Методологические основы комплексного исследования полифенольных веществ и тест-соединений природного и синтетического происхождения

• Автор: Писарев, Дмитрий Иванович
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Курск
• Количество страниц: 285 с. : 57 ил.

СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ

БАВ биологически активные вещества

БАДы биологически активные добавки

БХ бумажная хроматография

ГЖХ газожидкостная хроматография

ГОСТ государственный стандарт

ГФ государственная фармакопея

ИК инфракрасная

ЛРС лекарственное растительное сырьё

МАЛДИ или активированная матрицей лазерная десорбционная иониза-

MALDI/TOF/MS ция или matrix-assisted laser desorption/ionization
ОФ ВЭЖХ обращенно-фазная высокоэффективная жидкостная хроматография
ОФС общая фармакопейная статья
СО стандартный образец
ТАГ триацилглицериды
тех тонкослойная хроматография
УФ ультрафиолетовая
ФС фармакопейная статья
ЯМР ядерный магнитный резонанс
АРСІ химическая ионизация при атмосферном давлении
АРРІ фотоионизация при атмосферном давлении
СІ химическая ионизация
ЕІ электронная ионизация
ESI электроспрейная ионизация

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Обзор классических и современных методов масс-спектрометрии
1.2. Современное состояние исследований в области химического анализа некоторых групп биологически активных соединений природного происхождения
1.2.1. 7р<янс-резвератрол - методы выделения и анализа
1.2.2. Методы выделения и анализа флавоноидов
1.2.3. Карнозин: выделение и анализ
1.2.4. Липиды - методы анализа
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Выбор объектов и методов исследования
2.2. Объекты исследования
2.3. Методы исследования
2.3.1. Методы микроскопического анализа
2.3.2. Методы выделения и препаративного разделения БАВ
2.3.2.1. Выделение полифенольных комплексов из растительных объектов
2.3.2.2. Выделение антоцианов
2.3.2.3. Выделение и препаративное разделение флавоноидов
2.3.2.4. Выделение каротиноидов
2.3.2.5. Выделение триацилглицеридов (ТАГ)
2.3.2.6. Выделение жирных кислот
2.4. Методы идентификации и количественного определения БАВ
2.4.1. Реакции идентификации БАВ
2.4.1.1. Реакции идентификации трянс-резвератрола
2.4.1.2. Реакции идентификации карнозина
2.4.2. Хроматограф ические методы

2.4.2.1. Бумажная хроматография
2.4.2.2. Тонкослойная хроматография
2.4.2.3. Газожидкостная хроматография
2.4.2.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография
2.4.3. Спектроскопические методы
2.4.3.1. Спектроскопия в ультрафиолетовой и видимой областях
2.4.3.2. Спектроскопия в инфракрасной области
2.4.3.3. Масс-спектроскопия
2.4.4. Титриметрические методы анализа
Выводы по главе
ГЛАВА 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕСТ-ПРЕПАРАТОВ ПРИРОДНОГО
И СИНТЕТИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ, И МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ В СРАВНЕНИИ С ДРУГИМИ МЕТОДАМИ АНАЛИЗА
3.1. Обоснование выбора метода МАЮЕТОЕ/МБ
3.2. Разработка методов идентификации транс-резвератрола
3.2.1. Микрокристаллоскопические признаки субстанции транс-резвератрола
3.2.2. Использование химических реакций для идентификации транс-резвератрола
3.2.3. Использование ТСХ для идентификации транс-резвератрола
3.2.4. Использование УФ-спектроскопии для идентификации транс-резвератрола
3.2.5. Использование ИК-спектроскопии для идентификации транс-резвератрола
3.2.6. Использование ОФ ВЭЖХ для идентификации транс-резвератрола
3.2.7. Использование МА7.В1/ТОЕ/МБ для идентификации транс-резвератрола
3.2.8. Определение транс-резвератрола в объектах растительного

В работе [153], показано, что флавоноиды сами могут выступать в качестве матричных агентов при MALDI/TOF/MS анализе.
Методом MALDI/TOF/MS без использования матрицы изучен состав фитоалексинов на поверхности листьев виноградной лозы. Применены две длины волны лазерной ионизации - 266 и 337 нм. Установлено, что при длине волны лазера 266 нм увеличивалось пространственное разрешение, и улучшалась чувствительность для обнаружения целевых метаболитов транс-резвератрола и родственных ему соединений [188].
MALDI/TOF/MS был использован для характеристики полигаллоиль-ных полифлаван-Золов в экстрактах семян винограда. Массы соответствующих полифлаван-3-олов наблюдались в рефлектронном и линейном режимах положительных ионов. Результаты показывают, что MALDI/TOF/MS может определить сложные смеси олигомерных полифлаван-Золов [284].
В работе [311] изучены антоцианы в вине и соках. Было установлено, что хорошей матрицей для анализа антоцианов является 2,4,6-тригидроксиацетофенон.
MALDI/TOF/MS был применён для мониторинга низкомолекулярных соединений в образцах вин. Определено восемь фенолокислот (4-кумаровая, 4-гидроксибензойная, кофейная, феруловая, галловая, протокатеховая, сиреневая, ванилиновая), чувствительность составила от 0,12-0,87 пикомоль, а также транс-резвератрол (чувствительность 0,02 пикомоль). Результаты, полученные на MALDI/TOF/MS, подтверждены ВЭЖХ [256].
Весьма трудным объектом качественного и количественного анализа являются проантоцианидины из-за их структурного разнообразия и сложности. Масс-спектрометрия позволила успешно охарактеризовать проантоцианидины. MALDI/TOF/MS очень хорошо подходит для анализа гетерогенных проантоцианидинов [249].
Тандемной масс-спектрометрией возможно дифференцировать изомеры С-гликозидов флавоноидов. Различия между 6-С и 8-С флавоноидными