Характеристика биологических свойств бактерий рода Citrobacter при межмикробных взаимодействиях в микросимбиоценозе

• Автор: Туйгунова, Вера Георгиевна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Оренбург
• Количество страниц: 123 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. БАКТЕРИИ РОДА CITROBACTERH ИХ РОЛЬ В ПАТОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Этиологическая роль бактерий рода Citrobacter в инфекционной патологии человека
1.2. Факторы патогенности бактерий рода Citrobacter ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика микроорганизмов, используемых в работе

2.1.1. Изучениебактериальныхколоний и особенностейклеточнойструктурыбакгерийродаСгТгобас^ег

2.1.2.Изучение биохимической активности бактерий рода Citrobacter

2.1.3.Изучение сероваров бактерий рода Citrobacter

2.2. Методика определения состояния микробиоценоза кишечника

2.3.Методы выделения и идентификации микроорганизмов

2.4.Методы изучения биологических свойств микроорганизмов
2.4.1. Изучение антилизоцимной активности микроорганизмов
2.4.2. Методика определения «антиинтерфероновой» активности микрофлоры
2.4.3. Определение гемолитической активности микроорганизмов
2.4.4. Методика определения липолитической активности микроорганизмов
2.4.5. Выявление ДНК-азной активности микроорганизмов
2.4.9. Методика определения антибиотикочувствительности

исследуемых культур бактерий
2.4.7. Исследование адгезивной активности микроорганизмов
2.4.8. Количественная оценка адгезивной активности Citrobacter spp.
2.5. Методы изучения влияния микроорганизмов в ассоциации
2.6. Метод определения «свой-чужой» в паре «доминант-ассоциант» в микросимбиоценозе кишечника человека
2.7. Методы изучения токсигенности культур Citrobacter
spp. на моделях invivo
2.7.1. Изучение вирулентности на “легочноймодели”инфекции
2.7.2. Изучение вирулентности на модели «изолированной
петли тонкого кишечника кролика»
2.7.3. Изучение LT-энтеротоксигенности бактерий рода Citrobacter
2.8. Генетические методы исследования
2.8.1. Методвыделенияплазмидной ДНК
2.8.2.Метод изучения клональной структуры популяции микроорганизмов
2.9. Методы статистической обработки полученных результатов
ГЛАВА 3. ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ РОДА CITROBACTER В МИКРОСИМБИОЦЕНОЗАХ РАЗЛИЧНЫХ БИОТОПОВ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА
ГЛАВА 4. ИЗМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ РОДА CITROBACTER ПРИ
ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С АССОЦИАТИВНОЙ И ДОМИНАНТНОЙ МИКРОБИОТОЙ ЧЕЛОВЕКА
4.1. Изменение антилизоцимной активности и

биопленкообразования C. freundii при соинкубировании с экзометаболитами ассоциативной и доминантной микробиоты в экспериментах invitro
4.2. Изменение патогенного потенциала C. freundii в микробной ассоциации (эксперименты invitro)
ГЛАВА 5. ИЗМЕНЕНИЕ ПЛАЗМИДНОГО ПРОФИЛЯ БАКТЕРИЙ РОДА CITROBACTER В АССОЦИАЦИИ С БАКТЕРИЯМИ (НА МОДЕЛИ АССОЦИАЦИИ C. FREUNDII - В. SUBTILIS).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

инкубации в термостате в течении 24 ч при 37°С. О присутствии "антиинтерферонового" признака у культур бактерий судили по наличию роста дифтероида на поверхности и вокруг колоний исследуемых культур, свидетельствующем о нейтрализации бактерицидного компонента препарата интерферона в среде. За уровень "антиинтерфероновой" активности исследуемых культур принимали максимальную концентрацию ПЧЛИ, при которой ещё отмечался рост индикаторного штамма дифтероида.
2.4.3. Определение гемолитической активности микроорганизмов
Гемолитическую активность определяли на 5% кровяном агаре (М.О. Биргер, 1982). В расплавленную и остуженную до 45°С питательную среду вносили донорскую человеческую эритромассу или дефибринированную баранью кровь, с расчетом объема добавляемой крови так, чтобы получился 5 % кровяной агар и разливали в чашки Петри. Затем на поверхность агара наносили “пяточками” исследуемые культуры микроорганизмов. Чашки инкубировали в условиях термостата (для анаэробных микроорганизмов дополнительно создавали анаэробные условия с помощью анаэростата и газогенераторных пакетов) при 37°С в течении 24-48 часов. Далее учитывали результат по появлению вокруг колоний зон просветления (гемолиза).
2.4.4. Методика определения липолитической активности микроорганизмов
Липолитическую активность определяли чашечным методом (М. БПАап, 2000). В состав плотной среды (на 1 литр дистиллированной воды) входили: 10 г бактопептона, 5 г хлорида натрия, 0,1 г хлорида кальция и 15 г агар-агара. В качестве жирового субстрата использовали Твин-80, который вноси в среду после автоклавирования из расчета 5 мл твина на 1 литр среды, и разливали по чашкам Петри. После подсушивания чашек, наносили на поверхность агара пяточками исследуемые культуры и