+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Программируемая гибель клеток и окислительный стресс, вызванные ингибиторами митохондриальных функций

  • Автор:

    Изюмов, Денис Сергеевич

  • Шифр специальности:

    03.00.25

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2005

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    127 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Актуальность проблемы
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Научная новизна работы
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Общие положения о программированной смерти клеток
УЧАСТИЕ КАСПАЗ В АПОПТОЗЕ
Активация апоптоза с участием рецепторов
Митохондриальный путь активации каспаз
Проапоптозные белки митохондрий
Независимая от каспаз гибель клеток
РОЛЬ БЕЛКОВ СЕМЕЙСТВА BCL-2 В АПОПТОЗЕ
Участие кальция в апоптозе
АКТИВНЫЕ ФОРМЫ КИСЛОРОДА и азота
Роль комплекса 1 дыхательной цепи в продукции АФК
Роль комплекса III дыхательной цепи в продукции АФК
Антиоксидантные системы клетки
Влияние АФК на гибель клеток
Регуляция апоптоза с помощью АФК и АФА
Продукция АФК при фотодинамической обработке клеток
Механизмы гибели клеток, индуцированной истощением АТР
Сенсоры уровня АТР в клетках
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Использованные культуры клеток
Использованные реагенты
Приготовление растворов и сред для культивирования клеток
Приготовление фосфатного буфера
Приготовление безглюкозной поддерживающей среды Рингера-Кребса
Приготовление растворов трипсина и ЭДТА
Приготовление питательной среды Игла, модифицированной Дальбекко
Методы работы
Пересев клеток
Замораживаие и размораживание клеточных культур
Пересев клеток для экспериментов
Определение концентрации клеток с помощью камеры Горяева
Определение жизнеспособности клеток
Определение жизнеспособности клеток с использованием флуоресцентных красителей
Определение продукции АФК
Регистрация дыхания клеток
Иммунофлуоренсцентное окрашивание клеток
Регистрация выхода цитохрома с с помощью Western блота
Истощение уровня АТР в клетках и его восстановление
Разделение фрагментированных молекул ДНК с помощью электрофореза
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Измерение дыхания клеток линий HeLa и HeLa-Bcl
Влияние митохондриальных ингибиторов на гибель клеток
Влияние биоэнергетических функций митохондрий на алоптоз клеток, индуцированный
стауроспорином
Влияние биоэнергетических функций митохондрий на апоптоз клеток, индуцированный фактором некроза опухолей-а
ОЛИГОМИЦИН ИНГИБИРУЕТ АПОПТОЗ КЛЕТОК HELA, ИНДУЦИРОВАННЫЙ ФНО-А
Окислительный стресс, индуцируемый ФНО-a и действие митохондриальных ингибиторов
Исследование продукции АФК митохондриями клеток HeLa, индуцированной фотоактивацией
ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО КРАСИТЕЛЯ MlTOTRACKER RED

Исследование окислительного стресса и апоптоза, индуцированных временным снижением
уровня АТР в клетках HeLa
Комбинация 2-ДОГ и митохондриальных ингибиторов вызывает снижение уровня АТР в клетках
HeLa
Временное снижение уровня АТР вызывает гибель клеток HeLa
Апоптоз клеток HeLa, вызванный временным снижением уровня АТР в клетках, сопровождается
транслокацией белка Вах и выходом цитохрома с из митохондрий
Дробление молекул ДНК при апоптозе
Апоптоз клеток HeLa, вызванный временным падением уровня А ТР, сопровождается окислительным
стрессом
Глубокое снижение уровня АТР вызывает преимущественно некротическую гибель клеток HeLa
Вляние удаления сыротки из среды инкубации на гибель клеток HeLa, индуцированную митохондриальными ингибиторами
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АНТ — транслокатор адениннуклеотидов
АФА — активные формы азота
АФК — активные формы кислорода
БК — бонгкрековая кислота
ВЗАК — вольт-зависимый анионный канал
ВММ — внутренняя митохондриальная мембрана
ГП — неспецифическая гигантская пора митохондрий
ГПр — глутатионпероксидаза
ГР — глутатионредуктаза
ДМСО — диметилсульфоксид
ДНФ — 2,4 динитрофенол
ДОГ — 2-дезокси-Э-глюкоза
ДТТ — дитиотрейтол
МАПК — митоген-активируемая протеинкиназа
НММ — наружная митохондриальная мембрана
ПКС — программируемая клеточная смерть
ПМ — плазматическая мембрана
ПН — программируемый некроз
ПФП — пентозофосфатный путь
рГЦ — растворимая гуанилат циклаза
СМЧ — субмитохондриальные частицы
СОД — супероксиддисмутаза
СТ — стауроспорин
ТФ —транскрипционный фактор
ТФП —трифторпиразин
ФБ — фосфатный буфер
ФДТ — фотодинамическая терапия
ФНО-а — фактор некроза опухолей-а
цОМР — циклический ОМР
Цс А — циклоспорин А
ЭДТА — этилендиаминтетраацетат
каспаз. При этом добавление глюкозы в момент гипоксии препятствовало падению уровня АТР в клетках и последующему развитию апоптоза. Если в условиях нормоксии клетки не способны были синтезировать АТР вследствие различных нарушений - апоптозный тип гибели переключался на некроз (Saikumar et al„ 1998).
Показано, что обработка клеток Jurkat стауроспорином вызывает апоптоз. Инкубация этих клеток в безглюкозной среде с ротеноном приводила к снижению в них уровня АТР. Добавление глюкозы приводило к восстановлению уровня АТР в клетках Jurkat. При этом обработка клеток стауроспоином в этих условиях вызывала некроз. Сверхэкспрессия белка Вс1-2 в этих клетках была способна подавлять и апоптоз и некроз (Single et al., 2001).
Обработка клеток почечного эпителия с помощью NaCN и 2-ДОГ приводила к снижению в них уровня АТР. После восстановления уровня АТР в клетках при возврате их в нормальные условия происходили выход цитохрома с из митохондрий и активация каспаз. При этом было показано, что преинкубация клеток в условиях теплового шока вызывала экспрессию в них белка Hsp72 и в значительной степени подавляла апоптоз, индуцированный временным снижением уровня АТР в клетках. Предполагается, что защитный эффект белка Hsp72 заключается в его участии в поддержании целостности НММ и препятствию выхода проапоптозных белков из митохондрий. Кроме этого белок Hsp72 в роли шаперона может копрецепитировать с белком Вс1-2 и восстанавливать его функцию. Также показано, что Hsp72 может взаимодействовать с вышедшим из митохондрий цитохромом с и препятствовать образованию апоптосомы (Li et al., 2002).
В исследованиях, проведенных на интерлейкин-зависимых полилимфоидных клетках мышей FL5 и клетках Jurkat, было показано, что комбинированная обработка с помощью ингибитора комплекса III антимицина А и ингибитора АНТ бонгкрековой кислоты (БК) вызывала снижение уровня АТР в клетках и их последующую апоптозную гибель. При этом действие антимицина А и БК по отдельности не приводило к изменению уровня АТР в клетках и гибели - в этих условиях потребности клеток в АТР реализовывались за счет гликолиза. При этом экспрессия белка Вс1-2 в клетках FL 5 и Jurkat подавляла апоптоз, не влияя на

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.109, запросов: 967