Метаболические изменения при токсическом поражении печени и возможности их коррекции (экспериментальное исследование)

• Автор: Хильчук, Максим Александрович
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Краснодар
• Количество страниц: 124 с. : 23 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ И МЕТОДЫ ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ
1.1. Общие представления о механизмах гепатотоксического действия химических веществ
1.2. Характеристика физико-химических свойств четыреххлористого углерода. Механизм его гепатотоксичности. Влияние ССЦ на протекание обменных процессов в организме
1.3. Токсическое воздействие четыреххлористого углерода на другие органы пищеварительной системы
1.4. Гепатопротекторы в фармакотерапии заболеваний печени
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
2.1. Характеристика экспериментальных животных
2.2. Методика создания модели токсического поражения печени
2.2.1 Эвтаназия подопытных животных и забор биоматериала для биохимических и патоморфологических исследований
2.3. Патогистологическое исследование печени крыс
2.4. Биохимические методы исследования
2.4.1. Определение концентрации общего и прямого билирубина в
сыворотке крови методом Ендрассика-Грофа
2.4.2. Определение активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) в
сыворотке крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля
2.4.3. Определение активности аспартатаминотрансферазы (АСТ) в
сыворотке крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля
2.4.4. Определение активности у-глутамилтранспептидазы (у-ГТП) в
сыворотке крови унифицированным колориметрическим методом
2.4.5. Определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке крови унифицированным методом
2.4.6. Определение содержания общего белка в сыворотке крови
2.4.7. Определение содержания альбумина в сыворотке крови
2.4.8. Определение белковых фракций сыворотки крови турбидиметрическим методом Олла и Маккорда в модификации С.А. Карпюка
2.4.9. Определение содержания общего холестерина (ОХС) в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом
2.4.10. Определение содержания холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП) в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом
2.4.11. Определение содержания триацилглицеринов в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом
2.4.12. Определение концентрации ХС ЛПОНП и ХС ЛПНП в сыворотке крови расчетным методом
2.4.13. Определение содержания эфиров холестерина (ЭХС) и неэтерифицированного холестерина (НЭХС) в сыворотке крови
2.4.14. Использование коэффициентов атерогенности для оценки патологии липидного обмена в условиях токсического поражения печени
2.4.15. Определение содержания ТБК-реактивных продуктов (ТБК-РП) в сыворотке крови
2.4.16. Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) в гемолизате эритроцитов
2.4.17. Определение активности кагалазы в гемолизате эритроцитов
2.4.18. Определение содержания гемоглобина (НЬ) в гемолизате эритроцитов гемиглобинцианидным методом
2.4.19. Методы определения активности пищеварительных ферментов в

гомогенатах слизистой оболочки желудка и ткани поджелудочной железы
2.4.20. Определение активности пепсина в гомогенатах слизистой оболочки желудка экспресс - методом Н.П. Пятницкого
2.4.21. Определение активности трипсина в гомогенатах поджелудочной железы методом Эрлангера - Шатерникова
2.4.22. Определение активности химотрипсина в гомогенатах поджелудочной железы
2.5. Методы извлечения и изучения химических свойств липидов из продуктов растительного происхождения с предполагаемыми гепатопротективными свойствами
2.5.1. Определение йодного числа в липидных экстрактах
2.5.2. Определение массовой доли неомыляемых липидов в экстрактах
2.5.3. Определение жирнокислотного состава липидных экстрактов методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ)
2.6. Модельные системы перекисного окисления липидов, применяемые для оценки антиоксидантной активности исследуемых продуктов растительного происхождения в опытах in vitro
2.6.1. Приготовление липосом
2.6.2. Определение содержания ТБК-РП в суспензии липосом
2.6.3. Оценка эффективности антиоксидантного действия исследуемых продуктов растительного происхождения
2.7. Использование ферментативного липолиза in vitro для оценки метаболической доступности исследуемых продуктов растительного происхождения
2.8. Исследованные в модельных системах in vitro продукты растительного происхождения
2.9. Статистические методы исследования

2.4. Биохимические методы исследования
2.4.1. Определение концентрации общего и прямого билирубина в сыворотке
крови методом Ендрассика-Грофа
Определение содержания общего билирубина в данном методе основано на реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация неконъюгированного билирубина рассчитывается по разнице концентрации между общим и конъюгированным билирубином. Полученные результаты выражали в мкмоль/л сыворотки крови.
Для проведения анализов использовался набор реагентов фирмы «Vital Diagnostics SPb» кат. № В 03.12.
2.4.2. Определение активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке
крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля
Принцип метода состоит в том, что в результате реакции трансаминирования между L-аланином и а-кетоглутаратом, протекающей под действием АЛТ, образуются пировиноградная кислота (ПВК) и L-глутамат. При добавлении раствора 2,4-динитрофенилгидразина в реакционную смесь образуются гидразоны ПВК, которые в щелочной среде дают окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся кислоты и активности АЛТ. Активность АЛТ выражали в U/л (1 U/л = 16,67 нмоль/(с*л)).
Для проведения анализов использовался набор реагентов фирмы «Vital Diagnostics SPb» кат. № В 01.01.
2.4.3. Определение активности аспартатаминотрансферазы (ACT) в сыворотке крови унифицированным методом Райтмана-Френкеля
Принцип метода. В результате реакции трансаминирования между L-аспартатом и а-кетоглутаратом, протекающей под действием ACT, образуются