Механизмы влияния макрофагов на репаративную регенерацию

• Автор: Казакова, Ирина Александровна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Екатеринбург
• Количество страниц: 170 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Глава 1 Влияние макрофагов на репаративную регенерацию почек и печени

1.1 Общая характеристика системы фагоцитирующих мононуклеаров и её эффекторных клеток: моноцитов и макрофагов

1.2 Резидентные макрофаги почек и их влияние на регенерацию органа

1.2.1 Особенности регенерации почек

1.2.2 Макрофагальная регуляция репаративной регенерации почек

1.3 Резидентные макрофаги печени и их влияние на регенерацию органа

1.3.1 Особенности регенерации печени

1.3.2 Макрофагальная регуляция репаративной регенерации печени

1.4 8СР/СБ117 лиганд/рецепторное взаимодействие: общая характеристика и роль в регенерации почек и печени
1.4.1 С0117+ клетки почек и их участие в восстановление органа после повреждения
1.4.2 С0117+ клетки печени и их участие в восстановление органа после повреждения
Глава 2 Методические вопросы исследования
2.1 Общая характеристика лабораторных животных
2.2 Моделирование повреждения печени и почек
2.2.1 Методика резекции почек
2.2.2 Методика резекции печени
2.3 Оценка регенеративных процессов в почках и печени
2.4 Иммуногистохимическое исследование срезов почек/печени
2.4.1 Анализ срезов, окрашенных анти-Кь67 антителами
2.4.2 Анализ срезов, окрашенных анти- СО 172а антителами
2.4.3 Анализ срезов, окрашенных анти-С0117 антителами
2.5. Исследование содержания стволовых гемопоэтических клеток в крови и костном мозге мышей при повреждении почек/печени
2.6 Методы изменения функционального состояния системы фагоцитирующих
мононуклеаров
2.7 Статистические методы, используемые для обработки экспериментального
материала
Глава 3 Изучение регенерации почек и реакции СБ117+ клеток различной локализации у мышей после частичной нефрэктомии
3.1 Оценка регенеративных показателей почек у животных, перенесших лапаротомию
3.2 Репаративная регенерация почек после частичной нефрэктомии
3.2.1 Реакция гломерулярного аппарата на частичную нефрэктомию
3.2.2 Реакция канальцевого аппарата на частичную нефрэктомию
3.3 Оценка экспрессии С0117 в почках
3.3.1 Оценка экспрессии СБ117 канальцевыми эпителиоцитами почек интактных и лапаротомированных мышей
3.3.2 Оценка экспрессии СБ117 канальцевыми эпителиоцитами после частичной нефрэктомии
3.4 Оценка количества С0117+ стволовых клеток в крови и костном мозге после частичной нефрэктомии
3.4.1 Оценка количества С0117+ клеток с различным фенотипом в крови и костном мозге лапаротомированных мышей
3.4.2 Оценка количества СБ117+ клеток с различным фенотипом в крови
и костном мозге мышей после частичной нефрэктомии
3.5 Оценка содержания моноцитов-макрофагов в почках и костном мозге мышей
3.5.1 Содержание моноцитов-макрофагов в почках и костном мозге интактных и лапаротомированных мышей
3.5.2 Содержание моноцитов-макрофагов в почках и костном мозге нефрэктомированных мышей
3.6 Заключение

Глава 4 Изучение регенерации почек и сотояния СИ117+ клеток различной локализации у мышей после частичной нефрэктомии при ингибировании
функционального состояния СФМ
4.1 Оценка показателей репаративной регенерации после частичной нефрэктомии в условиях ингибирования функционального состояния СФМ..
4.1.1 Реакция гломерулярного аппарата на частичную нефрэктомию при ингибировании функционального состояния СФМ
4.1.2 Реакция канальцевого аппарата на частичную нефрэктомию при ингибировании функционального состояния СФМ
4.2. Оценка экспрессии СЭ117 канальцевыми эпителиоцитами после частичной нефрэктомии при ингибировании СФМ
4.3 Оценка количества С0117+ клеток с различным фенотипом в крови и костном мозге мышей после частичной нефрэктомии при ингибировании СФМ
4.4 Оценка содержания моноцитов-макрофагов в почках и костном мозге мышей после частичной нефрэктомии при ингибировании функционального состояния СФМ
4.5 Заключение
Глава 5 Изучение регенерации почек и состояния С0117+ клеток различной локализации у мышей после частичной нефрэктомии при стимуляции функционального состояния СФМ
5.1 Оценка показателей репаративной регенерации после частичной нефрэктомии при стимуляции функционального состояния СФМ
5.1.1 Реакция гломерулярного аппарата на частичную нефрэктомию при стимуляции функционального состояния СФМ
5.1.2 Реакция канальцевого аппарата на частичную нефрэктомию при стимуляции функционального состояния СФМ
5.2 Оценка экспрессии СБ117 канальцевыми эпителиоцитами после частичной нефрэктомии при стимуляции функционального состояния СФМ

?if л' Синтез HGF осуществляется преимущественно в звездчатых и синусоидальных клетках и стимулируется действием норадреналина и IL-6 [141, 190].
Прямым митогеном для гепатоцитов является также синтезируемый Бруннеровыми железами кишечника и перисинусоидальными клетками печени EGF - эпидермальный ростовой фактор. EGF активирует рецептор EGFR, который способен активироваться и под действием TGF-a, также являющегося прямым митогеном для гепатоцитов. TGF-a синтезируется самими гепатоцитами и кроме аутокринного действия способен действовать паракринно, вызывая пролиферацию клеток синусоидов и желчных протоков. Подъем уровня TGF-a отмечается через 2-3 часа после частичной гепатэктомии, достигая максимума к 48 часам [125, 163, 190, 264].
Синтезируемые клетками Купфера TNF-a и IL-6 играют важную роль в восстановлении печени после повреждения. Уровень этих цитокинов значительно увеличивается в крови после частичной гепатэктомии, а блокирование их активности тормозит регенерацию печени [125, 163, 190].
Так, в экспериментах Akerman Р. et al. установлено, что при введении мышам антител к TNF-a восстановление печени после частичной гепатэктомии значительно замедляется [84]. Исследователями Yamada Y. et al. в экспериментах на нокаутных мышах, не имеющих рецептора к TNF-a, показано, что репаративная регенерация печени после аналогичной операции протекает медленнее и заканчивается позднее, чем у мышей дикого типа [155].
Долгое время считалось, что TNF-a не оказывает прямого митогенного эффекта на гепатоциты. Webber Е.М. et al. показали, что TNF-a лишь увеличивает пролиферативный эффект прямых митогенов гепатоцитов HGF и TGF-a, временно активируя NFkB и STAT3 пути [268]. Однако в последние 10 лет развитие лабораторных методов исследования позволило более глубоко изучить данный вопрос и все большее количество ученых склоняется к мнению, что и TNF-a способен напрямую стимулировать пролиферацию гепатоцитов, что, в частности, показано на культуре первичных гепатоцитов в экспериментах Iocca
H.A. et al. [162].