Связь полиморфизма C1473G гена TPH2 с активностью триптофангидроксилазы-2 в мозге и поведением мышей

• Автор: Осипова, Дарья Вениаминовна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 98 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список используемых сокращений

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Триптофангидроксилаза (ТПГ)- ключевой фермент синтеза серотонина в мозге

1.1 ТПГ и синтез серотонина

1.2 Изоформы ТПГ

1.3 Структура молекулы ТПГ

1.4 Регуляция активности ТПГ

1.4.1 Транскрипционная регуляция

1.4.2 Посттранскрипцнонная регуляция

1.4.3 Посттрансляционная регуляция

1.5 Полиморфизм гена ТГ1Г2 человека
1.5.1 Структура гена ТПГ2 человека
1.5.2 Ассоциация вариантов гена ТПГ2 с психическими функциями человека
1.5.3 Функционально значимые варианты гена ТПГ
1.6 Моделирование наследуемых изменений функции ТПГ2 на животных
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Животные
2.1.1 Лабораторные мыши
2.1.2 Дикие мыши
2.2 Гибридологический эксперимент
2.3 Генотипирование мышей на полиморфизм С14730 гена Тр1г
2.4 Определение активности ТПГ
2.5 Тестирование поведения
2.5.1 Тест открытого поля
2.5.2 Тест принудительного плавания (Порсолта)
2.5.3 Агрессивное поведение
2.6 Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Распределение аллелей полиморфизма С1473С у мышей инбредных линий
3.2 Распределение аллелей полиморфизма С1473О в природных популяциях мышей

3.3 Ассоциация полиморфизма С1473С с активностью ТПГ2 и агрессивностью мышей инбредных линий
3.4 Гибридологический эксперимент. Характеристики родительских линий С57ВЬ/6.Т (В6), СС57ВК/Му (ВЮ и гибридов Бі
3.4.1 Активность фермента ТПГ
3.4.2 Агрессивное поведение
3.4.3 Тест принудительного плавания
3.4.4 Тест открытого поля
3.5 Характеристики гибридов ¥
3.5.1 Распределение генотипов
3.5.2 Активность фермента ТПГ
3.5.3 Поведение гибридов Гг
3.6 Характеристики линий В6-1473С и В6-1473С
3.6.1 Активность фермента ТПГ
3.6.2 Межсамцовая агрессия
3.6.3 Тест принудительного плавания
3.6.4 Тест открытого поля
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение 1. Ассоциация полиморфных вариантов гена ТрЬ2 с психическими заболеваниями человека

Список используемых сокращений
ТПГ - триптофангидроксилаза
ТПГ1 - триптофангидроксилаза-
ТПГ2 — триптофані идрокси лаза-
Tphl -ген, кодирующий триптофангидроксилазу-1 у разных видов
Tph2 - ген, кодирующий триптофангидроксилазу-2 у разных видов
Км - константа Михаэлиса
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
5-ГИУК - 5-гидроксииндолуксусная кислота
кДНК - комплементарная ДНК (ДНК, полученная по матрице мРНК)
мРНК - матричная РНК
п.н. - пара нуклеотидов
т.и.н. - тысяча нар нуклеотидов
а.о. - аминокислотный остаток
ПЦР - полимеразная цепная реакция
UTR - нетранслируемая область (untranslated region)

«дикого типа», однако растворимость и термостабильность были существенно снижены (в 3-6 раз). При экспрессии же в клетках ИЕК293 и in vitro наблюдалось уменьшение специфической активности: фермента примерно . в 3 раза.
Полиморфный вариант rs 17110563Т (206Ser) был явно ассоциирован с биполярным расстройством. У восьми, из 9 пациентов? с гетерозиготной формой Pro206Ser отмечалась семейная-- история заболевания^ при этом- в трёх: исследованных подробнр родословных вариант 2Ö6Ser практически всегда, передавался, вместе с; заболеванием-(Cichon:efa/., 2008);у ■ ' . '
Однонуклеотидная замена С.907ОТ в? экзоне Т, приводящая к, мутации:. Arg303Trp,- была найдена McKinney с соавт. (2008) у одной женщины, страдающей СДВЕ. При,-экспрессии-!мутантной,'формы-:в?клетках- E.colij НЕК293 и in vitro было обнаружено -практически полная: потеря: активности: фермента и сильное снижение растворимости. Пршболеетщательномшнализе выяснилось, что этажешцина также страдает клинической депрессией, а её дочь, получившая; вариант ЗОЗТгр, больна ОДВГ (McKinney et..а!., 2008). ‘ _
Мутация G1463А в экзоне 11, приводящая к замене Arg441His; была описана Zhang- с коллегами; (2005). При экспрессии в клетках PC 12 мутантной формы фермента наблюдалось, снижение активности; на; 80%. Данная замена; ■ была, ассоциирована с.клинической депрессией: она присутствовала у 9 из 87 пациентов, причём с у трёх в- гомозиготной форме, и у трёх из 219 человек в контрольной выборке. В- ГОМОЗИГОТНОЙ: форме только у одного из них. У семи из 9 пациентов обнаружилась семейная-форма болезни с сопутствующими расстройствами; и все 9 больных плохо поддавались лечению антидепрессантами (Zhang et al., 2005). Однако данную мутацию не удалось обнаружить ни в. одной другой выборке (Garriock et а!., 2005; Glatt el al., 2005; Van Den Bogaert et al., 2005; Zhou el al., 2005a; Delorme el al., 2006; Henningsson el al., 2007);
1.6 Моделирование наследуемых изменений функции ТПГ2 на
животных
Изучение пути от гена к поведению на человеке имеет много ограничений из-за трудности получения материала и возникающих этических проблем. Для -моделирования психопатологий человека; чрезвычайный интерес представляют