Молекулярные механизмы взаимодействия оксида азота(II) и низкоинтенсивного лазерного и светодиодного излучения с митохондриями

• Автор: Буравлев, Евгений Александрович
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 126 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

1. Введение

2. Обзор литературы

2.1. Химические свойства и биологическая роль оксида азота(П)

2.1.1. Физико-химические свойства оксида азота(П)

2.1.2. Взаимодействие негемовых белков с оксидом азота(П)

2.1.3. Взаимодействие гем-содержащих белков с оксидом азота(П)

2.1.4. Участие N0 в физиологических и патофизиологических процессах

2.2. Механизмы действия лазерного излучения

2.2.1. Фотолиз нитрозильных комплексов

Нитрозильные комплексы гемоглобина
Нитрозильные комплексы цитохрома с
Нитрозильные комплексы цитохром с оксидазы
2.2.2. Фото динамическая теория действие низкоинтенсивного лазерного излучения
Действие низкоинтенсивного лазерного излучения (632,8 нм) на заживление ран
Влияние фотосенсибилизаторов на активацию лейкоцитов при действии лазерного излучения
Использование лазерного и УФ излучения при экземе и реинфузии облученной крови
2.3. Модель эндотоксического шока и действие лазерного излучения
2.3.1. Молекулярный механизм действия бактериальных
липополисахаридов

2.3.2. Низкоинтенсивное лазерное излучение при эндотоксическом шоке
3. Материалы и методы
3.1. Материалы
3.2. Методы исследования
Определение общего содержания белка
Облучение образцов митохондрий печени
Калибровка датчиков кислорода
Электрохимические измерения коэффициента дыхательного контроля митохондрий
Измерение ЭПР спектров митохондрий
Оценка мембранного потенциала
Определение концентрации N0
Процедура экстракции липидов из эритроцитов крови крыс
Процедура облучения животных гелий-неоновым лазером
Измерение люминол-зависимой хемилюминесценции лейкоцитов крови
Определение супероксиддисмутазной активности плазмы крови
Регистрация флуоресценции г/мс-паринариевой кислоты для измерения окисления липидов мембран
Измерение флуоресценции эндогенных порфиринов в плазме крови крыс
Поиск научной литературы
Статистическая обработка
4. Результаты

4.1. Оценка сродства оксида азота(П) к гемоглобину и митохондриальным комплексам переноса электронов
4.1.1. Исследование распределения оксида азота(П) между митохондриями и гемоглобином
4.1.2. Влияние гемоглобина на параметры дыхания митохондрий в присутствии N0
4.2. Влияние оксида азота(П) и лазерного излучения на митохондрии в условиях гипоксии
4.2.1. Исследование влияния степени восстановления митохондрияальных переносчиков на образование нитрозильных комплексов
4.2.2. Влияние лазерного излучения на нитрозильные комплексы митохондрии
4.3. Влияние лазерного излучения и оксида азота(П) на скорость дыхания и мембранный потенциал митохондрий
4.3.1. Влияние лазерного излучения на дыхание митохондрий в норме и в присутствии N0
Влияние лазерного излучения на интактные митохондрии
Влияние N0 на потребление кислорода митохондриями
Действие лазерного излучения на митохондрии в присутствии оксида азота(И)
4.3.2. Влияние ионов Са2+ на дыхание митохондрий
При воздействии лазерного излучения
В присутствии оксида азота(П)
Перекисное окисление липидов мембран митохондрий
4.4. Влияние лазерного излучения на функционирование митохондрий
при экспериментальном эндотоксическом шоке

Рис. 7. Влияние зеленого и красного лазерного излучения на активность лейкоцитов крови крыс при введении ЛПС в отсутствие (А) и в присутствии (Б) хлорина ев (3 мг/кг). 1 - без облучения; 2 - с облучением X = 532 нм, доза 0,75 Дж/см2; 3 - с облучением X = 632 нм, доза 0,75 Дж/см2; 4 - с облучением X = 632 нм, доза 1,5 Дж/см2. Столбцы слева - без введения ЛПС, столбцы справа - с введением ЛПС (25 мг/кг). По оси ординат 1цЛ1 (в отн. ед.), где 1ц - максимальная хемилюминесценция лейкоцитов, веденных из крови через 4 ч после начала эксперимента, II - максимальная хемилюминесценция лейкоцитов, веденных из крови в начале эксперимента [81].
В этой работе действие излучения оценивали по продукции свободных радикалов лейкоцитами, СОД активности плазмы крови и по количеству продуктов ПОЛ мембран эритроцитов. Было показано, что лазерное излучение во всех случаях приводит к повышению активности лейкоцитов (рис. 7), уровня окисленных липидов мембран эритроцитов и СОД активности плазм крови. Эти эффекты усиливаются при экспериментальном эндотоксическом шоке, а также в присутствии фотосенсибилизаторов (протопорфирин IX и хлорин ев). Добавление хлорина е6 вызывало уменьшение СОД активности плазмы крови.
Использование лазерного и УФ излучения пои экземе и реинфузии
облученной крови