Функциональные характеристики эндотелиальных клеток в условиях in vitro в присутствии факторов, секретируемых плацентой при физиологической беременности и беременности, осложненной гестозом

• Автор: Степанова, Ольга Игоревна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 181 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Особенности формирования плаценты при физиологической беременности

1.1.1 Этапы развития плаценты

1.1.2 Роль цитокинов, секретируемых клетками плаценты, в ее развитии

1.1.3 Роль лимфоцитов и моноцитов/макрофагов в развитии плаценты

1.2 Нарушение формирования плаценты при гестозе

1.3 Методы коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных с гестозом 37 Глава 2 Материалы и методы

2.1 Культивирование плаценты с целью получения секреторных продуктов плаценты

2.2 Измерение содержания биологически активных факторов в сыворотке периферической крови и кондиционированных средах, полученных после культивирования плаценты
2.3 Культуры клеток
2.4 Оценка влияния секретируемых плацентой факторов на экспрессию поверхностных молекул эндотелиальными клетками линии EA.hy926
2.5 Оценка влияния продуцируемых плацентой факторов на секрецию цитокинов эндотелиальными клетками линии EA.hy926
2.6 Оценка изменения количества эндотелиальных клеток линии EA.hy926 в присутствии секретируемых плацентой факторов
2.7 Оценка влияния секретируемых плацентой факторов на миграционную активность эндотелиальных клеток линии EA.hy926
2.8 Оценка функции адгезии моноцитоподобных клеток линии ТНР-1 к эндотелиальным клеткам линии EA.hy926 под влиянием факторов, секретируемых плацентой

2.9 Оценка трансэндотелиальной миграции моноцитоподобных клеток линии ТНР-1 через монослой эндотелиальных клеток линии ЕА.Ьу926 под влиянием факторов, секретируемых плацентой
2.10 Оценка влияния препарата на основе магния аспарагината на изменение количества эндотелиальных клеток линии ЕА.1гу926
2.10.1 Приготовление разведений препарата:
2.10.2 Определение минимальной токсической дозы препарата на основе магния аспарагината в отношении ЭК линии ЕА.Ну926
2.10.3 Оценка изменения количества клеток линии ЕА.Ну926 при их культивировании в присутствии препарата на основе магния аспарагината
2.11 Статистический анализ
Глава 3. Результаты исследования:
3.1 Секреция плацентой ангиогенных молекул
3.2 Секреция растворимых форм поверхностных молекул плацентой
3.3 Влияние факторов, секретируемых плацентой, на экспрессию поверхностных молекул эндотелиальными клетками линии ЕА.Ьу926
3.4 Влияние продуцируемых плацентой факторов на секрецию цитокинов эндотелиальными клетками линии ЕА.Ьу926
3.5 Влияние секретируемых плацентой факторов на изменение количества эндотелиальных клеток линии ЕА.Ьу926
3.6 Влияние секретируемых плацентой факторов на миграционную активность эндотелиальных клеток линии ЕА.Ьу926
3.7 Адгезия моноцитоподобных клеток линии ТНР-1 к эндотелиальным клеткам линии ЕА.Ьу926 под влиянием факторов, секретируемых плацентой
3.8 Активность трансэндотелиальной миграции моноцитоподобных клеток линии ТНР-1 через монослой эндотелиальных клеток линии ЕА.Ьу926 под влиянием факторов, секретируемых плацентой
3.9 Влияние препарата на основе магния аспарагината на количество эндотелиальных клеток линии ЕА.Ьу926, определяемое колориметрическим методом

Обсуждение
Выводы:
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Приложение А
Приложение Б
Приложение В
Приложение Г
Список литературы

том числе при гестозе, а также нарастание их концентрации при усугублении патологического процесса в основном связывают с эндотелиальной дисфункцией. Однако клетки плаценты и лимфоциты также могут вносить определенный вклад в накопление этих молекул в сыворотке крови беременной женщины, поскольку они также экспрессируют адгезионные молекулы. Клеточные формы молекул адгезии служат связующим звеном специфических этапов взаимодействия лейкоцитов и эндотелиальных клеток и вовлечены в патогенез гестоза. Эндотелиальная дисфункция характеризуется активацией ЭК. Активация ЭК сопровождается усилением экспрессии адгезионных молекул 1САМ-1, УСАМ-1, увеличением секреции хемокинов, например 1Ь-8, способствующих привлечению лейкоцитов, их дальнейшей адгезии и трансэндотелиальной миграции. Секреция 1Ь-8 и экспрессия 1САМ-1 при гестозе усиливается не только на ЭК, но и на гладкомышечных клетках сосудов матери, что стимулирует привлечение моннуклеаров и нейтрофилов [173]. При этом в плаценте наблюдается присутствие мононуклеарных инфильтратов с преобладанием лимфоцитов и инволютивно-дистрофические изменения в виде фибриноида в межворсинчатом пространстве и кальциноза ворсин и межворсинчатого пространства [3], что свидетельствует о развитии воспаления в плаценте. При этом механизмы рекрутирования клеток иммунной системы в плаценту и децидуальную оболочку, в том числе активность трансэндотелиальной миграции, изучены недостаточно.
При беременности, осложненной гестозом, в плаценте нарушается иммунологическая толерантность организма матери в отношении плода. Экспрессия молекулы РавЬ клетками трофобласта снижена, что приводит к снижению их защиты от цитотоксического действия СЭ8+ Т-лимфоцитов [249]. Также при гестозе снижается экспрессия молекулы локуса НЬА-О, защищающей клетки трофобласта от цитотоксического действия лейкоцитов матери [211]. Это приводит к подверженности трофобласта повреждению ИК-клетками и СЭ8+ Т-лимфоцитами матери, и снижению инвазивной способности трофобласта. Усиление экспрессии 1САМ-1 на клетках трофобласта при гестозе обеспечивает миграцию в плаценту лейкоцитов матери [44].