Хлорамины аминокислот - ингибиторы агрегации тромбоцитов : физико-химические свойства и механизм действия

• Автор: Петрова, Анастасия Олеговна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 125 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение

Обзор литературы

1. Строение и функции тромбоцитов

2. Роль тромбоцитов в патогенезе сосудистых заболеваний

3. Необратимые (ковалентные) ингибиторы тромбоцитов

4. Сывороточный альбумин и его свойства

5. Гипохлорит-анион, хлораминовые производные аминокислот и их взаимодействие с компонентами крови

Материалы и методы

1. Реактивы
2. Получение хлораминовых и хлориминовых производных аминокислот и таурина
3. Компьютерный расчет парциальных зарядов атомов
4. Исследование распада хлораминов спектрофотометрическим методом
5. Получение обогащенной тромбоцитами плазмы
6. Выделение тромбоцитов
7. Регистрация агрегации тромбоцитов в обогащенной тромбоцитами плазме
8. Регистрация агрегации тромбоцитов в цельной крови
9. Регистрация агрегации изолированных тромбоцитов
10. Исследование гемолиза эритроцитов
11. Статистическая обработка полученных данных
Результаты и обсуждение
Глава 1. Физико-химические свойства и устойчивость хлораминовых производных аминокислот
1.1. Зависимость устойчивости хлораминовых производных аминокислот от
их структуры
1.1.1.Количественные закономерности распада хлораминовых производных аминокислот

1.2. Метод компьютерного расчета парциальных зарядов атомов
1.2.1. Парциальные заряды атомов углерода альфа и бета положения в молекулах хлораминовых производных аминокислот
1.2.2. Зависимость собственной устойчивости хлораминовых аминокислотных антиагрегантов от парциальных зарядов атомов
1.3. Гемолитическая активность хлораминовых производных аминокислот
1.4. Устойчивость и антиагрегационные свойства новых хлориминовых производных таурина
Глава 2. Действие хлораминовых производных аминокислот и таурина на изолированные тромбоциты
2.1. Антиагрегационное действие хлораминов и хлориминов в присутствии сывороточного альбумина
Глава 3. Изучение взаимодействия N. N - д их л ортау р ина с сывороточным альбумином спектрофотометрическим методом
Глава 4. Реакционные свойства хлориминовых антиагрегантов
4.1. Взаимодействие хлораминов с аминогруппами
4.2. Модификация тиольных и дисульфидных групп хлораминов
4.3. Антиагрегационное действие Б-оксида дисульфида
Выводы
Список литературы

Введение
Сердечно-сосудистые заболевания наравне с онкологическими заболеваниями и диабетом прочно удерживают первенство среди самых распространенных и опасных заболеваний XX и XXI веков.
Патологический тромбоз, связанный с усиленной активностью тромбоцитов и повышенным внутрисосудистым свертыванием крови, - частая и непосредственная причина смерти. При многих патологических состояниях происходит внутрисосудистая стимуляция тромбоцитов, они становятся гиперактивными. Это происходит, например, при операциях, разрыве атеросклеротических бляшек, в результате поступления в кровь агонистов из других тканей и т.п. Внутрисосудистое тромбообразование во многих случаях лежит в основе острого нарушения кровообращения при ряде сердечно-сосудистых заболеваний (ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, острый коронарный синдром). В Российской Федерации на болезни системы кровообращения приходится около половины всех случаев инвалидности и смертности людей в наиболее продуктивном возрасте. Применяемые в настоящее время противотромботические средства - антикоагулянты, препятствующие превращению фибриногена в фибрин, и антиагреганты, ингибирующие агрегацию тромбоцитов и секрецию тромботически активных соединений из клеточных структур (реакцию высвобождения), - недостаточно эффективны, имеют противопоказания.
В последнее время резко возрос интерес к ковалентным (необратимым) ингибиторам тромбоцитов. Эти ингибиторы подавляют функции тромбоцитов путем химической модификации молекулярных мишеней клеток. По сравнению с другими ингибиторами, действие которых связано с обратимым связыванием с мишенью, эффективность ковалентных ингибиторов определяется их двумя основными свойствами. Одно из них заключается в перманентном угнетении функций тромбоцита на весь срок его жизни. Второе свойство - кумулятивность небольших доз ингибитора в организме, что обеспечивает снижение побочного действия. К категории ковалентных ингибиторов относятся ацетилсалициловая кислота (аспирин) и тиенопиридины (тиклопидин, клопидогрел, прасугрел). Аспирин - давно признанное и высокоэффективное противотромбоцитарное

с помощью №+/СГ-зависимого транспортного механизма и модулировать некоторые внутриклеточные процессы [77].
Таурин используется для защиты фагоцитарных клеток от окислительных повреждений, вызванных воспалительным стрессом, для ликвидации токсичного гипохлорита и образования менее токсичного Ы-монохлортаурина, который сам по себе обладает противоспалительным действием. Ы-монохлортаурин ингибирует образование многих воспалительных медиаторов, таких как '02_, N0, фактор некроза опухоли-а, интерлейкины, простагландин-Е2, макрофаг воспалительный белок-2 в фагоцитарных клетках. При стимуляции воспаления ‘02_, N0 и оксид углерода производятся последовательно, и каждая из этих молекул играет важную роль в последующей модуляции воспалительного процесса. Производство 14-монохлортаурина подавляет образование многих из этих воспалительных медиаторов, останавливает постоянные и хронические воспалительные процессы, которые лежат в основе многих патофизиологических событий [76].
Стабильность и реакционная способность у хлораминов различна и зависит от их структуры. Хлорпроизводные от а-аминоксилот (валин, аланин, лейцин и др.) относительно нестабильны и распадаются до альдегидов за минуты, которые собственно могут вызывать повреждение биологических макромолекул. В противоположность, хлорпроизводные (3-аминокислот, таких как таурин, более стабильны. Таурин обычно используется как ловушка количественного определения генерации гипохлорита фагоцитами [44].
Хлорпроизводные аминокислот также ингибируют функциональную активность тромбоцитов: секрецию содержимого плотных гранул, агрегацию, циклоокисгеназное окисление липидов [8,9,13,20,21]. Возможно, механизм действия хлораминов на тромбоциты связан с модификацией периферических тиольных, тиоэфирных и аминогрупп на поверхности клеток [10].
Антиагрегационное действие хлораминов зависит от их молекулярной массы, с уменьшением молекулярной массы усиливается противоагрегационное действие хлораминов. Возможно это связано с тем, что хлорамины взаимодействуют с химическими группами (например, с серосодержащими группами), которые находятся в узком «кармане» плазматической мембраны