Сравнительное изучение амилоидных свойств мышечных белков и Aβ(1-42)-пептида мозга

• Автор: Бобылёв, Александр Геннадьевич
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 110 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список использованных сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. АМИЛОИДОЗЫ

1.1. Распространенность амилоидозов и их проявление

1.2. История изучения амилоидозов

1.3. Современные представления о строении и формировании

амилоидов

1.4. Изучение амилоидных агрегатов in vitro

Глава 2. МЫШЕЧНЫЕ БЕЛКИ СЕМЕЙСТВА
ТАЙТИНА
2.1. Структура и функции молекул С-белка, Х-белка и Н-белка
2.2. Структура и функции смитина гладких мышц
Глава 3. ФУЛЛЕРЕНЫ
3.1. Открытие фуллеренов
3.2. Методы получения фуллеренов
3.3. Строение молекулы фуллерена С
3.4. Водорастворимые производные фуллеренов
3.5. Применение фуллеренов в биологии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
4.1. Экспериментальный материал
4.2. Выделение и очистка белковых препаратов
4.2.1. Выделение и очистка миозина из скелетных мышц
4.2.2. Очистка С-белка, Х-белка и Н-белка
4.2.3. Выделение смитина из гладких мышц
4.2.4. Выделение актина из скелетных мышц
4.3. Определение концентрации белковых препаратов
4.4. Проверка чистоты белковых препаратов

4.5. Электронная микроскопия
4.6. Спектральные методы
4.6.1. Метод флуоресцентного анализа
4.6.2. Спектрофотометрический метод
4.7. Исследование клеточной токсичности производных фуллерена Сб0..
Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 5. ВЫЯСНЕНИЕ СПОСОБНОСТИ ГЛАДКОМЫШЕЧНОГО
БЕЛКА СМИТИНА ФОРМИРОВАТЬ АМИЛОИДЫ IN VITRO
5.1. Изучение агрегационных свойств молекул
смитина гладких мышц кролика in vitro
Глава 6. ИЗУЧЕНИЕ АНТИАМИЛОИДНОГО ДЕЙСТВИЯ
ФУЛЛЕРЕНА С60 И ЕГО ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПРОИЗВОДНЫХ НА АМИЛОИДНЫЕ ФИБРИЛЛЫ МЫШЕЧНОГО Х-БЕЛКА И Ар(1-42)-ПЕПТИДА МОЗГА
6.1. Антиамилоидное действие гидратированного фуллерена С
на амилоидные фибриллы АР(1-42)-пептида мозга
6.2. Антиамилоидное действие натриевой соли поликарбоксильного производного фуллерена С60 на амилоидные фибриллы
мышечного Х-белка и АР(1-42)-пептида мозга
6.3. Антиамилоидное действие фуллеренола на амилоидные фибриллы
мышечного Х-белка и АР(1-42)-пептида мозга
6.4. Антиамилоидное действие комплексов фуллерена С60 с поливинилпирролидоном на амилоидные фибриллы
мышечного Х-белка и Ар(1-42)-пептида мозга
6.5. Антиамилоидное действие нитроксипроизводных фуллерена С6о на амилоидные фибриллы мышечного Х-белка
и АР(1-42)-пептида мозга
Глава 7. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ АНТИАМИЛОИДНЫХ
ВЕЩЕСТВ НА ФИЛАМЕНТООБРАЗОВАНИЕ АКТИНА
7.1. Исследование влияния комплексов фуллерена Сбо
с поливинилпирролидоном на филаментообразование актина
7.2. Исследование влияния натриевой соли

поликарбоксильного производного фуллерена С
на филаментообразование актина
Глава. 8. ИССЛЕДОВАНИЕ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ФУЛЛЕРЕНА С
И ЕГО ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПРОИЗВОДНЫХ
8.1. Исследование цитотоксичности натриевой соли поликарбоксильного производного фуллерена С6о, фуллеренола
и комплексов фуллерена Cgo с поливинилпирролидоном
8.2. Исследование цитотоксичности Сво-К02-пролина
Глава. 9. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ
АНТИАМИЛОИДНЫХ ВЕЩЕСТВ
9.1. Сравнительная оценка эффективности фуллерена С
и его водорастворимых производных на основе полученных
экспериментальных данных
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ФИНАНСОВАЯ ПОДДЕРЖКА РАБОТЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

IKHikedomain ЦFNMktйот» |кишaom»n QttqumctlmHioii QPEVKdomim Jz-rtpMli ДомеННЭЯ структура МОЛекуЛЫ ТаЙТИНЭ
(Freidburg et al., 2000)
сциичми М»0*0рИЫ N2-В
m—гт—®
Вэ а-°'Н®
'mS pmifflll tindtni^fl гадит Цю-« PtVK <*$t«l Ig ngion Г
-A-bandfflin-
iiiullll! il illlll HI IHIIIlll llllllllllllf IIKIIIII 111 Mill «
Icooh
Z-Disk I-Band
A-Band
super npiM region
Доменная структура молекулы смитина (Labeit et al., 2006)
I'll' ІГІІ 111ІІІІИІІІilldllll'lilllll ІТГЯ
I la-like domain 0 FN3-llke domain [] PEVK domain [] unique domain
Рис. 10. Доменные структуры молекул тайтина и смитина (Freiburg et al., 2000; Labeit et al., 2006).
Способность см-тайтина организовывать небольшие биполярные нити гладкомышечного миозина может играть роль в формировании сократительного аппарата в процессе развития гладкой мышцы (Kim et al., 2002). См-тайтин, вероятно, принимает участие в росте сократительной единицы. Его взаимодействие с боковой поверхностью плотных тел в сократительной единице будет создавать условия, необходимые для быстрого введения толстой и тонкой нитей в процесс растяжения клетки. Подобное явление было описано для тайтина поперечнополосатых мышц в процессе миофибриллогенеза, когда тайтин действовал как цитоскелетная платформа или «молекулярный проектировщик» для координации сборки сократительных единиц (Begum, et al., 1998).
Учитывая то, что смитин имеет структуру и свойства аналогичные тайтину (рис. 10), можно предположить, что смитин также способен формировать амилоиды. Проверка этого предположения является одной из задач нашего исследования. Другой задачей нашей работы было тестирование подходов к разрушению амилоидов с помощью фуллеренов.