Роль парамагнитных интермедиатов в ферментативном окислении пероксидазой хрена

• Автор: Афанасьева, Мария Сергеевна
• Шифр специальности: 01.04.17
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 131 с. : ил.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Введение

1.2 Структуры основных парамагнитных интермедиатов пероксидазы хрена

1.3 Окисление изобутиральдегида пероксидазой хрена в условиях инициирования перекисью водорода/надкислотами
1.4 Окисление НАДН, катализируемое пероксидазой хрена в отсутствии перекиси водорода
1.5 Процесс окисления НАДН пероксидазой хрена в колебательной пероксидазно-оксидазной реакции
1.6 Свободные радикалы в биологических системах. Применение методов спиновой химии для исследования ферментативных процессов
1.7 Исследование влияния магнитного поля на процесс окисления 2-метил-1-(триметилсилилокси)проп-1-ена пероксидазой хрена
1.8 Исследование влияния магнитного поля на процесс окисления НАДН пероксидазой хрена в колебательной пероксидазно-оксидазной реакции

1.9 Теория магнитных и спиновых эффектов в ферментативных многоспиновых системах

ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1 Методы исследования
2.1.1 Установка остановленной струи для исследования кинетики быстрых ферментативных процессов
2.1.2 Установка для регистрации эффектов химической поляризации ядер с временным разрешением
2.1.3 pH- и спектрофотометрия
2.1.4 Спектрофлуориметрия
2.2 Методика приготовления образцов
2.2.1 Магнитный эффект в реакции окисления НАДН, катализируемой
пероксидазой хрена
2.2.2 Магнитный эффект в реакции окисления нифедипина, катализируемой пероксидазой хрена
2.2.3 Исследование фотоокисления НАДН, катализируемого
пероксидазой хрена, методом ХПЯ
2.2.4 Исследование кинетики окисления НАДН в различных средах
2.2.5 Спектрофлуориметрическое исследование образования перекиси водорода при окислении НАДН в различных средах
2.2.6 Зависимость скорости окисления НАДН, катализируемого пероксидазой хрена, от концентрации субстрата
2.2.7 Исследование акта одноэлектронного переноса и образования ферропероксидазы в реакции между НАДН и пероксидазой хрена в бескислородной среде
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ЭЛЕМЕНТАРНЫХ СТАДИЙ КАТАЛИТИЧЕСКОГО ЦИКЛА ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА КИНЕТИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
3.1 Введение
3.2 Автоокисление НАДН при различных pH и флуориметрическое определение образующейся перекиси водорода
3.3 Зависимость скорости окисления НАДН, катализируемого пероксидазой хрена, от концентрации субстрата и оценка константы Михаэлиса
3.4 Исследование стадии одноэлектронного переноса между пероксидазой хрена и НАДН в бескислородной среде
3.5 Анализ кинетической кривой окисления НАДН, катализируемого пероксидазой хрена
3.6 Заключение
ГЛАВА 4. МЕТОДЫ СПИНОВОЙ ХИМИИ КАК ИНСТРУМЕНТ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭЛЕМЕНТАРНЫХ СТАДИЙ
КАТАЛИТИЧЕСКОГО ЦИКЛА ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА
4.1 Введение
4.2 Исследование фотоокисления НАДН, катализируемого пероксидазой хрена, методом химической поляризации ядер
4.2.1 Эффекты ХПЯ *Н, зарегистрированные в процессе фотоокисления НАДН, катализируемого пероксидазой хрена
4.2.2 Теоретическое описание наблюдаемого эффекта ХПЯ
4.3 Магнитные эффекты в процессе окисления НАДН пероксидазой хрена
4.3.1 Ферментативное окисление НАДН, катализируемое пероксидазой хрена
4.3.2 Теоретические расчеты наблюдаемого магнитного эффекта в процессе ферментативного окисления НАДН пероксидазой хрена
4.4 Магнитные эффекты в процессе ферментативного окисления синтетического аналога НАДН, нифедипина
4.5 Заключение
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

стадии инициирования каталитического цикла пероксидазы хрена анализируются эффекты химической поляризации ядер в акте фотоиндуцированного одноэлектронного переноса на начальной стадии процесса, а также исследуются спектроскопические характеристики промежуточных частиц в условиях остановки каталитического цикла. Для получения выводов о структуре и спиновых состояниях парамагнитных интермедиатов следует провести моделирование экспериментальных магнитных эффектов и эффектов химической поляризации ядер в рамках описания многоспиновых ферментативных систем на основе теории радикальных пар.