Роль эозинофильной реакции крови в иммунопатогенезе туберкулеза легких

• Автор: Колобовникова, Юлия Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 283 с. : 6 ил.

Содержание

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Современные представления о туберкулезной инфекции

1.1.1. Эпидемиология, этиология и патогенез туберкулеза легких, характеристика основных клинических форм
1.1.2. Иммунопатогенез туберкулеза легких: дизрегуляторные взаимодействия клеток врожденного и адаптивного иммунитета

1.2. Современный взгляд на кинетику, структуру и функции эозинофильных

гранулоцитов

1.2.1 Гранулярный аппарат эозинофильных лейкоцитов

1.2.2. Рецепторный аппарат эозинофильных гранулоцитов
1.2.3. Основные функции эозинофильных гранулоцитов
1.3. Эозинофильная реакция крови: определение, классификация, механизмы развития
1.3.1. Цитокинопосредованные механизмы формирования эозинофилии крови
1.3.2. Структурные основы функционального полиморфизма генов эозинофил-активирующих цитокинов и их рецепторов
1.3.3. Связь аллельного полиморфизма генов цитокинов и их рецепторов с
формированием эозинофилии крови при заболеваниях
1.4. Значение эозинофильной реакции крови при патологии
1.4.1. Роль эозинофилии в патогенезе неинфекционных заболеваний
1.4.2. Роль эозинофилии в патогенезе заболеваний инфекционной природы
Глава 2. Материал и методы исследования
2.1. Общая характеристика клинического материала
2.2. Материал исследования
2.3. Методы исследования
2.3.1. Определение общего количества лейкоцитов в периферической крови
2.3.2. Подсчет лейкоцитарной формулы
2.3.3. Выделение и культивирование эозинофильных гранулоцитов периферической крови
2.3.4. Выделение и культивирование мононуклеарных лейкоцитов периферической крови
2.3.5. Определение содержания цитокинов в крови и супернатантах культуральных суспензий эозинофильных гранулоцитов и мононуклеарных лейкоцитов
2.3.6. Определение мембраносвязанных форм цитокиновых рецепторов на эозинофильных гранулоцитах крови
2.3.7. Выделение ДНК
2.3.8. Исследование аллельного полиморфизма генов цитокинов и их рецепторов
2.3.9. Определение количества CD9+ и CD18+ эозинофилов в периферической крови
2.3.10. Определение фагоцитарной активности эозинофильных гранулоцитов
2.3.11. Определение активности пероксидазы эозинофильных гранулоцитов
2.3.11.1. Определение белка микробиуретовым методом
2.3.12. Определение CD3+ и CD20+ лимфоцитов в периферической крови
2.3.13. Определение количества CD4+CD25+Foxp3+ и CD4+CD25‘FoxP3+ регуляторных Т-клеток в периферической крови
2.3.14. Определение концентрации суммарных антител к антигенам
Mycobacterium tuberculosis в крови
2.4. Статистический анализ результатов исследования
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Содержание IL-5 и CCL11 в крови у больных туберкулезом легких
3.2. Содержание IL-5RA- и CCR3-позитивных клеток в культуре эозинофилов крови in vitro у больных туберкулезом легких
3.3. Анализ распределения генотипов и аллельных вариантов генов цитокинов
и их рецепторов у больных туберкулезом легких
3.4. Связь аллельного полиморфизма генов с содержанием эозинофил

активирующих цитокинов в крови и IL-5RA- и CCR3-позитивных клеток в культуре эозинофилов крови in vitro у больных туберкулезом легких
3.5. Содержание CD9+ и CD18+ клеток в культуре эозинофилов крови in vitro у больных туберкулезом легких
3.6. Активность пероксидазы эозинофильных гранулоцитов у больных туберкулезом легких
3.7. Содержание фагоцитирующих клеток в культуре эозинофильных гранулоцитов in vitro у больных туберкулезом легких
3.8. Показатели in vitro секреции цитокинов эозинофильными гранулоцитами крови у больных туберкулезом легких
3.9. Показатели иммунного ответа у больных туберкулезом легких
3.9.1. Количественные показатели лейкоцитарного звена у больных туберкулезом легких
3.9.2. Содержание CD3+, CD20+ лимфоцитов и IFNy в крови у больных туберкулезом легких
3.9.3. Показатели in vitro секреции IL-2, IL-4, IL-10 и TGFß мононуклеарными лейкоцитами крови у больных туберкулезом легких
3.9.4. Содержание регуляторных Т-клеток, экспрессирующих Foxp3, в периферической крови у больных туберкулезом легких
3.9.5. Содержание противотуберкулезных антител в крови у больных туберкулезом легких
3.10. Клинико-рентгенологические показатели больных туберкулезом легких,
сопровождающимся эозинофилией
Глава 4. Обсуждение результатов исследования
Заключение
Выводы
Список литературы

появляются на стадии промиелоцита, они содержат лизофосфатазу, которая подвергается кристаллизации с образованием особых кристаллов Шарко-Лейдена [Гриншпун Г.Д., Виноградова Ю.Е., 1983; Джальчинова В.Б., Чистяков Г.М., 1999]. В цитоплазме эозинофильных лейкоцитов обнаруживаются также малые гранулы, включающие пероксидазу, кислую фосфатазу, арилсульфатазу В и др.; липидные тельца (около 5 на клетку), депонирующие все необходимое для синтеза эйкозаноидов: арахидоновую кислоту, липоксигеназу и циклоксигеназу [Dvorak А.М., Weller P.F., 2000]. Некоторые авторы указывают на присутствие в цитоплазме эозинофилов L-гранул, содержащих гистамин, различные микроэлементы, некоторые энзимы (антигиалуронидазу, оксидазы) и др. [Анаев Э.Х., 2002; Воробьев А.И., 2003].
Основным компонентом специфических гранул эозинофилов является главный щелочной (или основной) протеин (МБР - major basic protein) - белок с молекулярной массой 13,8 кДа, который экспрессируется в виде двух разных гомологов (МВР1 и МВР2). Данный белок проявляет тропность к анилиновым красителям, что позволяет идентифицировать специфические гранулы эозинофильных клеток (гранулы окрашиваются в оранжево-розовый цвет) [Hamann KJ. et al., 1991]. Эозинофильные гранулоциты содержат значительные количества главного щелочного белка. В эозинофилах морских свинок его содержание составляет примерно 250 пг на клетку, в эозинофилах человека - 5-10 пг на клетку [Popken-Harris Р. et al., 1998]. МВР1 обнаруживается также в гранулах базофилов, хотя и в меньших количествах. Следует отметить, что весь МБР, который депонируется в кристаллических гранулах эозинофилов, синтезируется на ранних стадиях эозинофилопоэза. Зрелые эозинофилы утрачивают способность воспроизводить mRNA, кодирующую главный щелочной белок [Plager D.A. et al., 2006]. Сравнительно недавно установлен факт возрастания концентрации МВР в сыворотке крови у беременных женщин (с пиком за 2-3 недели до родов) за счет, преимущественно, МВР1, который, по мнению исследователей, синтезируется клетками плаценты [Maddox D.E. et al., 2010]. В свою очередь, МВР2 экспрессируется исключительно эозинофилами и является более специфическим