Индукция проницаемости внутренней мембраны митохондрий дрожжей Dipodascus magnusii

• Автор: Суханова, Евгения Ивановна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 178 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ

СОКРАЩЕНИЯ И ОБОЗНАЧЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Апоптоз и пути выхода апоптотических факторов из митохондрий

Глава II. Структура дыхательной цепи дрожжевых митохондрий

Глава П.1. Комплекс

Глава П.2. Комплекс II

Глава II.3. Комплекс III

Глава II.4. Комплекс IV

Глава II.5. Комплекс V
Глава II.6. Лактатдегидрогеназы
Глава П.6.1. Цитохром Ь2 (L-лактатдегидрогсназа)
Глава II.6.2. D-лактат-ферроцигохром с оксидоредуктаза (D-
лакгатдегидрогеназа)
Глава II.7. а-глицерол-3-фосфатдегидрогеназа (FAD-зависимая)
Глава II.8. Альтернативная NADH-дегидрогеназа (NDH-2)
Глава II.9. Альтернативная терминальная оксидаза
Глава III. Митохондриальные ионные каналы
Глава III. 1. Ионные каналы внешней митохондриальной мембраны
Глава III. 1.1. Потенциал-зависимый анионный канал (VDAC)
Глава III. 1.2. Митохондриальный апоптоз-индуцируемый канал
Глава III.1.3. Транслоказа внешней мембраны
Глава III.2. Ионные каналы внутренней митохондриальной мембраны
Глава III.2.1. Митохондриальные К+-каналы
Глава Ш.2.1.1. Митохондриальный ATP-регулируемый калиевый
канал (митоКдтр)
Глава III.2.1.2. Системы транспорта калия в митохондриях
дрожжей
Глава III.2.2. Протонная утечка и «разобщающий» белок (Proton Leak
and Uncoupling Protein)
Глава III.2.3. Митохондриальный Са2+ унипортер

Глава 1П.2.4. Анионные каналы
Глава Ш.2.5. Са2+-зависимая, циклоспорин А - чувствительная пора (РТР -
Permeability Transition Pore)
Глава Ш.2.5.1. Неспецифическая проницаемость митохондрий
дрожжей
Глава III.2.6. Са2+-зависимая циклоспорин A-нечувствительная пора,
индуцируемая жирными кислотами
Глава IV. Ионы «Скулачёва»
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 1. Материалы и методы исследования
Глава 1.1. Реагенты
Глава 1.2. Организм
Глава 1.3. Условия выращивания
Глава 1.4. Выделение митохондрий из дрожжей D. magnusii
Глава 1.5. Аналитические методы
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 1. В митохондриях дрожжей D. magnusii не индуцируется
«классическая» Са2+/Рн- зависимая, циклоспорин А-чувствительпая пора
Глава 2. В митохондриях дрожжей D. magnusii не индуцируется
Са2+/пальмитат-зависимая пора
Глава 3. Анаэробиоз не индуцировал повышенную проницаемость внутренней митохондриальной мембраны дрожжей D. magnusii.
Впервые показана ATP-зависимая энергизация дрожжевых митохондрий
в условиях анаэробиоза
Глава 4. Изучение влияние прооксидантов на митохондрии дрожжей
D. magnusii
Глава 5. Митохондриальный АТР - зависимый калиевый канал в митохондриях
дрожжей D. magnusii
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СОКРАЩЕНИЯ И ОБОЗНАЧЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ
ММП - межмембранное пространство митохондрий
АОХ - альтернативная терминальная оксидаза
жсц - железо-серные центры
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЦсА - циклоспорин А
NADH - никотинамидадениндинуклеотид
NADPH - никотинамидадениндинуклеотидфосфат
FAD - флавинадениндинуклеотид
FMN - флавинмононуклеотид
АМР - аденозинмонофосфат
АТР - аденозин-5'-трифосфат
GTP - гуанозин-5'-трифосфат
GDP - гуанозин-5'-дифосфат
ADP - аденозин-5'-дифосфат
СТР - цитозин-5'-трифосфат
ITP - инозин-5'-трифосфат
UDP - уридин-5'-дифосфат
АФК - активные формы кислорода
Р„ - неорганический фосфат
UCP - Uncoupling Protein, разобщающий белок
БЛМ - бислойные липидные мембраны
ЭГТА - этиленгликоль-бис-(2-аминоэтиловый эфир)->Г,>Г,1чП,М'-тетрауксусная кислота
ЭДТА - этилендиамин N' ,N' ,N' ,N' -тстрауксусная кислота Атр — атрактилозид
КЦХФ - карбонилцианид-м-хлорфенилгидразон
ДрН+ - разность электрохимических потенциалов ионов водорода
BCAfaf- бычий сывороточный альбумин, свободный от примеси жирных кислот
дтт - дитиотреитол
RET - reverse electron transfer, обратный перенос электронов A'I' - электрический трансмембранный потенциал ФАО - фениларсиноксид

протонов через мембрану способствует приведению в движение «кольца» гидрофобной субъединицы 9 и вращению центрального «стебля» внутри каталитического ядра. Вращательное движение «стебля» способствует последовательному взаимодействию субъединицы у с тремя каталитическими сайтами, локализованными в ядре азРз гексамера, что приводит к конформационным изменениям в них. Конформационные изменения приводят к изменению сродства субстрата и продукта, что является неотьемлимой частью механизма этерификации или гидролиза A DP и неорганического фосфата (Thomas et al., 2008; Rak et al., 2009).
Наконец, три других белка (Iflp, Stflp и Stf2p) вовлечены в процесс регуляции деятельности АТР-синтазы, модулируя её гидролитическую активность. Комплекс осуществляет синтез трёх молекул АТР на каждую пару электронов (Rak et al., 2009).
Олигомицин, ингибитор АТР-азной и АТР-синтазной активности в митохондриях, связывает субъединицы 9 и б сектора Fo, которые обеспечивают функционирование протонного канала комплекса. OSCP — олигомицин-чувствительный белок, компонент периферического «стебля», обеспечивает в интактном митохондриальном комплексе чувствительность к ингибитору олигомицину (Devenish et al., 2000).
АТР-синтаза большинства эукариот имеет двойное (митохондриально-ядерное) происхождение. Как правило, субъединицы, составляющие статор и некоторые субъединицы сектора Fo являются продуктами ядерных генов. Это также относится и к субъединицам сектора Fi. Субъединицы 6, 8 и 9 сектора Fo дрожжевой АТР-синтазы кодируются митохондриальными АТРб, АТР8 (ААР1) и АТР9 генами, соответственно (Rak et al., 2009).
В последнее десятилетие появляется всё больше доказательств того, что комплексы дыхательной цепи существуют в виде суперкомплексов. Ассоциация комплексов в суперкомплексы и диссоциация их на отдельные комплексы считается динамическим процессом, который зависит от физиологического состояния клетки. Полагают, что такая организация комплексов дыхательной цепи более эффективна и создаёт хорошую базу для оптимизации процесса дыхания (Dudkina et al., 2008).
Глава II.6. Лактатдегидрогеиазы
В дрожжах Saccharomyces cerevisiae D-лактатдегидрогеназа и цитохром Ь2 (L-лактатдегидрогеназа) локализованы в межмембраниом пространстве и прочно ассоциированы с внутренней митохондриальной мембраной. Они вовлечены в процесс