Взаимодействие и слияние бислойных липидных мембран

• Автор: Меликян, Григорий Борисович
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 159 c. : ил

СПИСОК ИСПОЛЬЗУБЕЛЫХ СОКРАЩЕНИЙ
I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
§ I. СЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ МБМБРАН
1.1. Слияние мембран в физиологических условиях
1.2. Слияние биологических мембран под действием вирусов, химических соединений и электри-
. ческого ПОЛЯ
1.3. Взаимодействие липидных бислоев как основа слияния биологических мембран
§ 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МОДЕЛИ ДЛЯ'ИЗУЧЕНИЯ
. МЕХАНИЗМОВ СЛИЯНИЯ МЕМБРАН
2.1. Слияние липоссм между собой
2.2. Слияние липосом с БЛМ
2.3. Взаимодействие БЛМ между собой
§ 3. СТРУКТУРНЫЕ ПЕРЕСТРОЙКИ В ЛИШЩНЫХ
ЕИСЛОЯХ ПРИ СЛИЯНИИ
П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
§ I. Материалы
§ 2. Конструкция измерительной ячейки и визуаль-
. ный контроль за взаимодействием БЛМ
§ 3. Измерение электрических параметров и
. натяжения БЛМ
§ 4. Емкостный метод контроля за основными
. стадиями слияния
§ 5. Получение БЛМ, не содержащих растворителя
Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
§ I. ОСНОВНЫЕ' СТАДИИ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛИПИДНЫХ
. БИСЛОЕВ
§ 2. ПЛОСКОПАРАЛЛЕШЬНЫЙ КОНТАКТ БЛМ
2.1. Теоретический анализ модели

2.2. Результаты
2.3. Обсуждение
§ 3. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА МШОСЛОЙНОГО
СЛИЯНИЯ МЕМБРАН
3 .1. Постановка задачи
3.2. Результаты
3.3. Обсуждение
§ 4. РОСТ КОНТАКТНОГО ШСЛОЯ
4.1. Емкостные измерения
4.2. Скольжение монослоев друг относительно друга
4.3. Обсуждение
§ 5. СЛИЯНИЕ БИСЛОЙНЫХ ЛШВДНЫХ МЕМБРАН
5.1. Электроотимулируемое слияние БЛМ
5.2. Са2+-индуцируемое слияние БЛМ,
не содержащих растворителя
§ 6. ИССЛЕДОВАНИЕ СТАБЖБНОСТИ МЕМБРАННОЙ
ТРУБКИ
6.1. Теоретический анализ устойчивости
мембранной трубки
6.2. Результаты
6.3. Обсуждение
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ Аз - азолектин
БЛМ - бислойная липидная мембрана
кБЛМ - контактирующие бислойные липидные мембраны
ШО - глицеринмоноолеат
ДОФХ - диолеилфосфатидилхолин
IMP - внугримембранные частички
КЛ - кардиолипин
ЛФХ - лиз офосфатидилхолин
lip - липидные внутрнмембранные частички
ОФЛ - общие фосфолипиды
ТС - три ламинарная структура
ФГ - фосфатидилглицерол
ФИ - фосфатидилинозитол
ФК - фосфатидвая кислота
ФС - фосфатидилсерин
ФХ - фоофатидилхолин
ФЭА - фосфатидилэтаноламин
ЭДТА - этилендиаминтетраацетаг

ридов в сквалене исследовали также в /180-182/.
С помощью незначительной модификации методики Уайта нам впервые удалось получить бислои без растворителя из различных фосфолипидов. Для получения "сухих” мембран из Аз производили его десятикратную промывку ацетоном, тщательно сушили и взвешивали. Затем растворяли в очищенном цри помощи окиси алюминия сквалене до концентрации 5-Ю мг/мл. Раствор Аз в сквалене готовили ежедневно непосредственно перед экспериментом. Для бислоев из ФЭА, КЛ и ФС пришлось несколько видоизменить методику: эти липиды сначала растворяли в хлороформе (~50 мг/мл), а потом добавляли сквален, тщательно перемешивали и выпаривали хлороформ под вакуумом. Растворы ФЭА, КЛ в сквалене хранили не более двух суток при -10°С.
Скваленовые БЛМ большой площади (~1,5«КП6 м^) достаточно стабильны и легко выдавливаются друг навстречу другу, увеличивая при этом площадь до 1,5-2 раз. Отметим, что использование данной -методики не позволило нам получить "сухие" бислои из яичного фосфатиди лхолина. БЛМ из растворов ШО в сквалене оказались существенно менее стабильными, чем мембраны из фосфолипидов.
Для бислоев, не содержащих растворителя, характерна меньшая толщина, а .следовательно, большая емкость. Поэтому содержание растворителя в мембранах в первую очередь отражается на их удельной емкости См. Из табл. I видно, что использование сквалена в качестве растворителя фосфолипидов, так же как в случае моноглицеридов, приводит к резкому увеличению удельной емкости бислоев по сравнению с мембранами из декановых растворов. Так, См возрастает в 2 раза для бислоев из Аз, в 1,5 раза для ФЭА и в 2,2 раза для КЛ. Отметим, что значение удельной емкости, полученное для ФЭА в сквалене, практически совпадает с приведенным в /183/ для мембран из ФЭА, сформированных сведением монослоев (~6,5 м$Дг).