Растворение белковых агрегатов с помощью полиэлектролитов

• Автор: Семенюк, Павел Игоревич
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 106 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Особенности и возможности регуляции взаимодействия

Природные полиэлектролиты

Токсичность

Использование собственных свойств полиэлектролитов

Переносчики, наночастицы и иммобилизация

Очистка белка

Агрегация
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Полиэлектролиты
Выделение ГАФД
Получение телец включения зеленого флуоресцентного белка
Получение телец включения овечьего прионного белка
Получение аморфных агрегатов ГАФД
Определение активности ГАФД
Определение дзета-потенциала частиц
Агрегация ГАФД
Дифференциальная сканирующая калориметрия
Изотермическая титрационная калориметрия
Спектроскопия кругового дихроизма
Динамическое лазерное светорассеивание
Оценка амилоидных свойств телец включения овечьего прионного белка

Определение концентрации полианионов, необходимой для растворения агрегатов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Особенности взаимодействия с белком полианионов, содержащих различные заряженные группы
Двухстадийный механизм взаимодействия полисульфоанионов с белком.
Растворение агрегатов различных типов
Амилоидные тельца включения
Аморфные тельца включения
Термоагрегаты
ВЫВОДЫ
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ОБР - зеленый флуоресцентный белок;
РгР - прионный белок
Г АФД - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа;
ДС - полисульфат декстрана, индекс около аббревиатуры полимера означает количество заряженных групп в цепи;
ДСК - дифференциальная сканирующая калориметрия;
ДСР - динамическое светорассеивание;
ИТК - изотермическая титрационная калориметрия;
КД - круговой дихроизм;
ПСС - поли(стиролсульфонат);
ПФ - полифосфат;
ПЭВП - поли(Ы-этил-4-винилпиридиний);
ПЭГ - поли(этиленгликоль);
ПЭИ - поли(этиленимин);
ТВ - тельца включения.

1 * Г •---------------1-----»----1-------------- -г-..г
40 50 50 70 80
Температура, °С
Рис. 4. Термостабильность лизоцима в свободном виде (1), в комплексе с поли(метакриловой) (А) и поли(акриловой) (Б) кислотами с различным молярным соотношением (2, 3) и после добавления к комплексам с полианионом ПЭВП (4). На основе (Ыпоуа е1 а!., 2003).