Малые молекулы в изучении особенностей белок-белковых взаимодействий

• Автор: Колотьева, Наталия Александровна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 139 с. : 17 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Антигены системы АВО крови

1.1.1. История изучения

1.1.2. Распространенность в природе

1.1.3. Строение, общность и отличительные особенности антигенов А, В человека

1.2. Генетическое обеспечение синтеза антигенов системы АВО

1.3. Ассоциированность метаболических особенностей с антигенным представительством АВО системы
1.4. Малые молекулы в регуляции метаболических процессов 40 ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика обследуемого контингента
2.2. Методы исследования
2.2.1. Определение группы крови по системе АВО
2.2.2. Биохимические методы исследования
2.2.3. Исследование содержания кортизола и инсулина
2.2.4. Лазерная сканирующая конфокальная микроскопия
2.2.5. Исследование антигенов А и В на эритроцитах методом проточной цитофлуориметрии
2.2.6. Компьютерное прогнозирование спектра биологической активности пиру вата
2.3. Статистическая обработка результатов исследований
ГЛАВА III. АССОЦИИРОВАННОСТЬ ПОКАЗАТЕЛЕЙ УГЛЕВОДНОГО МЕТАБОЛИЗМА КРОВИ У ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ С РАЗЛИЧНОЙ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТЬЮ КРОВИ

ГЛАВА IV. ВЛИЯНИЕ ПИРУВАТА НА АНТИГЕН-
АНТИТЕЛЬНОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
4Л. Изучение биологической активности пирувата т эШсо
4.2. Влияние пирувата на антиген-антительное взаимодействие
4.2Л. Влияние пирувата на антигены А и В
4.2.2. Влияние пирувата на изогемагглютинины АВО системы
4.2.3. Влияние пирувата на моноклональные антитела анти-А и анти-

ГЛАВА V. ВИЗУАЛИЗАЦИЯ АНТИГЕН-АНТИТЕЛЬНОГО
ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В УСЛОВИЯХ ДЕЙСТВИЯ ПИРУВАТА
5.1. Оценка влияния пирувата на лиганд-рецепторное взаимодействие флуоресцентных антител с антигенными детерминантами АВО системы
5.2. Оценка влияния пирувата на лиганд-рецепторное взаимодействие флуоресцентных антител с антигенными детерминантами АВО системы с использованием лазерной сканирующей конфокальной микроскопии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. Начавшееся тысячелетие для медицины можно обозначить как время поиска новых путей повышения качества жизни и здоровья человека с использованием новых технологий протеомики и метаболомики. Интенсивно развивающееся медико-биологическое направление наномедицины, возникшее на стыке ряда перспективных наук, гребует фундаментального подхода к решению лечебно-диагностических и валеологических задач. Имеющиеся на сегодняшний день в арсенале медицинской науки высокотехнологичные методы исследования позволяют получить информацию о состоянии базовых метаболических путей в организме. Однако практически отсутствует система данных для индивидуализации молекулярных основ метаболизма, факторах эндогенной природы, определяющих физиологический уровень обмена и специфику индивидуальной реакции. Одним из таких параметров, на наш взгляд, является генетически детерминированный признак - группа крови, определяющий особенности клеточного состава, показателей метаболизма, молекулярную основу развития различной патологии (Тананян А.О., 2001; Гармонов С.Ю. с соавт., 2004; Гильмиярова Ф.Н. с соавт., 2007, Lomenick В., 2010). В настоящее время актуально дальнейшее более детальное изучение структурнофункциональных характеристик отдельных антигенов, ответственных за каждую группу крови. Современные представления о структуре и топографии антигенов А,В,Н позволяют объяснить их высокую иммуногенность, роль в формировании иммунного ответа (Сахаров P.C., 2001; Оловникова Н.И.; 2001, Донсков С.И., 2001; Smolarek D. et al., 2008; Eiji Hosoi, 2008;). В этом пиане перспективным является исследование антигенов и антител АВ0 системы в качестве объектов межмолекулярных, в том числе белок-белковых взаимодействий. Известно, что последние во многом определяются наличием микроокружения, создаваемого промежуточными продуктами обмена, так

Так, разница между А- и В-гликозилтрансферазами состоит всего в 4 аминокислотах, из которых, как оказалось, только две, в позициях 266 и 268, определяют специфичность (Маїїітоп С., Магііп Р-Є., Апьіее И.О. й а1., 1986): А-трансфераза, переносящая М-ацетилгалактозамин, при замене лейцина на метионин в позиции 266 и глицина на аланин в позиции 268 превращается в фермент, переносящий галактозу с образованием В-антигена.
На рис. 9 показаны различия генов, кодирующих трансферазы А2, АЗ, Ах, ВЗ и др. Так, ген А2 характеризуется заменой 467-го нуклеотида и делецией 1060-го. Эта делеция приводит к сдвигу рамки, исчезновению стоп-кодона и продлению кодирующей области, в результате чего каталитический участок фермента удлиняется на 21 аминокислоту, что сказывается на его способности использовать в качестве субстрата Н типа 2, но не типа 3. По этой причине на эритроцитах А2 присутствует большое количество нетрансфиромированных цепей Н типа 3, которые на А1-эритроцитах преобразованы в А-антиген типа 3 (Накотогі 8., 1999).
А-аллель

Слабые А-аллель в

с ссе
526 703 795 803 1
1_______І
176 235 266
Аг д Оу Ееи Сіу
С А А С
526 703 706 ВОЗ *.

Бег Ме! Аіа
С Є С С
526 703 795
де 1060 1

О-аллели

(261)
С осо 526 703 796
-і_______І__Хі.

Т А Т ДС
108 168 220 (261) ^

___Ь.
А А Т А 648 681 771 829 - _ 1. 1 _ _ І_ _І

Рис. 9. Гены локуса АВО (Оловникова Н.И., Николаева Т.Л., 2001).