Эффект производных гамма-карболина на прогрессию протеинопатии в трансгенных моделях болезни Альцгеймера

• Автор: Кухарский, Михаил Сергеевич
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 120 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
Введение
1 Обзор литературы
1.1 Современные представления об этиологии и патогенезе болезни Альцгеймера
1.1.1 Роль Р-амилоида в патогенезе болезни Альцгеймера
1.1.2 Роль tau-белка в нейродегенерации
1.1.3 Гипотеза тау-патии в контексте клинических проявлений БА
1.1.4 Взаимосвязь между Ар и tau
1.1.5 Синаптическая дисфункция при БА
1.1.6 Теория нейроиммуномодуляции
1.2 Новые подходы к профилактике и лечению БА
1.2.1 Стратегии, направленные на коррекцию тау-патологии..
1.3 Моделирование ключевых аспектов патогенеза болезни Альцгеймера
1.3.1 Моделирование болезни Альцгеймера в трансгенных грызунах
1.3.2 Трансгенные модели с мутациями в двух локусах
1.3.3 Трансгенные модели с мутациями в трех локусах
1.4 Краткая характеристика димебона и его аналогов
2 Материалы и методы
2.1 Экспериментальные животные
2.2 Генотипирование
2.3 Соединения

2.4 Количественный иммуноблоттинг
2.5 Иммуноферментный анализ
2.6 ОТ-ПЦР в реальном времени
2.6 Гистологический и иммуногистохимический анализ
2.7 Антитела
2.8 Поведенческое тестирование
2.9 Статистическая обработка данных
3 Результаты и обсуждение
3.1 Эффект гамма-карболинов на прогрессию нейродегенеративного процесса у трансгенных мышей линии
1аиР3
3.2 Анализ эффекта димебона на развитие церебрального
амилоидоза у трансгенных мышей линии 5хГАО
3.3 Изучение влияния димебона на аутофагосомную систему
Выводы
Список использованной литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
APP - белок-предшественник ß-амилоида (англ. amyloid precursor protein); Aß - бета-амилоидные пептиды;
CBD - кортикобазальная дегенерация;
CDK5/p35 - циклин-зависимая киназа 5 и ее активатор белок р35;
FAD - семейные формы болезни Альцгеймера;
FTDP-17 - фронтотемпоральная деменция с паркинсонизмом сцепленная с 17 хромосомой;
GAPDH - глицеральдегидфосфатдегидрогеназа;
GFAP - глиальный фибриллярный кислый белок (англ. glial fibrillary acidic protein);
GSK3ß - гликоген синтаза киназа 3 ß;
IL - интерлеикин;
LC3 - легкая цепь 3 белка ассоциированного с микротрубочками LOAD - формы болезни Альцгеймера с поздним началом;
LTP - долговременная потенциация;
МАРТ - ген, кодирующий белок tau, ассоциированный с микротрубочками;
NTFs - нейрофибриллярные клубки;
PS 1 - пресенилин 1;
PSP - прогрессирующий супрануклеарный паралич;
RCAI - агглютинин I из Ricinus communis;
TNFa - фактор некроза опухоли а;
БА - болезнь Альцгеймера;
ДСН - додецилсульфат натрия;
ИФА - иммуноферментный анализ; кДа - килодальтон;
НДЗ - нейродегенеративное заболевание;
ФСБ - фосфатно-солевой буфер.

В нормальных физиологических условиях белок tau стабилизирует структуру микротрубочек. В настоящий момент считается, что в нейронах пациентов с болезнью Альцгеймера система микротрубочек нарушена, это, в свою очередь, ведет к дефициту аксонального транспорта и дегенерации аксонов, а затем и тел нейронов [Farias G. et al., 2011]. Ряд данных свидетельствуют в пользу того, что агрегация tau - это главное событие нейродегенеративного процесса, происходящее вследствие перехода растворимого tau или его олигомеров в нерастворимые филаменты. Этот процесс коррелирует с прогрессированием клинических признаков болезни Альцгеймера и ухудшением когнитивных способностей [Maccioni R.B. et al., 2009а]. Идентификация мутации в гене, кодирующем tau, у пациентов с семейной фронтотемпоральной дегенерацией выявила центральную роль тау-патии в патогенезе данного заболевания. На клеточных моделях со сверхэкспрессией tau было показано, что формируемые внутриклеточные агрегаты обладают цитотоксичностью.
Различные внутриклеточные белки вовлечены в регуляцию процессов укладки белка tau и его агрегации, а также могут влиять на выведение молекул с нарушенной конформацией и агрегатов. Убиквитинлигаза CHIP способна полиубиквитинировать tau и, возможно, играет ключевую роль в предотвращении накопления фосфорилированных форм tau и нейрофибриллярных клубков. Существуют данные, что воздействие на CHIP и убиквитин-протеосомную систему может модулировать развитие и прогрессию тау-патологии. Так, белки теплового шока рассматриваются в качестве мишеней для модификации патологического процесса при тау-патиях. Ингибиторы HSP90, которые индуцируют ответ на тепловой шок, уменьшают уровень фосфорилирования tau по определенным сайтам (S396/S404 и S202/T20) и в настоящее время тестируются в качестве противораковых препаратов [Fuentes P. et al., 2011].