Особенности штаммов Helicobacter pylori, циркулирующих в Ростовской области, и конструирование антигенного полимерного хеликобактерного диагностикума

• Автор: Березняк, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 156 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Микробиологическая характеристика Helicobacter pylori

1.2. Распространенность и пути передачи инфекции H. pylori

1.3. Факторы вирулентности и патогенности H. pylori

1.4. Резистентность H. pylori к антибактериальным препаратам

1.4.1. Антибактериальные препараты, используемые для эрадикации H. pylori

1.4.2. Распространенность резистентности H. pylori к антибактериальным препаратам

1.5. Диагностика хеликобактериоза

1.6. Реакция агломерации объемной
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Бактериологические методы
2.1.1.Штамм ы
2.1.2. Питательные среды
2.1.3. Выделение H. pylori из биоптатов
2.1.4. Определение чувствительности H. pylori к антибактериальным препаратам
2.1.5. Учет результатов определения антибиотикорезистентности
2.2. Молекулярно-генетические методы
2.3. Биохимические методы
2.3.1. Биохимическое типирование выделенных
Штаммов H. pylori
2.3.2. Получение растворимого хеликобактерного
антигена из бактериальной массы

2.4. Серологические методы
2.4.1. Иммуноферментный анализ
2.4.2. Получение хеликобактерной кроличьей сыворотки
2.5. Постановка реакции агломерации объемной
2.6. Оценка аналитических операционных
характеристик диагностикума
2.7. Статистическая обработка результатов и оценка диагностических операционных характеристик сконструированного антигенного полимерного хеликобактерного диагностикума
ГЛАВА 3. ОСОБЕННОСТИ ГЕНОТИПОВ ШТАММОВ Н. PYLORI, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ В г.РОСТОВЕ-НА-ДОНУ И РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ
ГЛАВА 4. МОНИТОРИНГ УРОВНЕЙ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТ-
НОСТИ РЕГИОНАЛЬНЫХ ШТАММОВ Н. PYLORI
ГЛАВА 5. КОНСТРУИРОВАНИЕ АНТИГЕННОГО ПОЛИМЕРНОГО ХЕЛИКОБАКТЕРНОГО ДИАГНОСТИКУМА
5.1. Получение полимерного носителя
5.2. Получение растворимого хеликобактерного антигена
5.3. Иммобилизация антигенного хеликобактерного комплекса
на полимерном носителе
5.4. Характеристика растворимого антигенного комплекса
5.5. Получение экспериментальных контрольных кроличьих хеликобактерных сывороток
5.6. Оценка аналитических характеристик антигенного полимерного хеликобактерного РАО-диагностикума
5.7. Лиофилизация антигенного полимерного хеликобактерного РАО-диагностикума
5.8. Технологическая схема получения антигенного полимерного хеликобактерного диагностикума и контрольных кроличьих

сывороток
ГЛАВА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ОПЕРАЦИОННЫХ ХАРАКТЕРИСТИК СКОНСТРУИРОВАННОГО АНТИГЕННОГО ПОЛИМЕРНОГО ХЕЛИКОБАКТЕРНОГО ДИАГНОСТИКУМА
6.1. Предварительная оценка эффективности диагностикума
для различных точек разделения
6.2. Определение диагностического титра
ГЛАВА 7. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ СКОНСТРУИРОВАННОГО АНТИГЕННОГО ПОЛИМЕРНОГО ХЕЛИКОБАКТЕРНОГО ДИАГНОСТИКУМА
7.1. Сравнительный анализ результатов, полученных с помощью
бактериологического метода и РАО-диагностикума
7.2. Применение РАО-диагностикума в качестве
скринингового теста
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Специфические антитела обнаруживаются также в слюне и моче пациентов (Megraud F. et al., 2007).
Основное место в иммунологических методах диагностики хеликобак-терной инфекции занимает серологический метод определения специфических антител в сыворотке крови пациентов (Morris, A. J. et al., 1991; Andersen L.P. et al., 1995; Mattsson A. et al., 1998; Malfertheiner P. et al., 2007).
После колонизации желудка H. pylori уровень специфических IgM в крови быстро повышается и возвращается к норме в течение нескольких дней. Иммуноглобулины классов G и А начинают синтезироваться несколько позже, однако их уровни сохраняются еще в течение двух лет, постепенно снижаясь в случае полной эрадикации возбудителя (Аруин Л.И. с соавт., 1998; Шкитин В.А. с соавт., 2002; Kirchner Т. et al., 1997). Диагностическая значимость различных классов антител продолжает оставаться предметом обсуждения: показано, что инфекционный процесс в большей степени коррелирует с наличием IgG антител, чем с наличием IgA антител, а совместное определение IgA, IgM и IgG незначительно, но улучшает результаты (Aquirre Р. М. et al 1991; Bitsikas L. et al., 1991).
Серологический метод является самым простым, наименее дорогим и наиболее доступным. Во многих странах серологическое исследование используют в качестве метода, предваряющего эндоскопию, стоимость проведения которой достаточно высока. Показано, что у пациентов моложе 45 лет в серологических тестах в 93-100% случаев отрицательный результат подтверждается эндоскопическим анализом (Laheij R. et al., 1998).
Среди косвенных методов серологию рассматривают в качестве ценного инструмента не только для диагностики, но и для эпидемиологических исследований (Vyas S.K. et al., 1994; van de Wouw B.A.M. et al., 1996; Hoang T.T.H. et al., 2004).
Для серологической диагностики в основном применяют иммунофер-ментный анализ (ИФА), однако в качестве альтернативы были предложены и другие серологические методы, в частности, латекс-агглютинация (Hirschl А.