Изучение патогенетической значимости мутаций митохондриального генома в клетках крови при бессимптомном атеросклерозе у женщин

• Автор: Чичёва, Мария Михайловна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 172 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Актуальность проблемы

Цель исследования

Задачи исследования

Научная новизна

Практическая значимость

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Медико-социальная значимость атеросклероза

1.2. Патофизиология атеросклероза: общие сведения
1.2.1 .Общий план строения стенки здоровой артерии
1.2.2. Механизмы развития атеросклероза
1.3. Факторы риска развития атеросклероза
1.3.1 .Средовые факторы риска развития атеросклероза
1.3.1.1. Психологический стресс
1.3.1.2. Экологическая обстановка
1.3.2. Поведенческие факторы риска развития атеросклероза
1.3.2.1. Курение
1.3.2.2. Гиподинамия
1.3.2.3. Питание
1.3.3. Биохимические факторы риска развития атеросклероза
1.3.3.1. Ожирение
1.3.3.2. Сахарный диабет
1.3.3.3. Нарушения липидного обмена
1.3.3.4. Факторы, влияющие на липидный обмен
1.3.4. Независимые факторы риска развития атеросклероза
1.3.4.1. Пол

1.3.4.2. Возраст
1.3.5. Генетические факторы риска развития атеросклероза
1.3.5.1. Длина теломерных повторов
1.3.5.2. Мутации ядерного генома
1.4. Митохондриальные болезни: общие сведения
1.4.1. Симптомы, встречающиеся при митохондриальных цитопатиях
1.5. Характеристика мутаций митохондриального генома
1.5.1. Крупные структурные перестройки
1.5.2. Мутации, затрагивающие один или несколько нуклеотидов
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Материалы
2.1.1. Объект исследования
2.1.2. Исследуемые мутации митохондриального генома
2.2. Методы
2.2.1. Получение образцов сосудистой ткани
2.2.2. Выделение ДНК из образцов интимы аорты
2.2.3. Принцип проведения ультрасонографического исследования
2.2.4. Получение образцов крови
2.2.5. Выделение геномной ДНК из крови человека
2.2.6. Электрофорез
2.2.7. ПЦР (полимеразная цепная реакция)
2.2.8. Пиросеквенирование
2.2.8.1. Краткое описание метода
2.2.8.2. Приготовление проб
2.2.8.3. Используемое оборудование
2.2.9. Статистическая обработка данных
Глава 3. Результаты
3.1. Оптимизация способа расчёта степени гетероплазмии
3.2. Изучение вариабельности гетероплазмии митохондриального
генома в интиме аорты человека

3.3. Кроссекционное клиническое исследование
3.3.1. Цель проведения клинического исследования
3.3.2. Характеристика участников исследования
3.3.3. Обработка результатов ультрасонографической диагностики
бессимптомного атеросклероза
3.3.4. Изучение связи факторов риска сердечно-сосудистых
заболеваний с бессимптомным атеросклерозом
3.3.5. Степень гетероплазмии митохондриального генома и
бессимптомный атеросклероз
3.3.6. Изучение взаимосвязи гетероплазмии митохондриального генома
и факторов риска развития атеросклероза
Глава 4. Обсуждение
Заключение
Практические рекомендации
Выводы
Список литературы
Приложение

дикого типа и несущие мутации, которые могут нарушать нормальное функционирование органелл. За счет первых клетка будет нормально функционировать некоторое время. Если же количество дефектных копий митохондриального генома в органелле превысит определённый уровень, продукция энергии в ней может упасть ниже допустимого порога. Когда в клетке становится слишком много таких плохо справляющихся со своими функциями органелл, потребность в энергии нарастает, в результате чего происходит компенсаторная пролиферация всех митохондрий, включая дефектные. Это лишь приводит к эскалации проблемы. Естественно, при этом в худшем положении оказываются те ткани, которые потребляют наибольшее количество энергии - мышечная и нервная. Таким образом, если пациент несет смесь нормальных и мутантных молекул митохондриальной ДНК, долгое время мутация может вообще не иметь внешних проявлений. На практике это проявляется более или менее длительным бессимптомным периодом при многих митохондриальных цитопатиях. Однако, исходя из вышеописанного, очевидно, что рано или поздно наступает момент, когда дефектные формы накапливаются в количестве, достаточном для проявления патологических признаков. Возраст манифестации заболевания варьирует у разных больных. Раннее начало заболевания приводит к более тяжелому течению и неутешительному прогнозу.
1.4.1. Симптомы, встречающиеся при митохондриальных иитопатиях
Наиболее распространёнными симптомами, наблюдающимися при митохондриальных цитопатиях, являются:
- Для скелетных мышц: низкая толерантность к физической нагрузке, гипотония, проксимальная миопатия, включающая фациальные и фарингеальные мышцы, офтальмопарез, птоз;
Для сердца: нарушения сердечного ритма, гипертрофическая
кардиомиопатия;