Популяционные характеристики эритроцитов в норме и патологии; фильтрационно-осмотические методы исследования деформируемости

• Автор: Лисовская, Ирина Львовна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 201 с. : ил.

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Общие свойства эритроцитов. Деформируемость - важнейшая функциональная характеристика эритроцитов. Параметры эритроцитов, определяющие их деформируемость. Зависимость этих параметров от концентрации внутриклеточного ионизированного кальция
2. Основные методы количественной оценки деформируемости эритроцитов и возможность их применения для оценки популяционных характеристик эритроцитов в крови
2.1 Ротационная вискозиметрия
2.2 Эктацитометрия:ЬОЯСА, осмоскан,
реоскоп
2.3 Фильтрационные методы
2.4 Микропипеточный метод
2.5 Измерение скорости движения эритроцитов по силиконовым микроканалам
3. Гетерогенность популяции эритроцитов в крови. Популяционные характеристики эритроцитов в норме. Корреляционные связи между параметрами эритроцитов
4. Физиологическое старение эритроцитов. Изменение основных параметров и реологических свойств эритроцитов при старении in vivo. Роль внутриклеточного ионизированного
кал ьция
5. Влияние некоторых факторов на стационарный уровень внутриклеточного ионизированного кальция, на активность Гардос-каналов и деформируемость эритроцитов
5.1 Увеличение проницаемости мембраны эритроцита для кальция
под действием сдвигового напряжения
5.2 Увеличение проницаемости мембраны эритроцита для кальция и ингибирование кальциевого насоса под действием
окислителей
5.3 Факторы, влияющие на стационарный уровень внутриклеточного ионизированного кальция и реологические свойства эритроцитов in
vivo
6. Изменение реологических свойств и популяционных характеристик эритроцитов в крови при некоторых патологических состояниях и повреждающих воздействиях
6.1. Гемолитические анемии
6.1.1. Наследственный сфероцитоз и эллиптоцитоз
6.1.2. Наследственная высоко-фосфатидилхолиновая гемолитическая анемия, наследственный ксероцитоз, наследственный стоматоцитоз
6.1.3. Аутоиммунная гемолитическая анемия
6.1.4. Серповидноклеточная анемия
6.2. Гипертензия и мозговые нарушения
6.3. Травмы, инфекции, сепсис и воспаление
6.4 Хроническая почечная недостаточность (ХПН)
6.5. Механическая травма эритроцитов
6.6. Консервированныеритроциты
6.7. Заключение
III МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1 Приготовление суспензий эритроцитов
2 Модификация эритроцитов с помощью различных воздействий.
2.1. Обработка эритроцитов глутаровым альдегидом
2.2. Загрузка эритроцитов кальцием с помощью ионофора А23187
2.2.1. Загрузка кальцием эритроцитов, ресуспендированных
в НЕРЕЗ-буфере
2.2.2. Загрузка кальцием эритроцитов, ресуспендированных в плазме
2.3. Загрузка эритроцитов кальцием с помощью ортованадата
2.4. Загрузка эритроцитов кальцием с помощью истощения
3. Измерение распределения эритроцитов по
плотности
4.Оценка везикуляции эритроцитов
б.Фракционирование эритроцитов по плотности
6. Фильтрационные измерения
6.1. Фильтрометр ИДА-01;
6.2. Кинетический фильтрометр ИДА
6.3. Фильтры
7. Исследование консервированных
и криоконсервированных эритроцитов
8. Гематологические показатели
9. Статистическая обработка результатов
IV РЕЗУЛЬТАТЫ
1. Разработка фильтрационно-осмотических методов (ФИОМ)
1.1. Зависимость скорости прохождения эритроцита
через узкую пору от его геометрических и механических параметров. Математическая модель №1
1.2 Фильтрометр ИДА-01. Индекс фильтруемости; его зависимость от осмотичности среды
1.3 Определение зависимости процентного содержания нефильтрующихся клеток в суспензиях эритроцитов от осмотичности среды (распределение эритроцитов по исг) с помощью фильтрометра ИДА-01. Метод последовательного отмывания фильтра
1.4 Определение зависимости процентного содержания нефильтрующихся клеток в суспензиях эритроцитов от осмотичности среды (распределение эритроцитов по исг-) с помощью фильтрометра ИДА-01. Метод двух гематокритов
1.5 Кинетический фильтрометр ИДА-03. Обработка экспериментальных данных.
2. Распределение эритроцитов в крови здоровых доноров по плотности и критической осмотичности (по фильтруемости)
6. Изменение реологических свойств и популяционных характеристик эритроцитов в крови при некоторых патологических состояниях и повреждающих воздействиях.
В последнее время в клинической практике все шире используются методы и результаты гемореологии, исследующей закономерности протекания цельной крови и ее компонентов по сосудам циркуляции или искусственным системам. С каждым годом возрастает количество публикаций, посвященных клиническим приложениям гемореологии и ее основного раздела - реологии эритроцитов [6,8,10,13,23,44,189,311,321].
Как уже отмечалось, реологические свойства эритроцитов наиболее существенны при протекании крови по системе микроциркуляции, поскольку клеткам, имеющим средний диаметр около 8 р, приходится проходить через капилляры диаметром 3-5-мкм. Таким образом, решающую роль приобретает деформируемость эритроцитов, т.е. их способность изменять форму под действием внешних сил. В норме эритроциты обладают очень высокой деформируемостью, что определяется вязкоэластичными свойствами мембраны, высоким отношением площади поверхности к объему клетки и низкой вязкостью внутриклеточного содержимомого [107].
Основные причины изменений деформируемости эритроцитов, наблюдаемых при различных патологических состояниях, могут быть условно разделены на три группы:
I. Нарушения, возникающие при эритропоэзе (генетически обусловленные анемии, в том числе дефициты ферментов, серповидноклеточная анемия, наследственный сфероцитоз и эллиптоцитоз, талассемия, острая почечная недостаточность и т.д.)
II. Нарушения, возникающие в процессе циркуляции (действие плазменных факторов, иммунных комплексов, активированных лейкоцитов, химических или лекарственных соединений, инфекций, механических повреждений).
III. Комбинация I и II.
При патологических состояниях и повреждающих воздействиях обычно отмечается снижение деформируемости эритроцитов. Это снижение не обязательно является причиной нарушений микроциркуляции, но часто коррелирует со степенью этих нарушений.
Ниже будут рассмотрены некоторые виды патологий и повреждающих воздействий, для которых характерны изменения деформируемости эритроцитов.