Динамика развития паркинсонизма на нейротоксической модели у мышей линии C57BL/6

• Автор: Щеголевский, Николай Валентинович
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с. : ил.

Оглавление
Введение
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1. Регуляция моторного поведения в норме и при паркинсонизме
1.1. Структурная организация моторного контроля
1.2. Регуляция моторного поведения: нейрохимические механизмы
1.3. Медиаторные синаптические системы дорзального стриатума и
их роль в регуляции моторного поведения
1.4. Дофаминергическая система среднего мозга и ее роль в регуляции моторного поведения
1.5. Роль холинергической системы стриатума в регуляции моторного поведения
1.6. Нарушение регуляции моторного поведения при паркинсонизме
1.7. Экспериментальные модели болезни Паркинсона на животных
1.7.1. Факторы, вызывающие развитие болезни Паркинсона
1.7.1.1. Генетические факторы............................... • 28 •
1.7.1.2. Другие гены, имеющие отношение к болезни Паркинсона
1.7.1.3. Токсические факторы
1.7.2. Модели паркинсонизма на животных
1.7.2.1. Генетические модели
1.7.2.2. Токсические модели
Глава 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Животные
2.2. Операция по установке платформы к микродиализной канюле
2.3. Микродиализ
2.4. Протокол эксперимента
2.5. Исследование поведения мышей в открытом поле
2.6. Статистическая обработка результатов
2.7. Морфологический контроль

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Предварительные исследования
3.1.1. Наладка метода микродиализа на крысах
3.1.2. Микродиализ дофамина и его метаболитов из стриатума мышей
3.2. Основные исследования
3.2.1. Первая группа животных. Однократное внутрибрюшинное введение МФТП, в дозе 20 мг/кг
3.2.1.1. Поведение животных
3.2.1.2. Микродиализ дофамина и его метаболитов из стриатума мышей
3.2.2. Вторая группа животных. Однократное подкожное введение МФТП, в дозе 12 мг/кг
3.2.2.1. Поведение животных
3.2.2.2. Микродиализ дофамина и его метаболитов из стриатума мышей
Глава4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение
Хронические нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Паркинсона (БП), болезнь Альцгеймера (БА), хорея Гентингтона и другие относятся к социально значимым заболеваниям, на лечение и исследование которых тратятся огромное количество денег во многих государствах [Голубев и др., 1999; Шток и др., 2002; Marras, Tanner, 2004; Левин, Федорова, 2006; Гаврилова, 2007, Угрюмов, 2010].
Вопрос об этиологии нейродегенеративных заболеваний до сих пор остается нерешенным, хотя считается, что важнейшими факторами риска являются генетическая предрасположенность и эндогенные вещества, запускающие нейродегенеративный процесс. Так, в случае БП мутации в генах а-синуклеина, Паркина и других генов приводят к возникновению мутантных токсических белков, которые вызывают гибель специализированных нейронов нигро-стриатной дофаминергической системы и развитие болезни Паркинсона [Григорян, Базян, 2007; Базян, Григорян, 2010].
Несмотря на огромные усилия, которые тратятся различными государствами на паркинсонизм, проблема лечения этого заболевания встречает все еще большие трудности. На самом деле это и понятно, так как дегенерацию и выподение целой нейромодуляторной системы мозга, практически невозможно восстановить, несмотря на все придпринимаемые до сих пор усилия. В основном пытаются компенсировать функцию выповшей нигростриатной ДА-ергической системы мозга введением L-ДОФА, предшественника синтеза ДА, легко проходящего через гематоэнцефалический барьер. До сих пор L-ДОФА остается одним из основных препаратов лечения паркинсонизма, но его длительное применение вызывает дискинезию, нарушение моторной функции. Поэтому, в ряде экспериментальных исследований L-ДОФА нормализует вызванные паркинсонизмом изменения [Lindefors 1993; Levy et al., 1995; Vila et al., 1996; Katz et al, 2005; Stephenson et al., 2005; Wang et al., 2007], a

Генетические модели основаны на «выключении» (knocking out) или изменении экспрессии ряда генов, которые контролируют синтез специфических белков, их функциональную роль в цитоплазме и протеолиз.
Альфа-синуклеиновые мыши. Белок а-синуклеина состоит из 140 аминокислот. Создано несколько линий трансгенных мышей у которых а-синуклеинового гена либо нет вообще (knocked-out), либо он наоборот чрезмерно выражен (overexpression) (на основе А30Р, А53Т или А30+А53Т). Мыши с нокаутным геном а-синуклеина проявляют меньшую активность в открытом поле; у них снижено содержание дофамина в стриатуме и уменьшено число резервных везикулов в нейронах гиппокампа [Abeliovich et al., 2000; Chandra et al., 2004]. Они полностью [Dauer et al., 2002] или частично [Schlüter et al., 2003; Drolet et al., 2004] резистентны к нейротоксическому действию МРТР. Чрезмерная экспрессия а-синуклеинового гена (во много раз превышающая значения эндогенного а-синуклеина) приводит к разнообразным патологиям и изменениям поведения [van der Putten et al., 2000; Rockenstein et al., 2002]. У большинства линий мышей со сверхэкспрессией а-синуклеина патологические отклонения возникают в основном в спинном мозге и в нервно-мышечных соединениях, и только в редких случаях - в нигро-стриатной дофаминергической системе [Richfield et al., 2002; Rockenshtein et al., 2002; Masliah et al., 2000]. У трансгенных мышей повреждения дофаминергических нейронов вызываются редко [Matsuoka et al., 2001], но при экспрессии одновременно двух мутаций гена (А30Р+А53Т) в условиях промоутера тирозин-гидроксилазы, происходит прогрессивное уменьшение плотности транспортера дофамина (DAT) и количество дофамина и его метаболитов в стриатуме [Richfield et al., 2002]. С возрастом у этих мышей снижаются спонтанная двигательная активность и вращательные движения, вызванные введением апоморфина и амфетамина [Richfield et al., 2002; Thiruchelvam et al., 2004]. Надо сказать, что усиление