Пробоподготовка QuEChERS и дисперсионная жидкостно-жидкостная микроэкстракция при одновременном определении микотоксинов различных классов хроматографическими методами

• Автор: Авдеева, Надежда Михайловна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Владимир
• Количество страниц: 140 с. : ил.

Список сокращений
ТТМ---------------------------------------- Трихотеценовые микотоксины
ДОН------------------------------------------ Дезоксиниваленол
ЗАДОН-------------------------------------- 3-ацетилдезоксиниваленол
15АДОН------------------------------------ 15-ацетилдезоксиниваленол
НВЛ------------------------------------------ Ниваленол
ФЗХ------------------------------------------ Фузаренон X
ДАС------------------------------------------ Диацетоксискирпенол
НСЛ — Неосоланиол
ЗОН------------------------------------------ Зеараленон
ТФА --- Трифторуксусный ангидрид
ТФУК ---Трифторуксусная кислота
ГФМА —- Гептафтормасляный ангидрид
ПФПА---------------------------------------- Пентафторпропионовый ангидрид
ГХ-------------------------------------------- Газовая хроматография
ВЭЖХ---------------------------------------- Высокоэффективная жидкостная хроматография
СВЭЖХ-------------------------------------- Сверхскоростная высокоэффективная жидкостная
хроматография
ДМД --- Диодно-матричный детектор
ФЛД --- Флуориметрический детектор
ДЭЗ --- Детектор электронного захвата
пид --- Пламенно - ионизационный детектор
МС --- Масс-спектрометрическое детектирование
НЖФ --- Неподвижная жидкая фаза
ПФ --- Подвижная фаза
ТФМЭ --- Твердофазная микроэкстракция
ЖЖЭ --- Жидкостно-жидкостная экстракция
ДЖЖМЭ --- Дисперсионная жидкостно-жидкостная
микроэкстракция
СТФЭ --- Сверхскоростная твердофазная экстракция
ТФЭ --- Твердофазная экстракция
МДУ Максимально-допустимый уровень
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКОТОКСИНОВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Краткая характеристика микотоксинов
1.2. Способы пробоподготовки при определении микотоксинов
1.3. Хроматографические методы определения микотоксинов различных классов
1.4. Способы одновременного определения микотоксинов
1.5. Возможные трудности при определении микотоксинов
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ)
2.1. Реактивы и материалы
2.2. Аппаратура
2.3. Вспомогательное оборудование
2.4. Методики извлечения двадцати микотоксинов различных классов из одной навески образцов зерна, кормов и продуктов питания
2.5. Хроматографическое разделение и определение микотоксинов..
ГЛАВА 3. ВЫБОР УСЛОВИЙ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ КЛАССОВ МИКОТОКСИНОВ
3.1. Условия разделения афлатоксинов, охратоксинов, патулина
и зеараленона
3.2. Условия разделения трихотеценовых микотоксинов
3.3. Резюме к главе
ГЛАВА 4. ПРОБОПОДГОТОВКА ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ МИКОТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ, КОРМАХ И ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ
4.1 .Выбор условий ОиЕСЬЕКЗ для одновременного извлечения микотоксинов
из одной навески
4.2. Выбор условий ДЖЖМЭ для извлечения микотоксинов

Количественное определение достигается путем специального мониторинга множественных фрагментов ионов в течение времени хроматографического элюирования. Важным является еще то, что ЖХ-МС метод дает возможность работать непосредственно с неочищенными экстрактами, что значительно ускоряет анализ. Данный способ позволяет количественно определить одновременно несколько микотоксинов, независимо от их химической структуры или биологической активности.
ВЭЖХ и СВЭЖХ в сочетании с различным масс-спектрометрическим оборудованием является хорошим вариантом для одновременного определения. Тройная квадрупольная тандемная масс-спектрометрия в настоящее время считается «золотым стандартом», хотя многие лаборатории, занимающиеся данным вопросом, отмечают преимущества и других анализаторов масс. Данные способы определения характеризуются высокой чувствительностью и быстротой. Даже при плохом хроматографическом разделении они позволяют достаточно точно идентифицировать искомое соединение. Так, одновременное определение микотоксинов, продуцируемых грибами Fusarium стало возможно с помощью данного способа [67, 99, 118-123]. Совместно с трихотеценовыми разного вида определяют также ЗОН и его производные. Для извлечения токсинов применяют ацетонитрил с каким-либо растворителем: вода или гексан, чаще всего. Очистку проводят на картриджах или колонках с сорбентами. Пределы обнаружения находятся в диапазоне 0,8 - 10 нг/кг.
С помощью данного метода одновременно определяют также афлатоксины, патулин, охратоксины, ДОН, ЗОН, фумонизины, трихотеценовые микотоксины [82, 65 68-70, 72, 85, 124-129]. При пробоподготовке применяют ТФЭ, в качестве растворителей используют, в основном, смесь ацетонитрила и воды или метанол с добавлением буферного раствора (муравьиная кислота, фосфаты), для очистки применяют колонки с определенным сорбентом. В качестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрила, уксусной кислоты, ацетата аммония, а при градиентном элюировании добавляется еще метанол. Пределы обнаружения в разных способах определения отличаются: в кукурузе