Биорекультивация загрязненных углеводородами грунтов с использованием психротолерантных микроорганизмов, обладающих микостатической активностью

• Автор: Смолова, Ольга Сергеевна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 129 с. : ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Проблема нефтяного загрязнения северных территорий

1.2 Роль психрофильных микроорганизмов в разложении нефти при низких температурах

1.3 Биологическая рекультивация загрязненных углеводородами объектов

1.3.1 Интродукция активных деструкторов углеводородов в загрязненные нефтью объекты

1.3.2 Биостимуляция разложения нефтяных углеводородов в почве

1.3.3 Взаимодействие растений и микроорганизмов в процессе

ремедиации

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Характеристика биопрепаратов, использованных в процессе рекультивации

2.2. Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в пробах почв гравиметрическим методом
2.3 Определение агрохимических показателей почв
2.4 Определения фитотоксичности почв
2.5. Выделение культур окисляющих углеводороды микроорганизмов из природных сред
2.6.Методы выращивания и учета микроорганизмов
2.7. Определение длины гиф грибного мицелия методом мембранных фильтров
2.8. Определение антагонистического действия культур микроорганизмов по отношению к фитопатогенным грибам

2.9.Определение окислительной активности микроорганизмов -деструкторов нефти и нефтепродуктов
2.10. Выделение ДНК и определение нуклеотидной
последовательности фрагментов гена 16S рРНК штаммов углеводород окисляющих бактерий
2.11. Приготовление модельных почвенных систем
2.12. Полевой опыт по биоремедиации подзолистой торфянистой почвы на участке нефтяного разлива
2.13. Полевой опыт по биоремедиации промышленных отвалов ОАО «Орскнефтеоргсинтез»
2.14. Статистическая обработка экспериментальных данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выделение, описание и идентификация микроорганизмов -деструкторов
3.2,Определение окислительной активности культуры ИБ НД 1 и составляющих ее штаммов по отношению к нефти и дизельному топливу
3.3. Моделирование биорекультивации подзолистой торфянистой почвы при пониженной температуре в лабораторных условиях
3.4. Исследование антагонистической активности штаммов Pseudomonas nitroreducens ИБ НД 1.1 и Rhodococcus sp. ИБ РІД 1.2 по отношению к микроскопическим грибам
3.5. Биорекультивация почв в лабораторных условиях с применением микроорганизмов, выделяющих биологически активные вещества
3.5.1. Биорекультивация подзолистого грунта при пониженной температуре
3.5.2. Биорекультивация чернозема
3.6. Полевые испытания биотехнологии рекультивации загрязненных нефтью грунтов на основе консорциума

микроорганизмов ИБ НД
3.6.1. Биологическая рекультивация почвы на месте нефтяного разлива на Мамонтовском месторождении
3.6.2. Биологическая рекультивация отработанной отбеливающей земли ОАО «Орскнефтеоргсинтез»
3.7. Производство опытных партий биопрепарата «Ленойл»®-микостат
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

Таблица 3 - Численность микроорганизмов на 3 сутки в колбах для определения окислительной активности с нефтью в качестве субстрата,
КОЕ/мл
Микро- организмы Температура, °С
25±1 20±1 15±1 5±1
биопрепарат Ленойл (6,1±0,8)-108 (7,8±0,9)-108 (2,4±0,2)-107 (6,0±0,7)
консорциум ИБ НД 1 (1,6±0,3)-109 (1,0±0,4)Т09 (6,8±0,5)-108 (1,4±0,5)107
Pseudomonas nitroreducens ИБ НД 1.1 (4,7±0,9)-109 (2,3±0,7)-109 (6,5±0,9)-107 (5,7±0,3)
Rhodococcus sp. ИБНД 1.2 (2,0±0,5)-108 (5,3±0,4)108 (3,9±0,4>108 (5,3±0,4)
В лабораторном эксперименте дизельное топливо окислялось микроорганизмами, в целом, менее активно, чем товарная нефть (табл. 4). При температуре 20°С и 25°С большим потенциалом в этом отношении обладали бактерии штамма ИБ НД 1.1 Однако с понижением температуры их активность значительно падала и лучшие результаты были получены для штамма ИБ НД 1.2. По сравнению с биопрепаратом Ленойл консорциум и его компоненты более активно окисляли дизельное топливо.
Численность окисляющих углеводороды микроорганизмов в разных вариантах опыта не вполне соответствовало их окислительной активности (табл. 5). Численность микроорганизмов биопрепарата Ленойл при температуре 15-25°С была не ниже численности родококков и псевдомонад. При температуре 5°С проявлявший более высокую окислительную активность штамм Rhodococcus sp. ИБ НД 1.2 достигал меньшей численности, чем менее активный штамм Pseudomonas nitroreducens ИБ НД
1.1 Возможно, при пониженной температуре углеводороды подвергались неполному окислению штаммом ИБ НД 1.1 или полученные жирные кислоты включались в состав микробных липидов.