Про- и антиоксидантная системы при дисфункции плаценты

• Автор: Прокопенко, Валентина Михайловна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 228 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Активные формы кислорода и пути их образования в организме

1.2. Повреждающее действие активных форм кислорода на молекулярные компоненты клетки

1.3. Биологическая роль активных форм кислорода

1.4. Антиоксидантная защита организма

1.5. Окислительный стресс как один из патогенетических механизмов дисфункции плаценты
1.6. Генетические факторы как одна из возможных причин усиления окислительного стресса при невынашивании беременности
1.7. Хемилюминесцентный анализ как быстрый метод регистрации процессов свободнорадикального окисления в акушерской
практике
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Получение постмитохондриальной фракции плаценты
2.1.1. Выделение митохондриальной фракции плаценты
2.1.2.0пределение интенсивности процессов свободнорадикального
окисления в ткани
2.1.3. Измерение интенсивности перекисной хемилюминесценции в
сыворотке крови
2.1.4. Метод количественного определения диеновых конъюгатов
2.1.5.Определение вторичных продуктов ПОЛ, реагирующих с
тиобарбитуровой кислотой (ТБК-тест)
2.1.6. Метод определения окислительной модификации белков по уровню карбонильных производных

2.1.7. Определение содержания миелопероксидазы иммуноферментным
методом
2.1.8. Определение активности ЫО-синтазы
2.1.9. .Определение активности пероксидаз
2.2. Определение общей антиоксидантной активности
2.2.1. Определение небелковых тиоловых групп с помощью реактива Эллмана
2.2.2. Определение активности каталазы
2.2.3. Метод определения активности супероксиддисмутазы
2.2.4. Определение активности глутатионпероксидазы
2.2.5. Определение активности глутатионредуктазы
2.2.6. Определение активности глутатион-Б-трансферазы
2.2.7. Определение показателей эндогенной интоксикации
2.2.8. Определение белка
2.2.9. Выделение ДНК
2.3. Постановка полимеразной цепной реакции (ПЦР)
2.3.1. Электрофорез в полиакриламидном геле
2.3.2. Идентификация полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ-анализ)
2.3.3. Методы статистической обработки
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Структура невынашивания беременности в анамнезе женщин основной
группы и группы сравнения
3.2. Изучение процессов свободнорадикального окисления и уровня антиоксидантной защиты в митохондриях плацент женщин основной группы и группы сравнения

3.3. Оценка интенсивности процессов свободнорадикального окисления в постмитохондриальной фракции плацент женщин основной группы и группы сравнения
3.3.1. Механизм люминолзависимой хемилюминесценции в тканях плацент женщин основной группы и группы сравнения
3.3.2 Изучение миелопероксидазы постмитохондриальной фракции плацент у женщин основной группы и группы сравнения на протяжении беременности
3.3.3 Изучение ЫО-синтазной активности в постмитохондриальной фракции плацент женщин основной группы и группы сравнения на протяжении беременности
3.4. Изучение антиоксидантной системы в постмитохондриальной фракции плацент женщин основной группы и группы
сравнения
3.4.1. Активность глутатионзависимой системы антиокислительной защиты в постмитохондриальной фракции плацент женщин основной группы и группы сравнения на протяженииб еременности
3.4.2. Определение показателей эндогенной интоксикации в постмитохондриальной фракции плацент женщин основной группы и группы сравнения
3.4.3. Значение определения активности ферментов глутатионзависимого звена антиоксидантной системы плаценты для прогноза риска прерывания беременности
3.5. Анализ показателей про- антиоксидантной систем в плацентах женщин при преждевременных родах и беременности, осложненной гестозом, по сравнению с физиологическими показателями
3.6. Изучение полиморфизма генов глутатион-Б-трансфераз в плацентах женщин основной группы и группы сравнения

мишенью, либо окисляют ее. В первую очередь окисляются сульфгидрильные и тиоэфирные группы белков[283]. Взаимодействуя с биологическими аминами, гипохлорит образует хлорамины, ряд из них (в частности, хлорамин МН2С1) обладают более мощным деструктивным потенциалом по сравнению с гипохлоритом [45]. В то же время способность гипогалоидов непосредственно разрушать клетки-мишени незначительна, их деструктивное действие связано, по мнению исследователей, с нарушением транспортных функций мембранных белков, инактивацией АТФ-синтетазы или бактериальной убихинолоксидазы [341], усилением активности протеиназ через инактивацию их ингибиторов[416], активацией белков системы комплемента [417]. Мишенями системы МПО - НОС1 - ОН ~ нейтрофилов является широкий спектр патогенных для человека организмов: бактерии, грибы, вирусы, простейшие, амебоидные, гельминты [97].
Следует отметить, что образуемые нейтрофилами АФК могут быть эффективны не только в отношении чужеродных микроорганизмов, но и клеток собственных тканей. Анализ механизмов цитотоксического действия АФК показывает, что наибольший эффект достигается при включении нескольких механизмов образования АФК:
НАДФ-оксидаза (02") —> СОД (Н202) —> ионы Ге или Си (ОН) НАДФ-оксидаза (02‘ ) —> СОД (Н202) —> МПО (гипогалоиды) НАДФ-оксидаза (02') —> N0 - синтетаза (N0 ) —> (ОЖЮ)
Более того, в процессе эволюции произошло разведение этих путей метаболизма как в пространстве, так и во времени. В организме человека только в гранулоцитах содержится одновременно две ферментативные системы синтеза АФК: НАДФ-оксидаза и МПО, в силу чего гранулоциты называют «клетки-камикадзе». Моноциты содержат малое количество МПО, от которой они избавляются в процессе трансформации в макрофаги. Помимо