Фармакогностическое исследование хвоща лесного как перспективного источника биологически активных соединений

• Автор: Бондарчук, Руслан Анатольевич
• Шифр специальности: 14.04.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Самара
• Количество страниц: 132 с. : 9 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ХВОЩА ЛЕСНОГО В МЕДИЦИНСКОЙ ПРАКТИКЕ

1Л .Систематическая и эколого-географическая характеристика хвоща лесного

1.2. Степень изученности химического состава

1.3. Сведения об изученности биологической активности хвоща лесного и перспективы его применения в медицине

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика объекта исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Получение суммарных комплексов и фракций

2.2.2. Методы химического хроматографического и спектрального исследования биологически активных веществ
2.2.3. Методы морфологического, микроскопического и товароведческого исследования
2.3. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ХВОЩА ЛЕСНОГО
3.1. Выделение фенольных соединений и установление структуры индивидуальных веществ
3.2. Исследование фенольных соединений методом высокоэффективной жидкостной хромато-масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС)

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ЭЛЕМЕНТНОГО СОСТАВА ХВОЩА 65 ЛЕСНОГО КАК ПОКАЗАТЕЛЯ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ЧИСТОТЫ СЫРЬЯ
ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК СТАНДАРТИЗАЦИИ ТРАВЫ ХВОЩА ЛЕСНОГО
5.1 Разработка методики качественного обнаружения фенольных 74 соединений
5.2. Разработка методики количественного определения
фенолокислот
5.3 Валидация методики количественного определения
фенолокислот
5.4. Разработка методики количественного определения
флавоноидов
5.5. Валидация методики количественного определения
флавоноидов
5.6. Изучение динамики накопления фенольных соединений
5.7. Разработка товароведческих показателей сырья
5.8. Изучение морфологических и анатомических признаков
травы хвоща лесного
5.9. Определение микробиологической чистоты
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
Приложение А. Проект ФС «Хвоща лесного трава»
Приложение Б. «Инструкция по сбору и сушке травы хвоща лесного»
Акты внедрения

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность. Несмотря на значительные достижения в области создания синтетических лекарственных средств интерес к лекарственным растениям и препаратам растительного происхождения не ослабевает. Растения продолжают оставаться важным источником получения лекарственных препаратов. В связи с этим изыскание новых объектов и видов лекарственного растительного сырья, их внедрение в медицинскую практику остается важной задачей современной фармакогнозии.
К числу перспективных объектов исследования относится род хвощ Equisetum L. - единственный ныне живущий представитель древнейшего отдела хвощевидные, виды которого очень широко распространены на Земле, произрастая в разнообразных растительных зонах и сообществах. Большинство видов хвоща имеют значительные сырьевые запасы. При этом из всего рода хвощ только один вид - хвощ полевой (Equisetum arvense L.) пользовался повышенным вниманием исследователей из разных стран (Nacamura H., 1940; Saleh A.M., 1972; Сырчина А.И., 1981; Решетникова М.Д., 1993; М.Veit, 1995). Вероятно, это объясняет и тот факт, что только данный вид хвоща до сих пор является официнальным лекарственным растением, как в отечественной, так и зарубежной медицине.
Перспективность некоторых видов рода хвощ была показана в исследованиях, выполненных на кафедре фармакогнозии с курсами ботаники и экологии Сибирского государственного медицинского универститета. Предложенная Н.Э.Коломиец методология поиска перспективных видов хвоща, основанная на изучении данных литературы по систематике рода хвощ, их ареалу, сырьевым запасам, оценке фармакологической эффективности биологически активных комплексов по различным тестам, сравнительном исследовании основных групп биологически активных веществ, позволила выделить наиболее перспективные для дальнейшего исследования виды хвоща, к которым относится, прежде всего, хвощ лесной. Результаты сравнительного экспериментального изучения

Полученное водно-этанольное извлечение фильтровали в горячем виде. Из извлечения под вакуумом удаляли экстрагент (этиловый спирт) до водного остатка. Осадки липофильных веществ отфильтровывали. Полученные фильтраты в определенной последовательности в делительных воронках обрабатывали хлороформом (фр. 1), этилацетатом (фр. 2) и насыщенным водой н-бутанолом (фр. 3). Из полученных фракций под вакуумом удаляли органические растворители (этилацетат, хлороформ и н-бутанол), полученные остатки далее использовали для выделения фенольных соединений.
Выделение индивидуальных соединений из полученных фракций проводили общепринятыми классическими методами. К ним относятся метод избирательной экстракции, метод адсорбционной и колоночной хроматографии на полиамиде и силикагеле, в сочетании с бумажной и тонкослойной хроматографией. Индивидуальность веществ доказывали с помощью методов хроматографии (двумерная хроматография на бумаге и хроматография в тонком слое сорбента).
Выделенные индивидуальные соединения идентифицировали по физико-химическим свойствам таким как: температура плавления, отсутствие депрессии температуры плавления пробы смешения с аутентичными веществами, результатам хроматографического исследования и гидролиза, электронным спектрам, данным ИК, Я
МР- и ВЭЖХ-МС-спектроскопии. Для идентификации фенолкарбоновых кислот и флавоноидов были использованы аутентичные (известные) образцы производства Sigma-Aldrich и Р1ика (гл.2.2.2).
При анализе полученных данных и выборе предполагаемой структуры выделенных веществ были использованы отечественные и зарубежные базы данных по спектральным и физико-химическим характеристикам природных соединений, а также монографии и статьи [8-10,17,24,30,39,66,84,85,90,97,98,101,104,106,11-113,115,119, 122-130,134].
В результате проведенного нами исследования выделено и