Фармакогностическое изучение семян чернушки дамасской (Nigella damascena L.), выращенной в условиях Ставропольского края

• Автор: Маширова, Светлана Юрьевна
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 177 с. : 13 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. БОТАНИЧЕСКАЯ, ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ И

МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЧЕРНУШКИ ДАМАССКОЙ

1.1 Характеристика рода Чернушка (NigeПa)

1.2 Химический состав

1.3 Применение чернушки в традиционной и научной медицине

1.4 Культивирование и агротехника чернушки дамасской

Заключение по главе

ГЛАВА 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объекты исследования
2.2 Методы исследования углеводов
2.2.1 Свободные моносахариды
2.2.2 Олиго- и полисахариды
2.2.3 Выделение полисахаридов из растительного сырья
2.2.4 Кислотный гидролиз
2.2.5 Хроматографический анализ углеводов
2.2.6 Газожидкостная хроматография (ГЖХ)
2.2.7 Спектрометрия в инфракрасной области
2.2.8 Количественное определение галактуронидов
2.2.9 Определение физико-химических характеристик пектинов
2.3 Методы исследования липидов
2.3.1 Выделение липидов из растительного сырья
2.3.2 Определение физико-химических показателей жирного масла
2.3.3 Газожидкостная хроматография (ГЖХ)
2.3.4 Газожидкостная хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС)
2.4 Методы исследования белков, пептидов, аминокислот
2.4.1 Качественное обнаружение аминокислот
2.4.2 Выделение и очистка пептидного комплекса
2.4.3 Выделение аминокислот и определение
аминокислотного состава
2.4.4 Исследование пептидов методом электрофореза
2.4.5 Исследование пептидов методом ВЭЖХ
2.5 Методы исследования эфирных масел

2.5.1 Газожидкостная хроматография (ГЖХ)
2.6 Методы исследования ферментной активности
2.6.1 Определение липолитической активности
2.6.2 Определение протеолитической активности
2.7 Методы исследования макро- и микроэлементного состава
2.8 Общие методики стандартизации сырья
2.8.1 Методы отбора проб для анализа
2.8.2 Морфолого-анатомические исследования
2.8.3 Определение числовых показателей качества сырья
2.8.4 Определение микробиологической чистоты сырья
2.8.5 Определение содержания радионуклидов
2.8.6 Определение сроков хранения сырья
2.8.7 Статистическая обработка данных
2.8.8 Валидация методик количественного определения
2.9 Методы токсико-фармакологических исследований
2.9.1 Исследование «острой» токсичности
2.9.2 Изучение антибактериальной активности
2.9.3 Изучение ранозаживляющей активности
2.9.4 Изучение гиполипидемической активности
2.9.5 Изучение гепатозащитной активности
2.9.6 Изучение желчегонной активности
2.9.7 Изучение диуретической активности
2.9.8 Оценка биохимического профиля сыворотки крови
лабораторных животных
2.9.9 Определение биохимических показателей в гомогенате печени лабораторных животных
ГЛАВА 3. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ СЕМЯН ЧЕРНУШКИ ДАМАССКОЙ
3.1 Морфологическая характеристика семян чернушки дамасской
3.2 Анатомическая характеристика семян чернушки дамасской
выводы по главе
ГЛАВА 4. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
4.1 Исследование углеводов
4.1.1 Выделение полисахаридов

4.1.2 Изучение химического состава углеводных фракций
4.1.2.1 Групповые качественные реакции на углеводы
4.1.2.2 Изучение мономерного состава углеводных фракций методом хроматографии на бумаге
4.1.2.3 Изучение мономерного состава углеводных фракций методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ)
4.1.2.4 Изучение углеводных фракций методом ИК-спектроскопии
4.1.2.5 Изучение физико-химических характеристик пектинов
4.2 Исследование липидов
4.2.1 Выделение липидов
4.2.2 Определение физико-химических показателей жирного масла
4.2.3 Определение жирнокислотного состава
4.2.4 Определение компонентного состава жирного масла
4.2.5 Хроматографическое изучение липидов
4.3 Белки, пептиды, аминокислоты
4.3.1 Качественное обнаружение аминокислот
4.3.2 Количественное определение белка и пептидов
4.3.3 Определение аминокислот методом жидкостной хроматографии на аминокислотном анализаторе
4.3.4 Электрофоретический анализ пептидов
4.3.5 Изучение пептидов методом ВЭЖХ
4.4. Эфирные масла
4.4.1 Определение содержания эфирного масла
4.4.2 Определение подлинности эфирного масла
4.4.3 Изучение эфирного масла методом ГЖХ
4.4.4 Изучение эфирного масла методом ВЭЖХ
4.5 Ферменты
4.5.1 Определение липолитической активности
4.5.2 Определение протеолитической активности
4.5.3 Выделение фермента липазы
4.6 Разработка методики подлинности семян чернушки дамасской
4.7 Макро- и микроэлементный состав, тяжелые металлы, радионуклиды
4.7.1 Определение макро-и микроэлементного состава
4.7.2 Определение содержания тяжелых металлов

достигала уровня 10 мм до конца геля. По окончании электрофореза пептиды в геле фиксировали в течение 30 минут в 0,01 моль/л растворе натрия гидроксида, содержащем 4 % формальдегида, либо в 10 % растворе трихлоруксусной кислоты. Фиксированные белки в геле окрашивали Кумасси R-250. Избыток красителя с геля удаляли многократной промывкой 7 % раствором уксусной кислоты, содержащей 2 % формалина.
2.4.5 Исследование пептидов методом ВЭЖХ
Анализ проводили в соответствии с ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография» (ВЭЖХ) ГФ XII изд. [24].
Эксклюзионная хроматография: проводилась на приборе Agilent Technologist 1100 серии с использованием дегазатора G 1322А, насоса для подачи растворителей 1311 А, автосамплера G 1313А, термостата колонки G1316A и диодноматричного детектора DAD G1315B, стальной колонки Zorbax GF-250 4,6x250 мм с размером частиц сорбента 4 мкм; предколонки Zorbax dial 4,6x12,5 мм с размером частиц сорбента 5 мкм. Подвижная фаза: 0,1 моль/л натрий фосфатный буфер pH 7, содержащий 0,1 моль/л раствор натрия хлорида. Образцы глиадина и глю-тенина перед анализом также разводили в рабочем буфере. Использовали скорость потока 0,25 мл/мин, термостатирование при температуре 28° С и детектирование пиков при длине волны 210 нм.
2.5 Методы исследования эфирных масел
2.5.1 Газожидкостная хроматография (ГЖХ)
Компонентный состав эфирного масла чернушки дамасской исследовали методом газожидкостной хроматографии на газовом хроматографе «Цвет-500» с пламенно-ионизационным детектором. Пробу эфирного масла объёмом 0,1 мкл с помощью микрошприца вводили в испаритель хроматографа и хроматографировали при следующих условиях: колонка длиной 2,0 м с внутренним диаметром 0,3 см, заполненная сорбентом 10 % Реоплекс 400 на инертоне Super, температурное программирование колонки: от 60 (5 минут) до 190°С (10 минут) со скоростью на-