Технология генотипирования на основе микросателлитного анализа в селекции рапса : Brassica napus L.

• Автор: Сатина, Татьяна Григорьевна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 147 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Рапс как важная сельскохозяйственная культура и современные подходы в селекции рапса (литературный обзор)

1.1. Народнохозяйственное значение и распространение рапса (Brassica napus L.)

1.2. Происхождение рапса

1.3. Морфобиологические особенности рапса

1.3.1. Морфологические признаки рапса

1.3.2. Биологические особенности рапса

1.3.3. Биология цветения и оплодотворения рапса

1.4. Генетика рапса

1.5. Селекция рапса
1.5.1. Направления селекции рапса
1.5.2. Методы селекции
1.5.3. Задачи селекции рапса
1.5.3.1. Подбор исходного селекционного материала
1.5.3.2. Оценка новых форм: однородность, гибридность
1.6. Идентификация и регистрация сортов
1.7. Применение молекулярно-генетических маркеров в селекции
1.7.1. ПДРФ-маркеры
1.7.2. RAPD-маркеры
1.7.3. AFLP-маркеры

1.7.4. КБК-маркеры
1.7.5. ББИ-маркеры
ГЛАВА 2. Материалы и методы
2.1. Материалы и реактивы
2.2. Приборы и методы
2.3. Общие методики
2.3.1. Выращивание растений
2.3.2. Выделение геномной растительной ДНК
2.3.3. Выделение плазмидной ДНК
2.3.4. Полимеразная цепная реакция
2.3.5. Электрофорез в агарозном геле
2.3.6. Электрофорез в полиакриламидном геле
2.3.7. Визуализация ДНК в полиакриламидном геле с помощью нитрата
серебра
2.3.8. Анализ флуоресцентно-меченых ПЦР-фрагментов
2.3.9. Приготовление маркера длины риС18/Мзр
2.3.10. Проведение ферментативных реакций
2.3.11. Клонирование амплифицированных фрагментов ДНК
2.3.12. Трансформация и анализ клонов
2.3.13. Анализ клонов с помощью ПЦР-амплификации
2.3.14. Секвенирование ДНК-матриц по Сэнгеру
2.3.15. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей
микросателлитных фрагментов
ГЛАВА 3. Технология микросателлитного анализа в селекции рапса (В. парт
Ь.) (обсуяедение результатов)
3.1. Генотипирование сортов рапса методом микросателлитного анализа

3.1.1 .Разработка оптимального набора праймеров для генотипирования сортов
рапса
3.1.2. Исследование полиморфизма микросателлитных локусов сортов рапса
3.1.3. Оценка генетической однородности сортов рапса
3.1.4. Исследование гомозиготности самоопыленных линий
3.1.5. У становление родства между сортами рапса
3.2. Паспортизация сортов рапса на основе микросателлитных маркеров
3.3. Оценка генетической однородности гибридов рапса, полученных на основе
однородных и неоднородных сортов
3.4. Оценка генетической однородности реципрокных гибридов рапса
3.5. Исследование передачи генетического материала родительских форм в
гибриды
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

является эффективным методом создания исходного материала для селекции рапса на качество масла и семенную продуктивность [Шпота, 1980]. Без дополнительных усилий, в том числе без колхицинирования, можно получить большой резерв изменчивости для селекционной работы [Renard et al., 1982, Gowers et al., 1982, Renard et al, 1988]. Этот метод широко применяют за рубежом — в Швеции, Канаде, Германии. Рапс скрещивают с капустой, сурепицей, горчицей чёрной и сарептской и другими видами рода Brassica.
Ресинтез и синтез новых форм ранса. В отдаленной гибридизации как обособленное направление выделяют ресинтез видов, то есть искусственное восстановление уже существующих видов на основе комбинации геномов при отдалённой гибридизации. Так, гибридизацией различных видов капусты с сурепицей и последующим удвоением числа хромосом были получены ценные формы и сорта рапса, превосходящие по масличности, устойчивости к болезням и зимостойкости сорта, полученные традиционным способом [Жидкова, 1996]. Кроме гибридизации при отдалённых скрещиваниях применяют метод слияния протопластов и дальнейшего выращивания гибридов на искусственных средах [Pelletier, 1983]. Ресинтез рапса произведён в Японии, Швеции, России и других странах.
Гаплоидия. У рапса появление гаплоидов — довольно частое явление. Они отличаются мелкими цветками и отсутствием пыльников. Гаплоиды образуются путем апомиксиса. К методам получения гаплоидов относятся культура пыльников, пыльцы и микроспор. Так, во ВНИИМК и ВНИИР были получены гаплоидные и гомозиготные растения озимого и ярового рапса [Антонова, 1991, Муравлев, 2009]. В культуре пыльников спонтанное увеличение числа хромосом происходит лишь в 20% случаев. В основном этого достигают при помощи колхицина.
Мутагенез. Этот метод широко применяют в селекции рапса. Сорт рапса ярового Луговской был создан во ВНИИ кормов методом индивидуально-семейного