Разработка технологии формирования биосенсорных тест-систем на основе композиционных материалов

• Автор: Филиппова, Анастасия Михайловна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 139 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,

СИМВОЛОВ И ЕДИНИЦ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Носители для построения биосенсорных тест-систем

1.2. Биосенсорные тест-системы на основе иммобилизованных биологически активных веществ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ, ОБОРУДОВАНИЕ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и реактивы

2.2. Оборудование

2.3. Методы исследования
2.3.1. Определение удельной активности растворимого фермента ацетилхолинэстеразы
2.3.2. Приготовление фосфатного буферного раствора
2.3.3. Метод определения прочности полимерных материалов при деформации растяжения (ГОСТ 17035-86)
2.3.4. Определение относительного удлинения при разрыве
2.3.5. Определение статического коэффициента трения
2.3.6. Определение номинальной толщины пленки (ГОСТ 17035-86)
2.3.7. Определение массовой концентрации меди (ГОСТ 7388-72)
2.3.8. Приготовление буферного раствора (pH = 8,4)
2.3.9. Методы математической и статистической обработки данных
Глава 3. КОНСТРУИРОВАНИЕ КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ ФЕРМЕНТАМИ
3.1 Формирование структуры основы высокомолекулярных ком-

позиций для иммобилизации ферментов
3.2. Иммобилизация фермента ацетилхолинэстеразы
3.2.1 Оптимизация количества фермента ацетилхолинэстеразы в составе биосенсорной тест-системы
3.2.2. Влияние количества субстрата на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы
3.2.3. Изучение влияния pH среды на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы
3.2.4. Влияние температуры на удельную активность растворимого
и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы
3.2.5. Влияние времени ингибирования и времени постановки ферментативной реакции на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы
3.2.6. Конструирование тест-системы и разработка способа обнаружения инсектицида карбофоса в почве
3.3. Иммобилизация фермента панкреатина
3.3.1. Оптимизация количества фермента панкреатина в составе биосенсорной тест-системы
3.3.2. Изучение влияния pH среды и температуры на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина
3.3.3. Влияние времени ингибирования на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина
3.3.4. Влияние времени ферментативной реакции на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина

3.3.5. Конструирование биосенсорной тест-системы на основе фермента панкреатина и разработка методики обнаружения ионов меди в воде
3.3.6. Изучение влияния сопутствующих ионов тяжелых металлов на определение ионов меди с использованием биосенсорной
тест-системы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

Одним из основных направлений развития биосенсорных тест-систем является использование каталитических реакций с использованием ферментных препаратов (Белых И.А., Грек А.М., Сакун A.B. и др., 2010).
Егорова Л.С., Теслина O.A. (2009) модифицировали методику Островской В.М. (1999) по определению пероксида водорода реагентными индикаторными полосами. Вместо предложенной ранее в качестве основы бумаги марки III использовали бумагу марки F. с фильтровальной способностью 40 мм/мин. 3,3',5,5'-тетраметилбензидин был заменен более дешевыми о-фенилендиамином, м-фенилендиамином, о-толуидином и бензидином. В основе применяемого тест-метода лежит реакция окисления редокс-индикатора (о-фенилендиамина, м-фенилендиамина, о-толуидина и бензидина) пероксида водорода с катализатором пероксидазой хрена. В результате была разработана методика визуального и фотометрического экспрессного полуколиче-ственного определения пероксида водорода в медицинских препаратах. Предлагаемый метод может быть использован при оперативном контроле содержания пероксида водорода в водных средах.
Наиболее развитым направлением разработки биоспецифических электродов являются амперометрические биосенсоры. Основой амперометрических биосенсорных тест-систем являются электроды, которые модифицируются различными ферментами. Действие таких анализаторов основано на определении градиента концентрации электроактивного продукта ферментативной реакции. Таким образом, они детектируют образование или расход только участвующих в реакции веществ. Одним из преимуществ амперометрических биосенсоров является упрощение измерительной аппаратуры. Широкое применение амперометрическое детектирование находит при анализе биологических сред. В оптимальных условиях таким методом возможно определение концентраций до КГ8 - 10‘9 моль/л (Тернер Э., 1992).
С целью определения этанола в вине была разработана ферментная амперометрическая биосенсорная тест-система на основе платинового электрода SensLab. При проведении сравнительных анализов эффективности