Агрегация тромбоцитов человека: поиск путей ее регуляции и коррекции

• Автор: Демина, Ольга Викторовна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 457 с. : 37 ил.

Содержание
Содержание

Список сокращений

Введение

Глава 1. Современные тенденции в дизайне новых антиагрегационных средств

1.1. Структурно-функциональная модель тромбоцита

1.2. Мембраносвязанные рецепторы тромбоцитов

1.3. Эйкозаноиды как модуляторы ответов тромбоцитов

1.4. Возможные пути регуляции каскада арахидоновой кислоты синтетическими физиологически активными веществами

1.5. Синтетические тромбоцит-активные вещества

1.6. Замещенные изоксазолы, как новый класс тромбоцит-активных соединений

Глава 2. Методы синтеза производных изоксазола и его 4,5-дигидроаналогов
2.1. Общие сведения
2.2. Основные направления и подходы к получению соединений с изоксазольным скэффолдом
2.2.1. Реакции 1,3-дикарбонильных соединений или их эквивалентов с гидроксиламином или его гидрохлоридом (путь А)
2.2.2. Реакции [3+2]-циклоприсоединения нитрилоксидов к алкинам или алкенам. Общие сведения
2.2.3. Реакционная способность и методы получения и генерации нитрилоксидов
2.2.4. Хемо-, регио- и стереоселективность реакции [3+2]-циклоприсоединения нитрилоксидов. Влияние структуры реагентов и условий проведения процесса
2.2.4.1. Реакционная способность нитрилоксидов в реакции [3+2]-циклоприсоединеиия с производными алкинов и алкенов
2.2.4.2. Региоселективность процесса [3+2]-циклоприсоединения нитрилоксидов с производными алкинов и алкенов
2.2.4.3. Стереоселективность процесса [3+2]-циклоприсоединения нитрилоксидов
с производными алкенов
2.3. Синтез производных изоксазолов, содержащих пиридиновый фрагмент
2.4. Синтез 5-замещепных 3-пиридил-1,2,4-оксадиазолов
2.5. Синтезы меченых ингибиторов агрегации Тц
2.5.1. Методы введения тритиевой метки в молекулу ингибиторов агрегации Тц
2.5.2. Синтезы ингибиторов агрегации Тц, содержащих фрагмент ретиноевой кислоты
2.5.3. Синтезы ингибиторов агрегации Тц, содержащих фотохромные метки
2.6. Подтверждение структур синтезированных веществ класса замещенных изоксазолов физико-химическими методами анализа. Анализ взаимосвязи строения синтезированных соединений и их физико-химических и спектральных
характеристик
Глава 3. Антиагрегационная активность 5-замещенных 3-пиридилизоксазолов. Кинетические закономерности процесса
3.1. Исследование антиагрегационой активности 3,5-замещенных изоксазолов и их 4,5-дигидропроизводных in vitro
3.2. Определение структуры фармакофорного фрагмента антиагрегационных
средств класса 5-замещенных 3-пиридилизоксазолов
Глава 4. Исследование механизма действия 3,5-замещенных изоксазолов
Материалы и методы исследования
Выводы
Список использованной литературы
Список сокращений и обозначений
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ДМСО, DMSO - диметилсульфоксид
ДМФА, DMF -диметилформамид
КССВ - константа спин-спинового взаимодействия
НПВП - нестероидные противовоспалительные препараты
Р-рецепторы - рецепторы простаноидов;
ТГФ, THF - тетрагидрофуран ТСХ - тонкослойная хроматография Тц - тромбоциты
Уф-Вид - спектроскопия в ультрафиолетовой-видимой областях ЭПР - электронный парамагнитный резонанс ЯМР - ядерный магнитный резонанс АА - арахидоновая кислота Ас - ацетил
ACS - American Chemical Society AC, AdC - аденилатциклаза ADP - аденозиндифосфат ADP-аза - аденозиндифосфатаза
Aliquat 336 - триоктил-(тридецил)бензиламмоний хлорид ATP - аденозинтрифосфат Bn - бензил
BOC - трет-бутилоксикарбонил
BRET - резонансный перенос энергии биолюминесценции Burgess соль - метил М-(триэтиламмониосульфонил)карбамат СаМ - кальмодулин
(с-)АМР - (циклический) аденозинмонофосфат CAN - Ceric ammonium nitrate CAS - Chemical Abstracts Service CAT -хлорамин-Т
cGMP - циклический гуанозин-3 ',5-монофосфат cod - циклоокта-1,5-диен СОХ - циклооксигеназа;
Ср* - пентакис-метилциклопентадиен
DABCO - 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан
DAG - 1,2-диацилглицерин
DAST - диэтиламиносульфотрифторид
DDQ - Dichlorodicyanoquinone
DIB - PhI(OAc)2
DIEA, DIPEA -диизопропилэтиламин DME - 1,2-диметоксиэтан
DMTMM - 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиний хлорид DTS - плотная трубчатая система EPI - адреналин (эпинефрин)
Fg - фибриноген;
FMO Frontier molecular orbital
FRET резонансный перенос энергии флуоресценции
G-белки - GTP- связывающие регуляторные белки, в том числе GA, G„ Gs, Gp, Gp(Gq)
GDP - гуанозиндифосфат
GPCR(s) - рецептор(ы), связанный(е) с G-белком
GP - гликопротеин

GTP - гуанозинтрифосфат
HETE - гидроксиэйкозатетраеновая кислота
ННТ - 12-гидрокси-(52, 8Е,10Е)-гептадекатриеновая кислота
HOMO - высшая занятая молекулярная орбиталь
НРЕТЕ - гидропероксиэйкозатетраеновая кислота
ЮОС -Intramolecular oxime-olefm cycloaddition
INOC -Intramolecular nitrile oxide cycloaddition
ITP, IP3 - инозит-1,4,5-трифосфат
LCMS - тандемная система ЖХ-масс-спектрометрия
LT - лейкотриены
LUMO - низшая свободная молекулярная орбиталь
МАРК - митоген-активированная протеинкиназа
MDA - малоновый диальдегид
MIF - Macrophage migration inhibitory factor
MLCK - киназа легких цепей миозина
MPase - миозин-фосфатаза
NaAsc - натриевая соль аскорбиновой кислоты
NBS - JV-бромсукцинимид
NCS - А-хлорсукципимид
PAF - фактор активации тромбоцитов
РА1 - ингибитор активации плазминогена
PC - фосфатидилхолин;
PDGF - митогенный фактор (фактор роста, производимый тромбоцитами)
PG(s) - простагландин(ы), в том числе серий D, Е, G, Н, I: PGD2, PGEi, PGG2, PGH2, PGI2 (простациклин;
PI - фосфатидилинозит
PI3K - фосфатидилинозит-3-киназа
Р1Р5К - фосфатидшшнозит-4-фосфат-5-киназа
PIFA - PhI(OCOCF3)2
PIP2 - фосфатидилинозитдифосфат
РІРз - фосфатидилинозиттрифосфат
РКС - протеинкиназа С
PLA2 - фосфолипаза А2
PLC - фосфолипаза С
РРР - бестромбоцитарная плазма крови человека
PRP - обогащенная тромбоцитами плазма крови человека
Ру - пиридин
ROS - активные формы кислорода
R,R-DBFOX/Ph+ NiX2'6H20 - ,,N,
I 200»

SCCO2 - суперкритическая СОг
SPAAC - strain-promoted alkyne-azide cycloadditions
SPANOC - strain-promoted alkyne-nitrile oxide cycloadditions
SPS, SPOS - твердофазный органический синтез
Tf20 - ангидрид трифторметансульфокислоты
Ts - Tosyl
и-TsOH - и-толуолсульфокислота ТхАг - тромбоксан А2 ТхВг - тромбоксан В2 TxS - тромбоксансинтетаза vWF - фактор Виллебранда
гидролизует фосфатидилинозит-4,5-дифосфат (Р1Рг) в инозит-1,4,5-трифосфат (1Р3) и 1,2-диацилглицерин (DAG), приводя к мобилизации Са2+внутри клетки и последующей активации РКС, а ЕР1 опосредованно открывает ионный канал для поступления Са2+
Рис. 1.5. Передача сигнала простаноидными рецепторами: А - сопряженными с И,-белками; В -сопряженными с Сч-белками; В - сопряженными с Сделками [24]. Преобладающее сопряжение субъединиц выделено более толстыми стрелками.
Установлено, что Р-рецепторы часто взаимодействуют с несколькими G-белками, активируя несколько сигнальных путей. Например, ЕР4, помимо сопряжения с Gj-белком, может опосредованно вызывать разнообразные эффекты, независимые от Gs-белков: активацию Р13-К, инициируя фосфорилирование при помощи ERK, индукцию EGF-1; а также взаимодействовать с 0,-белком, подавляющим с-АМР-зависимые сигналы и активирующим Р13-К/ЕЯК-зависимый сигнал (рис. 1.5 А). IP может взаимодействовать с G,- и Gq-белками в зависимости от типа клеток. FP может сопрягаться с Giz/13-белком, активирующим G-белок Rho, а ТР может взаимодействовать с наибольшим дополнительным набором G-белков - G„ Gs, Gn, G12/13 и CjJ5/I6 (см. рис. 1.5 Б). Было также обнаружено, что GPCRs, сопряженные с О/в-белками, обычно взаимодействуют с Gq/ц-белком, а иногда и с белками Gi-типа. ЕРЗ, имеющий достаточно большое количество изоформ, может дополнительно