Роль липопротеинов и их комплексов со стероидными гормонами в регуляции биосинтеза белка и нуклеиновых кислот в опухолевых клетках

• Автор: Белоногова, Жанна Ивановна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 121 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Общие представления о липо(апо)протеинах плазмы крови

1.2. Механизмы поглощения липо(апо)протеинов соматическими клетками

1.2.1. Общие сведения

1.2.2. В/Е-рецепторы

1.2.3. Скевенджер-рецепторы

1.2.4. Рецепторы, связывающие липопротеины высокой плотности

1.3. Роль липопротеинов в транспорте биологически активных веществ

и лекарственных препаратов в клетку
1.3.1. Транспорт стероидных гормонов
1.3.2. Транспорт лекарственных препаратов
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Экспериментальные животные
2.2. Используемые реактивы и оборудование
2.3. Экспериментальные модели
2.4. Препаративные процедуры
2.4.1. Выделение липопротеинов плазмы крови
2.4.2. Выделение аполипопротеинов
2.5. Биохимические методы
2.5.1. Определение концентрации белка
2.5.2. Оценка скорости биосинтеза белка и нуклеиновых кислот
2.5.3. Выделение асцитных опухолевых клеток и опухоль-
ассоциированных макрофагов

2.5.4. Оценка чистоты клеточных фракций, подсчет клеток и определение их жизнеспособности
2.5.5. Количественное определение содержания суммарного белка в тканях
2.5.6. Изучение белкового спектра: электрофорез в полиакриламидном геле и иммуноэлектроблоттинг
2.5.7. Изучение связывания липопротеинов и их белковых компонентов с различными лигандами
2.5.7.1. Тушение триптофановой флуоресценции
2.5.7.2. Электрофорез в геле агарозы
2.6. Морфологические методы
2.7. Статистические методы обработки результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Влияние липопротеинов очень низкой плотности в комплексе со стероидными гормонами на скорость биосинтеза ДНК в опухолевых клетках в опытах in vitro
3.2. Влияние липопротеинов очень низкой плотности в комплексе со стероидными гормонами на скорость биосинтеза белка в опухолевых клетках в опытах in vivo
3.3. Анализ взаимодействия липо(апо)протеинов с некоторыми лекарственными препаратами
3.4. Влияние липо(апо)протеинов и их комплексов с противоопухолевыми препаратами на скорость биосинтеза белка и ДНК в опухолевых клетках НА-1 гепатомы и карциномы Эрлиха
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Апо - аполипопротеины
БАВ - биологически активные вещества
БСА - бычий сывороточный альбумин
ЛПВП - липопротеины высокой плотности
ЛПНП - липопротеины низкой плотности
ЛПОНП - липопротеины очень низкой плотности
ЛПС - липополисахариды
НАД - никотинамидадениндинуклеотид
ПААГ - полиакриламидный гель
ДГЭА-С - дегидроэпиандростерон-сульфат
тИФА - твердофазный иммуноферментный анализ
ТХУ - трихлоруксусная кислота
ФСБ - фосфатный солевой буфер
ФСБА - фосфатный солевой буфер в модификации Дюльбекко ЭДТА-Иаг - этилендиаминтетраацетат натрия Оз-Иа - додецилсульфат натрия
НЕРЕБ - Н-З-гидроксиэтилпиперазин- ТГ-2-этансульфоновая кислота - неорганический фосфат
ЛПВП-частиц или апоА-1 также имеет все основания для осуществления регуляции внутриклеточных процессов. При этом апоА-1 (или его фрагменты) может выполнять роль сигнальной молекулы, взаимодействующей с ДНК и активирующей экспрессию генов [Вгез1оу К, 1988].
1.3. Роль липопротеинов в транспорте биологически активных
веществ в клетку
Проблема транспорта биологически активных веществ и лекарственных препаратов с целью увеличения их терапевтической эффективности и ограничения побочных эффектов является одной из центральных в современной медицинской биотехнологии. Это связано с тем, что используемые в настоящее время переносчики должны отвечать целому ряду признаков и способствовать решению сложных задач. Во-первых, попадая в организм биологичеки активные вещества (БАВ) и лекарственные препараты очень быстро разрушаются в печени в системе метаболизма ксенобиотиков полностью не реализовав своего лечебного действия. Во-вторых, у многих людей к лекарственным препаратам развивается лекарственная аллергия и длительное введение их, особенно в больших дозах, оказывается невозможным. В третьих для лечения ряда патологических состояний (опухолевые процессы, ферментативная, гормональная недостаточность, и т.д.) обязательно необходима доставка лекарственных препаратов непосредственно в клетку, что связано с преодолением клеточного барьера. В четвертых, эффективные переносчики необходимы для транспорта генетического материала в ядра клеток.
Для достижения этих целей предложен ряд подходов в области
создания систем и способов доставки лекарств и БАВ к месту их действия.
Это, так называемые, пролекарства - агенты, которые вводятся в организм в
неактивной форме и подвергаются биотрансформации в органе-мишени или