Исследование повреждения и процессов восстановления сетчатки глаза мышей после облучения ускоренными протонами и действия метилнитрозомочевины

• Автор: Виноградова, Юлия Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Дубна
• Количество страниц: 94 с. : ил.

Оглавление

Использованные сокращения

Введение

Глава 1. Литературный обзор

1.1. Строение сетчатки глаза животных

1.2. Резистентность сетчатки глаза при действии генотоксических агентов

1.3. Факторы, приводящие к цитотоксическим последствиям для сетчатки глаза

1.3.1. Радиационное воздействие на человека при осуществлении пилотируемых космических полетов

1.3.2. Радио-, химиотерапия и вторичные патологии зрения

1.4. Действие метилнитрозомочевины на сетчатку глаза животных

Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Содержание мышей
2.2. Облучение животных
2.3. Введение животным метилнитрозомочевины
2.4. Выделение сетчатки глаза мышей и приготовление суспензии ее клеток
2.5. Приготовление препаратов для морфологических исследований
2.6. Вестерн-аналга белков Р53 и АТМ
2.7. Иммуноцитохимическое определение экспрессии белков
2.8. ТиЫЕНдетекция гибели клеток
2.9. Регистрация электроретинограммы
2.10. Визуализация глиальных клеток Мюллера в срезах сетчатки глаза
2.11. Метод ДНК-комет
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Реакция сетчатки глаза мышей на облучение ускоренными протонами
3.2. Влияние метилнитрозомочевины на сетчатку глаза мышей
3.3. Спонтанные повреждения и репарация ДНК в клетках сетчатки глаза мышей

3.4. Адаптивный ответ сетчатки глаза мышей на введение метилнитрозомочевины и облучение протонами
Глава 4. Обсуждение результатов исследования
4.1. Генотоксическая устойчивость сетчатки глаза мышей
4.2. Структурное и функциональное восстановление сетчатки глаза мышей после генотоксического воздействия
Выводы
Заключение
Список литературы

Использованные сокращения
BrUdR Бромдезоксиуридин (bromodeoxyuridine)
Casp 3 Каспаза-3 (Caspase-3)
dsDNA Двунитевая ДНК (double strand DNA)
DTIC Дакарбазин (5-(3,3-Dimethyl-l-triazenyl)imidazole
carboxamide)
FasR Трансмембранный гликопротеид (FasR/APO-l/CD95,
Mw 45000), принадлежащий суперсемейству рецепторов TNF (Tumor Necrosis Factor)
F1TC Флуоресцеинизотиоцианат (fluorescein isothiocyanate)
mt Момент хвоста кометы (Tail Moment)
MAP-киназа Митоген активированные белки
NER Эксцизионная репарация нуклеотидов (nucleotide excision
repair)
PBS Фосфатно-солевой буфер (Phosphate-Buffered Saline)
ssDNA Однонитевая ДНК (single strand DNA)
Торо 2 Топоизомераза 2 (Topoisomerase 2)
TUNEL Terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated deoxyuridine
triphosphate-digoxygenin nick-end labeling XIAP X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis
ATM Ataxia telangiectasia mutated
АФК Активные формы кислорода
ГКИ Галактическое космическое излучение
ГКМ Глиальные клетки Мюллера
ИИ Ионизирующее излучение
ЛПЭ Линейная передача энергии
МНМ Метилнитрозомочевина (Methylnitrosourea)
РПЭ Ретинальный пигментный эпителий

Рис. 5. Схема получения и визуализации ДНК-комет:
1 — приготовление клеточной суспензии; 2 — смешивание клеточной суспензией с раствором низкоплавкой агарозы; 3 - получение гель-слайда на предметном стекле; 4 —лизис клеток; 5 — электрофорез; 6 - окрашивание клеток пропидиум йодидом; 7 - визуализация комет с помощью флуоресцентного микроскопа