Генотип-зависимые механизмы свободно-радикальных процессов при радиационном и химическом воздействии

• Автор: Саенко, Юрий Владимирович
• Шифр специальности: 03.01.01
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 334 с. : ил.

Оглавление

Условные обозначения

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Патофизиология свободно-радикальных процессов

1.1.1 Характеристика свободных радикалов и процессов свободно-радикального окисления при радиационном и химическом воздействии

1.1.2 Физиологические источники свободно радикальных молекул

1.1.3 Влияние свободно-радикальных процессов на клеточный метаболизм

1.2 Роль свободно-радикальных процессов в механизмах клеточной смерти

1.2.1 Роль свободно-радикальных процессов в программируемой клеточной смерти

1.2.2 Роль свободно-радикальных процессов в возникновении некроза

1.3 Радикально-индуцированные механизмы клеточной смерти в раковых клетках
1.3.1 Роль онкогенов и генов супрессоров опухолей в механизмах клеточной смерти неоплазмы

1.3.2 Радикально-индуцированное повреждение ДНК и
его связь с механизмами клеточной смерти
Глава 2. Материалы и методы
2.1 Объекты исследования
2.1.1 Клеточные линии
2.1.2 Штаммы ЗасНоготусев сегеУ18гае
2.2 Методы исследования
2.2.1 Цитохимические методы исследования
2.2.2 Морфологические методы исседования
2.2.3 Иммуногистохимические методы исследования
2.2.4 Биохимические методы исследования
2.2.5 Методы транскрилтомики
2.2.0 Статистическая обработка
Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение
3.1 Динамика развития радиационно и химически-
индуцированных свободно-радикальных процессов
3.1.1 Динамика накопления активных форм кислорода
после радиационного воздействия
3.1.2 Динамика накопления активных форм азота после
радиационного воздействия
3.1.3 Исследование источников активных форм кислорода после радиационного и химического воздействия
3.1.4 Влияние индукторов оксидативного стресса на ди-
намику образования активных форм кислорода после радиационного воздействия
3.1.5 Влияние ингибиторов полимеразы 1 поли(АДФ- ри-
бозы) на радиационно-индуцированную динамику изменения концентрации АФК
3.1.6 Влияние оксидативного стресса на внутриклеточную концентрацию глутатиона
3.2 Механизмы клеточной смерти под действием радиационно
и химически-индуцированного оксидативного стресса
3.2.1 Оценка величины некроза, апоптоза и автофаги и в зависимости от интенсивности радиационно-индуцированных свободно-радикальных процессов .
3.2.2 Исследование механизмов радиационно-
индуцированной гибели клеток неоплазмы с мутированным и нормальным геном ТР
3.2.3 Влияние индукторов оксидативного стресса на механизмы радиационно-индуцируемой клеточной смерти
3.3 Механизмы повреждения ДНК в условиях оксидативного
стресса различного генеза
3.3.1 Исследование динамики радиационно-
индуцированного повреждения ДНК во взаи-
мосвязи с кинетикой развития оксидативного стресса
3.3.2 Исследование кинетики репарации повреждений ДНК в условиях развития радиационно-индуцированного оксидативного стресса
3.3.3 Сравнительный анализ механизмов репарации ДНК в клетках с нормальным и мутантным геном ТР53 после радиационного воздействия
3.3.4 Влияние ингибиторов полимеразы 1 поли (АДФ-рибозы) на механизмы репарации ДНК в условиях радиационно-индуцированного оксидативного стресса

вация внутриклеточной антиоксидантной системы. Принято считать, что основу внутриклеточной антиоксидантной системы составляет трипептид - глутатион(С5Н)[374:, 205], антиоксиданты - аскорбат [209, 390, 322] и убихинон [114],ферменты - глутатиоппероксидаза, глутатиоп-З-трансферазы, глутатионредуктаза, супероксиддисмута-за и кита,лаза [200, 177]. Внутри клетки борьба идёт с липопероксидами и высокой концентрацией гидроперекисей при участии ферментов глутатионпероксидазы, каталазы и глутатион-З-трансферазы [371, 1]. К внутриклеточной антиоксидантной системе относят ещё два белка: глу-таредоксии и тиоредоксип, роль которых двояка. Основная их функция - восстановление ЭН-групп белков и поддержание их в восстановленном состоянии|42, 413]. Тиреодоксин и глутаредоксин поддерживаются в восстановленном состоянии СЗН-зависимой глутаредоксин-редуктазой и НАДФ-зависимой тиреодоксип-редуктазой, последняя также участвует в восстановлении аскорбат-радикала в аскорбат [190, 414, 103]. Убихинон, относящийся к истинным антиоксидантам, локализован в мембранах клеток и служит ловушкой для свободных радикалов. Свободный радикал, сталкиваясь с убихиноном, отрывает от последнего атом водорода. Сам радикал превращается в стабильную молекулу, а убихинон формирует стабильный радикал - беизосемихииоп12Ъ. Последний, превращается обратно в убихинон под действием ФАД-зависимых дегидрогеназ [114]. Борьбу с липопероксидами плазматических мембран ведёт фосфолипид-глутатиоппероксидаза (РЬСРх)[310, 124]. Катала-за локализована в пероксисомах. Она обладает достаточно высокой Кш в отношении пероксида водорода и основная её задача разлагать гидропероксид образовавшийся в ходе пероксисомального Д-окисления ЖК| 111, 411].
Роль глутатиона, глутатион пероксидазы, супероксиддисмута-зьпглутаредоксина и тиреодоксина двояка. С одной стороны несомненен