Вирулентность, антигенность и иммуногенность вируса ящура, репрдуцированного в культурах клеток и в организме животных при промышленном производстве вакцин

• Автор: Кулагина, Алевтина Георгиевна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Щелково
• Количество страниц: 141 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

1 Введение

1.1 Актуальность темы

1.2 Цель и задачи исследований

1.3 Научная новизна

1.4 Практическая ценность

1.5 Апробация полученных результатов

1.6 Публикации

1.7 Объем и структура диссертации

2 Обзор литературы
2.1 Историческая справка
2.2 Специфическая профилактика ящура
2.3 Способы получения вирусного сырья при производстве
противоящурных вакцин
2.4 Методы оценки противоящурных препаратов
2.5 Разработка технологической документации на 38 предприятиях биологической промышленности
3 Собственные исследования
3.1 Материалы и методы
3.2 Результаты исследований
3.2.1 Изменение показателя инфекционной активности 53 вируса ящура при адаптации к культуре клеток почки свиньи
3.2.2 Сравнительная оценка антигенной активности
вируса ящура, репродуцированного в эксплантантах
эпителия языка крупного рогатого скота и перевиваемой культуры клеток ВНК-21
3.2.3 Сравнительная оценка гшмуногенной активности

вакцин, изготовленных из инактивированного вируса ящура, репродуцированного в экстантантах эпителия языка крупного рогатого скота и перевиваемой культуре
клеток ВНК-21
3.2.4 Изменение показателя иммуногенной активности 70 вакцины в зависимости от вирулентности контрольного
вируса ящура
3.2.5 Разработка технологической документации 76 производства противоящурной вакцины
4 Обсуждение полученных результатов
5 Выводы
6 Практические предложения
Список литературы
Приложение

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВНК-21/13-02 — перевиваемая культура клеток почки сирийского хомячка;
ИД50 - 50 %-ная доза вируса, вызывающая заболевание ящуром у 50 % зараженных животных;
ИмД50 - 50 %-ная доза вакцины, защищающая от заболевания 50 % вакцинированных животных после контрольного заражения вирусом ящура;
PH - реакция нейтрализации;
РСК - реакция связывания комплимента;
СП - первичная культура клеток почек свиней;
ЦПД5о - 50 %-ная доза вируса, вызывающая 50 % цитопатическое действие на монослой клеток СП;
СМК - система менеджмента качества;
ТД - технологическая документация;
СОП - стандартная операционная процедура;
ЭЭЯ КРС - эксплантанты эпителия языка крупного рогатого скота.
компонента должна быть 1,430, что указывает на цельность протеиновой оболочки.
Методы зонального ультрацентрифугирования, предназначавшиеся в прошлом только для фундаментальных исследований вируса ящура, в настоящее время в практике институтов стремятся заменить более упрощенными методами, такими, как обработка фторуглеродами (форна, арктон) с целью углубления наших знаний об иммуногенных качествах ящурных антигенов [161].
Ларенауд при разделении частиц вируса ящура путем зонального ультрацентрифугирования и титрования в РСК автоанализаторе «Техникой» установил, что отношение титр 22 мкм/ титр 7 мкм — эквивалентно отношение F/N методов с фторуглеродами [211].
2.4.1.3.1 Метод физико-химических измерений 146S частиц вируса
ящура.
Фантен, Фаржо, Лузо, Стельман, Румянцев [263, 271], анализируя препараты вируса ящура при помощи зонального центрифугирования в градиенте сахарозы, определили пропорцию частиц 146S, содержащихся в препарате.
Концентрированный вирусный материал наслаивали над градиентом сахарозы, после центрифугирования в процессе фракционирования в пробирке отмечали поглощение в ультрафиолетовых лучах (УФ) при 250 нм. Если вирус концентрировали в достаточной мере, то кривая показывала один пик в области 146S, соответствующий пику инфекционности и пику связывания комплемента. Этот пик абсорбции в УФ, который они обозначали как «пик УФ 146S» и пытались выяснить, может ли оценка площади этого пика служить основой для физико-химического определения количества 146S частиц вируса в сложных жидкостях. Частицы 146S являются иммуногенными. Определение количества этих частиц позволит осуществлять косвенное определение иммуногенности вирусного препарата