Влияние Trichoderma почв Египта и Республики Татарстан на отдельные параметры живых систем

• Автор: Атеф Абдельмохсен Абдельрахман Ахмед
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 158 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Производство и применение биофунгицидов на основе Trichoderma

1.1.1. Наиболее активный биоконтрольный штамм

1.1.2. Требования к биопрепаратам

1.1.3. Системы внесения препарата

1.2. Географическое распространение грибов рода Trichoderma

1.2.1. Географическое распространение Trichoderma на территории Республики Татарстан
1.2.2. Географическое распространение грибов рода Trichoderma на территории Египта
1.3. Антибиозис и вторичные метаболиты Trichoderma
1.4. Взаимодействие между грибами рода Trichoderma и растениями
1.4.1. Положительные взаимодействия между грибами рода Trichoderma и растениями
1.4.2. Отрицательные взаимодействия между грибами рода Trichoderma и растениями
1.4.2.1. Ингибирование роста растений (Фитотоксические вещества)
1.5. Взаимодействие между Trichoderma и фитопатогенами
1.5.1. Двойное взаимодействие между Trichoderma и фитопатогенами
1.5.2. Тройное взаимодействие между Trichoderma, фитопатогенами и растениями
1.6. Распространение и вредоносность плесневых грибов рода Fusarium и
Aspergillus
1.6.1. Распространение и вредоносность грибов рода Fusarium
1.6.2. Распространение и вредоносность грибов рода Aspergillus
1.7. Влияние грибов рода Trichoderma на человека
1.8. Промышленное применение грибов рода Trichoderma
1.8.1. Использование Trichoderma в сельском хозяйстве в РТ
1.8.2. Использование Trichoderma как биофунгицида в РТ
1.8.3. Метаболитов и конидий изолятов Trichoderma
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Объекты исследования
2.1.1. Использованные микроорганизмы
2.1.2. Фунгицид амфотерицин В
2.1.3. Клетки HeLa
2.1.4. Подопытные животные (сток мышей CD-1)
2.1.5. Раствор пирена
2.1.6. Семена кукурузы
2.1.7. Микробиологический препарат "Мизорин"

2.2. Методы, использованные в работе
2.2.1. Культивирование микромицетов на средах Чапека и КГА для определения морфологических характеристик
2.2.2. Определение ферментативной активности (ксиланаза, целлюлаза и амилаза) микромицетов ТпсксхЗегта
2.2.2.1. Определение ксиланазной активности
2.2.2.2. Определение целлюлазной активности
2.2.2.3. Определение амилазной активности
2.2.3. Определение липидного состава гриба ТпскосЗегта
2.2.3.1. Экстракция фосфолипидов
2.2.3.2. Тонкослойная хроматография фосфолипидов
2.2.4. Определение элементарного состава спорово - мицелиального материала микромицетов Т. аярегеПит 551, Т.ИаЫапит 3, и влияние условий их выращивания на элементарный состав культуральной жидкости
2.2.5. Определение влияния метаболитов грибов рода ТпскснЗегта на рост фитопатогенных микромицетов Т. охунрогит, А. ам>атоп и А.
У1ауш
2.2.6. Оценка влияния Т. азрегеПит 551 и Т. Иатапит 3 на выработку афлатоксина В1 и охратоксина А грбом А. при совместном
культивировании
2.2.7. Определение клеточного ответа А. ам>атоп на воздействие амфотерицином
2.2.8. Изучение влияния метаболитов КЖ грибов рода Тг1сИос1егтс1 на изменение поверхностного потенциала спор фитопатогенных микромицетов
2.2.9. Влияние метаболитов КЖ ТпскосЗегта на клетки НеЬа
2.2.10. Изучение влияния КЖ грибов рода ТгкИосЗегта и пирена на массу тела, относительный вес некоторых органов, гематологические, иммунологические, биохимические и гистологические показатели мышей СИ
2.2.11. Фитотоксичность метаболитов Т. азрегеНит 551, Т. кагг’шпит 3 и
А. амгатоп
2.2.12. Биологическая обработка зёрен кукурузы и схема эксперимента сезона 2009 года
2.2.13. Биологическая обработка зёрен кукурузы и схема эксперимента сезона 2010 года
2.2.14. Статистическая обработка данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Морфологическая характеристика ТпсИосЗегта
3.1.1. Описания видов Т.азрегеНит
3.1.2. Описание Анаморфа штамма Т.кагггапитЪ
3.2.Характеристика биологической активности метаболитов КЖ штаммов
Т. азрегеНит 551 и Т. Иагг1апит

3.2.1. Ферментативная активность штаммов рода Trichoderma
3.2.2. Изучение липидного состава мицелия грибов рода Trichoderma
3.3. Характеристика элементарного состава культурального фильтрата и спорово-мицелиального материала T.asperellum 551 и Г. harzianum 3 в зависимости от среды их выращивания
3.4.Антибиотическая активность грибов Trichoderma к фитопатогенам растений и почвы в опытах in vitro
3.4.1. Влияние Trichoderma на рост фитопатогенных микромицетов рода Fusarium
3.4.2. Влияние Trichoderma на микромицеты рода Aspergillus
3.4.2.1.Влияние Trichoderma на микромицеты рода A.flavus
3.4.2.2.Влияние Trichoderma на выработку афлатоксина В1 и охратоксина
А грибами рода A.flavus
3.4.2.3.Влияние Trichoderma на микромицеты рода A.awamori
3.5.Исследование клеточных ответов A. awamori на воздействие фунгицидом (амфотерицин)
3.6. Изучение электрокинетического потенциала конидий микромицетов Trichoderma, Fusarium, Aspergillus
3.6.1.Изучение поверхностного заряда спор при взаимодействии различных видов Trichoderma с фитопатогенами
3.7. Взаимоотношение Trichoderma с клетками Heia
3.8.Влияние КЖ Trichoderma и пирена на гематологические, гистологические, иммунологические и биохимические показатели мышей стока CD-I
3.9. Влияние метаболитов Trichoderma на растения в опытах in vitro и в опытах in vivo
3.9.1.Влияние метаболитов на растения в опытах in vitro (фитотоксичность) Т. asperellum 551, Т. harzianum 3 и A. awamori относительно проростков кукурузы
3.9.1.1. Микрофлора семян кукурузы до обработки Trichoderma
3.9.1.2. Микрофлора ризосферы растений после обработки Trichoderma
3.9.2.Исследование биологической активности КЖ Trichoderma на рост и продуктивность некоторых сортов кукурузы in vivo
3.9.2.1. Влияние метаболитов грибов рода Trichoderma на высоту и сухую массу растений
3.9.2.2. Влияние метаболитов грибов рода Trichoderma на продуктивность кукурузы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

гречихи при концентрации lppm в чашке Петри. Однако глиотоксин и виридин в дозе lppm не влияли на всхожесть и рост семян красного клевера и пшеницы, поскольку растения обладают разной устойчивостью к токсинам. Активность глиотоксина и виридина возрастает скорее при низких значениях pH (pH 4,0), чем при нейтральных (pH 6,0), что объясняется, по-видимому, тем, что при низких pH токсины стабильнее. В основном различные штаммы Trichoderma выделяют или глиотоксин, или виридин, и только незначительное число штаммов выделяют оба токсина, но в следовых количествах. Штаммы, выделяющие токсины, ингибировали всхожесть семян белой гречихи даже при высокой концентрации семян. Общим симптомом поражения является хлороз. Штаммы Trichoderma virens продуцировали глиотоксин, виридин и глиовирин в синтетической среде без почвы. Токсины обладают гораздо более выраженной антимикозной активностью, чем фитотоксической активностью [Luo et al., 2010; Harman, 2011].
Механизм токсичности данных веществ по отношению к растениям неизвестен. Показано, что глиотоксин ингибировал ацетолактатсинтазу в растениях. Ацетолактатсинтаза участвует в биосинтезе разветвленных аминокислот. Внесение разветвленных аминокислот в ростовую среду снижало токсичность глиотоксина. Глиотоксин также ингибирует активность и других ферментов. Виды Trichoderma также выделяют виридиол, дигидропроизводное виридина. Виридин в процессе метаболизма грибов частично превращается в виридиол. Изоляты Trichoderma virens, которые не выделяют виридин, не способны превращать виридин в виридиол. Виридиол является слабым антибиотиком, но сильным гербицидом. Фитотоксичные эффекты виридиола изучались гораздо интенсивнее, чем токсичность других вторичных метаболитов, синтезируемых видами Trichoderma. Виридиол, который синтезируется позитивными штаммами, адсорбируется в почве и проявляет максимальную токсичность по отношению к однолетним растениям и меньшую токсичность по отношению к однодольным растениям.