Разработка модели TDP43-протеинопатии и ее использование для изучения механизма действия нейропротекторных препаратов

• Автор: Хританкова, Инна Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 101 с. : 21 ил.

Оглавление
Список сокращений
Введение
Г лава 1. Обзор литературы
1.1. Роль ДНК/РНК-связывающего белка ТОР-43 в патогенезе фронтотемпоральной дегенерации
1.2. Системы контролируемой деградации белков - потенциальные мишени для разработки патофизиологической терапии
1.3. Регуляторные механизмы аутофагии
1.4. Роль аутофагии в патофизиологии нейродегенеративных заболеваний
1.5. Разработка методов патофизиологической терапии НДЗ, основанной на фармакологической регуляции аутофагии
1.6. Димебон и его производные
Глава 2. Методы и материалы
2.1. Соединения
2.2 Клеточные культуры
2.3 Микроскопический и иммуно-цитохимический анализ
2.4 Методы, использованные для получения генетических конструкций.

2.5 Анализ белков
2.6 Анализ экспрессии генов
3 Результаты и обсуждение
3.1 Моделирование ТОР43 протеинопатии в культуре клеток нейробластомы человека
3.2. Влияние Димебона и его производных на прогрессию протеинопатии в клеточных культурах

3.3. Исследование молекулярно-клеточного механизма ингибирующего
действия Димебона
Заключение
Выводы
Список литературы
Список работ, опубликованных по теме диссертации

Список сокращений
АРР белок-предшественник (3-амилоида
DAPI 4,6-диамидино-2-фенилиндол дигидрохлорид
DAT мембранный транспортер дофамина
GAPDH глицеральдегид 3-фосфат-дегидрогеназа
GFAP глиальный фибриллярный кислый белок
GFP зеленый флуоресцентный белок (англ. green fluorescent protein)
mTOR англ. mammalian target of rapamycin
PBS фосфатный буфер
PLP протеолипидный белок
TDP43 transactivation-responsive DNA-binding protein
БА болезнь Альцгеймера
БАС боковой амиотрофический склероз
БДН болезни двигательного нейрона
БП болезнь Паркинсона
ГФКБ глиальный фибриллярный кислый белок
дт дикий тип
ИФАВРАН Учреждение Российской академии наук Институт физиологически активных веществ РАН
кДа килодальтон
МРТ митохондриальная проницаемость (от англ.- mitochondrial permeability transition)
MCA множественная системная атрофия
ндз нейродегенеративные заболевания
не нервная система
ПЦР полимеразная цепная реакция
цне Центральная нервная система
соді супероксиддисмутаза
тг тирозингидроксилаза
УПС убиквитин-протеасомная система
ФТД-У фронтотемпоральная дегенерация с убиквитин-положительными включениями
ФТЛД фронтотемпоральная дегенерация
хг хорея Гентингтона
ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота

деградации пред-сформированных белковых фибриллярных структур, в частности, аутофагосомной системы. С другой стороны, было показано, что Димебон способен влиять на клеточный метаболизм путём увеличения потребления глюкозы в мозге стареющих мышей [33] и повышать выживаемость клеточных культур при терминальной дифференцировке по нейрональному типу путём повышения митохондриальной активности [126]. Эти данные позволяют предполагать, что димебон может модулировать регуляцию клеточного ответа на внешние стрессы и при этом активировать компоненты внутринейронных систем контролируемой деградации аберрантных белковых форм. Сложность организации механизма аутофагии подразумевает, что воздействие на один из секторов реализующих ее метаболических путей может вызвать нежелательных эффект в другом их секторе. С одной стороны, подавление активности ЕЮС1/2 с помощью ингибитора РЭ98059 блокирует аутофагию, а с другой стороны, созревание аутофагосом может быть нарушено в результате чрезмерно продолжительной (более 24 часов) активации этих же самых киназ [31].