стрептозотоцином сахарного диабета у крыс
3.1.1 Изменения концентрации глюкозы в крови, массы тела и почек
3.1.2 Результаты исследования физиологических и биохимических показателей с использованием метаболических камер
3.2 Регуляторные изменения артерий разных органов у крыс с диабетом
3.3 Реакции артерий почки в растворах с нормальной и повышенной концентрацией глюкозы
3.4 Эффекты ингибиторов Rho-киназы и ПКС на сократительные ответы артерий почки с интактным эндотелием в контроле и при диабете
3.5 Сравнение реакций на метоксамин артерий почки с интактным и удаленным эндотелием
3.6 Эффекты ингибиторов Rho-киназы и ПКС на сократительные ответы артерий почки с удаленным эндотелием в контроле и при диабете
3.7 Плотность иннервации артерий почки в контроле и при диабете
3.8 Эффекты ингибиторов Rho-киназы и ПКС на сократительные ответы денервированных артерий почки с удаленным эндотелием
3.9 Механизмы изменения эндотелий-зависимых реакций артерий почки при
диабете
3.9.1 Сравнение компонентов реакции артерий почки на ацетилхолин у контрольных и диабетических крыс

3.9.2 Сравнение компонентов реакции на ацетилхолин у двух подгрупп крыс с
диабетом
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 Изменения артерий почки при диабете по сравнению с артериями других органов
4.2 Механизмы функциональных изменений гладкой мышцы артерий почки при диабете. Роль трофического влияния симпатических нервов
4.3 Механизмы функциональных изменений эндотелия артерий почки при диабете

ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

- концентрации Р-кетонов в крови и гематокрита (также через 4 недели и
недель после введения СТЗ).
2.4.1 Измерение концентрации глюкозы в крови
Концентрацию глюкозы в цельной крови измеряли электрохимическим методом с использованием портативных глюкометров: Optium Xceed (Abbott, США) или Super Glucocard II GT-1640 (Arkray Inc., Япония).
Крысу брали в руки и обрабатывали хвост 70% этиловым спиртом. С помощью ножниц надрезали кончик хвоста, выдавливали кашпо крови и наносили ее на тест-полоску, заранее помещенную в глюкометр. Через несколько секунд регистрировали значение концентрацию глюкозы в крови: при использовании глюкометра Optium Xceed - через 5 сек., а при использовании глюкометра Super Glucocard II - через 30 сек.
2.4.2 Исследование почечной функции в метаболических камерах
2.4.2.1 Методика проведения эксперимента в метаболических камерах
Развитие сахарного диабета 1 типа сопряжено с нарушением экскреторной функции почек. При этом известно, что развитие диабетической нефропатии включает несколько стадий: на ранней стадии развивается гиперфильтрация, которая затем постепенно переходит в стадию гипофильтрации, сопряженной с нарушением проницаемости почечного фильтра и экскрецией белка [Уоткинс, 2006]. На ранней стадии развития стрептозотоцинового диабета у животных это проявляется в гипертрофии почек, увеличении скорости гломерулярной фильтрации, повышении диуреза, натрийуреза и экскреции белка [Samnegard et al., 2001; Samnegard et al., 2005; Rebsomen et al., 2006; Maezawa et al., 2006].
Чтобы охарактеризовать функционирование почек у крыс в наших экспериментах, мы проводили эксперименты с использованием метаболических камер. Также регистрировали потребление животными корма и массу фекалий, как показатели интенсивности обмена веществ в организме. Тестирование проводили через 4 недели и 6 недель после введения СТЗ.