Механизмы образования однонитевых разрывов и щелочнолабильных сайтов ДНК в лимфоцитах крови человека при воздействии УФА-излучения

• Автор: Сметанина, Надежда Михайловна
• Шифр специальности: 03.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 100 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Краткая характеристика ультрафиолетового излучения

1.2. Биологические эффекты УФА-излучения

1.3. Механизмы образования повреждений ДНК при воздействии

УФА-излучения

1.4. Заключение

Глава 2. Материалы и методы

Объект исследований

Иммобилизация клеток в агарозу
Получение нуклеоидов
Условия облучения
Воздействие перекиси водорода
Влияние тоничности раствора ЫаС
Метод ДНК-комет
Метод ДНК-гало
Статистический анализ полученных данных
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1. Сравнительный анализ однонитевых разрывов и щелочнолабильных сайтов ДНК в лимфоцитах периферической крови человека, подвергшихся воздействию 365 нм УФ-излучения,
рентгеновского излучения и перекиси водорода

3.2. Сравнительная оценка повреждений ДНК, индуцированных различными генотоксическими агентами, с помощью метода ДНК-гало
3.3. Влияние скавенджеров активных форм кислорода на повреждаемость ДНК в нуклеоидах лимфоцитов крови человека при воздействии 365 нм УФ-излучения
3.4. Исследование влияния инкубации в гипертонических растворах ИаС1 на выход ОР и ЩС ДНК
Заключение
Выводы
Приложение
Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
УФ Ультрафиолетовое излучение
УФС Коротковолновое (100-280 нм) ультрафиолетовое излучение
УФВ Средневолновое (280-315 нм) ультрафиолетовое излучение
УФА Длинноволновое (315—400 нм) ультрафиолетовое излучение
АФК Активные формы кислорода
АФА Активные формы азота
СРБя Циклобутановые пиримидиновые димеры
тт Тимин-тиминовый димер
ТС Тимин-цитозиновый димер
СС Цитозин-цитозиновый димер
’о2 Синглетный кислород
но» Г идроксил-радикал
ДНК Дезоксирибонуклеиновая кислота
ОР Однонитевые разрывы
щс Щелочнолабильные сайты
дмсо Диметилсульфоксид
№N3 Азид натрия
N30 Хлорид натрия
ИИ Ионизирующее излучение
ДНК (Rizzo et al., 2011), активности репарации фотопродуктов, разрушения вилок репарации, остановленных на фотопродуктах (Garinis et al., 2005) и/или последствием последующего окислительного стресса в облучённых клетках (Cortat et al., 2013).
1.4. Заключение
Таким образом, в настоящем литературном обзоре описаны основные механизмы генотоксического действия УФА-излучения. Дано краткое изложение физического и биохимического механизмов действия излучения, начиная с изолированной ДНК, а также подробно рассмотрено его воздействие на клетки и млекопитающих в целом. УФА-излучение всё больше и больше стало интересовать учёных в последнее время. Это связано как с терапией ПУВА, которая, с одной стороны, используется для лечения различных дерматологических заболеваний, а с другой, часто приводит впоследствии к раку кожи, так и с частым посещением соляриев, пляжей, модой на загар. Последние данные эпидемиологических исследований свидетельствуют о наличии положительной корреляции между количеством посещений солярия и частотой возникновения меланомы у человека (Autier, 2011). УФА-излучение проникает в глубокие слои кожи и оказывает воздействие на дерму, которая богата капиллярами. При этом происходит облучение клеток периферической крови, в том числе и лимфоцитов. Однако до сих пор особенности индукции повреждений ДНК в лимфоцитах крови УФА-излучением практически не изучены. Существует лишь несколько работ на эту тему. В то же время не подлежит сомнению, что знание закономерностей индукции повреждений ДНК в лимфоцитах крови чрезвычайно важно для понимания механизмов общебиологического действия УФА-излучения. Восполнению пробелов в этой области и посвящено настоящее диссертационное исследование.