Гетерогенность популяций Listeria monocytogenes по идентификационным признакам в окружающей среде и рыбных продуктах

• Автор: Аль-Асбахи Надия Хассон
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
КОЕ - колонеобразующая единица ОМЧ - общее микробное число.
ПБЛ - питательный бульон для листерий.
П АЛ"- питательный агар для листерий.
РА - реакция агглютинации.
FDA - Food and Drug Administration.
IDF - International Dairy Federation.
ISO - International Standardization Organization.
LEB - Listeria Enrichment Broth.
NGFIS - Norway Government Food Safety Service.
USDA-FSIS - United State Department of Agriculture - Food Safety Inspection Service,USA.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Глава I. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
«Современные проблемы выявления и идентификации Listeria monocytogenes в неклинических образцах»
1.1. Биологическая характеристика бактерий рода Listeria, особенности, определяемого ими патологического процесса
1.1.1. Биологическая характеристика бактерий рода Listeria.
1.1.2. Распространение листерий в природе, устойчивость к
неблагоприятным воздействиям
1.1.3. Особенности протекания листериоза у людей,
факторы патогенности листерий
1.2. Современные методы обнаружения листерий в клинических образцах, объектах внешней среды, в пищевых продуктах
1.2.1. Накопительные и диагностические среды для
листерий
1.2.2. Видовая идентификация в пределах рода листерия
1.2.3 Серотипирование листерий
1.2.4. Гемолитическая активность листерий как видовой
идентификационный признак
1.2.5. Ускоренные методы идентификации листерий
1.3. Проблемы выявления и идентификации листерий в
неклинических образцах
1.3.1. Сублетальные повреждения клеток листерий,
переживание листерий в отсутствии питательных веществ

1.3.2. Смешанный характер популяций листерий в
неклинических образцах
L 3.3. Гемолитическая активность L. при сапрофитном
способе существования
1.3.4. Пути решения проблем выявления и идентификации
патогенных листерий в неклинических образцах
Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
П. 1. Бактериальные штаммы и методы их поддержания
П.2. Питательные среды
II.3. Вявление листерий в рыбе, воде, рыбной продукции
II. 4. Определение подвижности, сбраживания углеводов,
проведение каталазного теста
11.5. Серологические методы исследования
11.6. Выявление L.monocytogenes методом твердофазной фермент-
зависимой иммунофлюоресценции в анализаторе VIDAS
II. 7. Статистическая обработка результатов
Глава 1П. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
И ОБСУЖДЕНИЕ
III. 1. Сравнительная оценка эффективности накопления листерий
в различных по составу элективных средах
III. 1.1. Видовая специфичность элективных питательных
сред для обнаружения L.monocytogenes
Ш. 1.2. Эффективность накопления L.monocytogenes на
основных элективных питательных средах
III. 2. Оценка встречаемости листерий в водоемах, на рыбе и
рыбной продукции Северо-западного региона РФ
Ш.2.1. Частота встречаемости листерий в образцах воды и
рыбы из водоемов Ленинградской области

I.2.4. Гемолитическая активность листерий как видовой идентификационный признак
В-гемолиз. Наличие р-гемолитической активности у L.monocytogenes (на агаре с кровью барана или эритроцитами барана) является ключевым признаком для идентификации вида. В роде Listeria 3 гемолитических вида. У L.monocytogenes гемолитическая зона узкая шириной около 1 мм. Сходная картина гемолиза наблюдается у L.seeligeri. У L.ivanovii зона гемолиза широкая, достигает 8-10 мм.
Хорошо охарактеризованные лабораторные штаммы L.monocytogenes часто имеют слабую гемолитическую активность или вообще ее лишены при тестировании на твердой питательной среде с бараньей кровью. Даже типовой штамм L.monocytogenes АТСС 15313 в Американской коллекции типовых культур не имеет гемолитической активности (Kathoriou, Pine, 1991). В связи с этим вопрос о значимости гемолитической активности для идентификации L.monocytogenes стоит очень остро.
САМР-тест при идентификации видов листерий представляет собой явление расширения и дополнительного просветления зоны гемолиза около колонии или штриха листерий на кровяном агаре в непосредственной близости со штрихом другой гемолитической бактерии (Staphylococcus aureus или Rhodococcus equi).
Первоначально феномен CAMP-теста был описан Кристи, Аткинс и Мюнх-Петерсон (Cristie, et al., 1944), авторы описали явление усиление гемолитической активности стрептококков группы В на кровяном агаре вблизи штриха S. aureus, продуцирующего Р-токсин. Это явление синергизма при гемолизе регистрировалось только при использовании крови барана или быка. Тест используется до сих пор в клинике для выявления стрептококков группы В.