Морфофункциональная и биохимическая альтерация клеток крови квантовыми точками

• Автор: Михеева, Эльза Равилевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 111 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КЛЕТОК С КВАНТОВЫМИ

ТОЧКАМИ

1Л. Физико-химическая характеристика квантовых точек

1.2. Механизмы проникновения квантовых точек в клетки

ГЛАВА 2. АЛЬТЕРАЦИЯ РАЗЛИЧНЫХ ТИПОВ КЛЕТОК КВАНТОВЫМИ

ТОЧКАМИ
ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3 Л. Материалы исследования
3.2. Методы исследования
3.2.1. Выделение нейтрофилов из крови
3.2.2. Исследование жизнеспособности клеток крови в системе с квантовыми точками
I 3.2.3. Исследование морфологических изменений нейтрофилов в системе с квантовыми точками методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии
3.2.4. Исследование нейтрофилов в системе с квантовыми точками методом атомно-силовой микроскопии
3.2.5. Исследование воздействия квантовых точек на кислородзависимую систему нейтрофилов
3.2.6. Исследование воздействия квантовых точек на кислороднезависимую систему нейтрофилов
3.2.7. Исследование биохимических изменений нейтрофилов в системе с квантовыми точками
3.2.8. Исследование способности нейтрофилов к СЗЬ-зависимой адгезии
3.2.9. Исследование спектральных характеристик квантовых точек после инкубации с нейтрофилами

3.2.10. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
3.2.11. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
4.1. Распределение квантовых точек в лейкоцитарной фракции крови
4.2. Исследование жизнеспособности нейтрофильных гранулоцитов в системе с квантовыми точками
4.3. Визуализация динамики взаимодействия и морфологических изменений нейтрофилов в системе с квантовыми точками
4.4. Функциональное состояние нейтрофилов в системе с квантовыми точками
4.5. Биохимические изменения нейтрофилов в системе с квантовыми
точками
4.6. Исследование комплексного воздействия квантовых точек на кровь
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АСМ - атомно-силовая микроскопия
АТАБ — ацетилтриметиламмониум бромид
АТАМ — ацетилтриметиламмония метил
АФК - активные формы кислорода
БСА - бычий сывороточный альбумин
ГТФ - гуанозинтрифосфат
ДСН - додецилсульфат натрия
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт
ИК - инфракрасный
ИЛ - интерлейкин
КБ - катионные белки
КТ - квантовые точки
КФ - кислая фосфатаза
ЛПНП - липопротеины низкой плотности
МЖС - модель желудочного сока
МПК — меркаптопропионовая кислота
МУК — меркаптоуксусная кислота
НГ — нейтрофильный гранулоцит
НСТ - нитросиний тетразолий
НЧ - наночастицы
ПОЛ — перекисное окисление липидов ПЭГ - полиэтиленгликоль
ПЭМ — просвечивающая электронная микроскопия
РС - роговой слой
СОД - супероксид дисмутаза
СЦК - средний цитохимический коэффициент
ТОФА - триоктилфосфиназот
ТОФО - триоктилфосфиновая окись
УФ — ультрафиолет

(Gibson и соавт., 1996; Sansonetti и соавт., 1999; Fleckenstein и соавт., 2001). Если во время переваривания наночастиц образуются токсичные вещества, то они могут повредить эпителиальные клети кишечника и, следовательно, ослабить их защитную функцию. L. Wang и соавт. (2008) было показано отделение эпителиальных клеток Сасо-2 от основания культуры после их инкубации с квантовыми точками CdSe/ZnS-ПЭГ-СОО'. Проведенный МТТ-тест показал, что не все отделившиеся клетки погибают, а отделение клеток Сасо-2 возможно происходило из-за начала апоптоза. Оболочка ZnS и гидрофильное покрытие" ПЭГ-COO' предотвращали выход свободных ионов кадмия из ядра КТ в клеточную среду. Однако, учитывая кислую среду желудка с pH близкой к 1, L. Wang и соавт. (2008) выявили увеличение цитотоксического действия КТ, предварительно выдержанных в кислой среде с pH 1, и снижение жизнеспособности клеток Сасо-2 до 90% после инкубации с ними. Эти результаты предполагают, что защитная1 функция1 оболочки ZnS так же как и поверхностного покрытия не может противостоять кислой среде желудка: из-за повышенного содержания протонов в среде, которые легко могут взаимодействовать, с СОО'-группой покрытия. В. результате происходит постепенное удаление с поверхности КТ внешнего защитного покрытия, а оболочка ZnS под воздействием НС1 может распадаться с образованием ZnCb и H2S, в итоге обнажается кадмий-содержащий кор CdSe, при окислении которого высвобождаются ионы кадмия Cd2+ — токсичные для клетки.
При инкубации клеток Сасо-2 с КТ CdSe наблюдалось значительное снижение жизнеспособности клеток. Однако, при предварительной инкубации КТ с моделью желудочного сока (pH 1,2) и последующей инкубации их с клетками, L. Wang и соавт. (2008) не обнаружили снижения жизнеспособности клеток, проинкубированных с КТ CdSe, в отличие от клеток, проинкубированных с КТ CdSe/ZnS-ПЭГ-СОО', а напротив, уменьшение цитотоксичности КТ CdSe. После инкубации клеток с CdSe 4:1 (соотношение содержания ионов кадмия и селена в КТ), взятых в концентрации 50 нмоль/мл, жизнеспособность клеток составляла 32,2%, тогда как после обработки КТ