+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Кинетика образования комплекса антиген-антитело на микрочипах

  • Автор:

    Зубцов, Дмитрий Александрович

  • Шифр специальности:

    03.00.03

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2008

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    90 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ЕЕ Общая характеристика микрочипов
Е2. Применение белковых микрочипов

ЕЗ. Изготовление микрочипов
1.3.1. Методы иммобилизации белков на микрочипах
1.3.1.1. Физическая иммобилизация
1.3.1.2. Химическая иммобилизация
1.3.1.3. Иммобилизация за счет комплексообразования
1.3.1.4. Иммобилизация в пористых средах
1.3.1.5. Иммобилизация белков на трехмерных гидрофильных
носителях
1.3.2. Методы нанесения молекулярных зондов
1.3.2.1. Микроконтактный метод
1.3.2.2. Микроструйный метод
1.3.2.3. Ближнее электронапыление
1.3.2.4. Дальнее электронапыление
1.3.2.5. Микроконтактная печать
1.4. Микрочипы на основе гидрогелей
1.5. Сравнение двумерных и трехмерных микрочипов
1.6. Изучение кинетики на гидрогелевых микрочипах
1.7. Методы ускорения анализа на микрочипах
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Приборы и реактивы
2.2. Изготовление микрочипов
2.3. Введение флуоресцентных меток в молекулу белка

2.4. Определение эффективности иммобилизации
2.5. Прямой анализ на микрочипах
2.6. Сэндвич-анализ ПСА на микрочипах
2.7. Флуоресцентные измерения на чипах
2.8. Кинетические измерения на микрочипе
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Сравнение эффективности иммобилизации в двух системах
3.2. Сравнение поверхностных и гидрогелевых микрочипов по уровням сигналов в сэндвич-иммуноанализе
3.3. Кинетика реакции антиген-антитело на микрочипах
3.4. Теоретическое описание кинетики связывания антигена из раствора с антителами, иммобилизованными в ячейках микрочипа
3.4.1. Кинетика и время насыщения
3.4.2. Ускорение транспорта антигена при помощи перистальтического насоса и эффект экранирования
3.5. Эффект принудительного перемешивания раствора
3.6. Концентрационные зависимости уровней сигналов и характерных времен
3.7. Влияние интенсивности перемешивания
3.8. Перспективность применения перемешивания
ВЫВОДЫ
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ИФА - иммуноферментный анализа
PBS - фосфатно-солевой буфер (0,01 М, 0,15 М NaCl, pH 7,2)
PBST - фосфатно-солевой буфер, содержащий Tween 80 (0.1%)
PVA - поливиниловый спирт
PVP - поливинил-пирролидон
Bind Silan - (3-метоксисиллил)пропилметакрилат
ПСА - простата-специфический антиген

таким образом стекла с помощью робота наносили белок в 40% растворе тригалозы в PBS. Затем микрочипы выдерживали 17 часов при +4°С.
Все микрочипы проходили контроль качества при помощи специально разработанного в нашей лаборатории портативного микроскопа (ИМБ, Москва). Микрочипы с отклонениями в позиции и радиусах гелевых элементов не более чем на 5% от среднего значения были взяты для экспериментов.
Перед проведением экспериментов чипы отмывали в PBST в течение 20 минут, затем в дистиллированной воде и просушивали.
2.3. Введение флуоресцентных меток в молекулу белка
Флуоресцентные красители присоединяли к аминогруппам белков. К 5 мкл раствора N-гидрокси-сукцинимидного эфира Су-3 в ацетонитриле приливали 50 мкл раствора белка (5 мг/мл) в бикарбонатном буфере (0,01М Na2C03 pH 9.0) и выдерживали 2 часа при комнатной температуре (соотношение белок/краситель - 1/10). Флуоресцентно-меченные белки очищали от низкомолекулярных примесей гель-фильтрацией на Micro Bio-Spin колонках, содержащих Sephadex G-25 {Pharmacia). Количество молекул красителя, введенных в молекулу белка, определяли спектрофотометрически по поглощению при длинах волн 650 нм для Су-3 и 280 нм для белка.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.121, запросов: 967