Внутриклеточные протеиназы в патогенезе и прогнозе злокачественных новообразований

• Автор: Спирина, Людмила Викторовна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 282 с. : 5 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Особенности патогенеза и прогноза злокачественных новообразований почки, мочевого пузыря, эндометрия, плоскоклеточных карцином головы и шеи

1.1.1. Рак почки, особенности патогенеза и прогноза

1.1.2. Рак мочевого пузыря, особенности патогенеза и прогноза

1.1.3. Рак эндометрия, особенности патогенеза и прогноза

1.1.4. Плоскоклеточные карциномы головы и шеи, особенности

патогенеза и прогноза

1.2. Внутриклеточные протеасомная и кальпаиновая протеолитические системы, их взаимосвязь
1.2.1. Протеасомная система
1.2.2. Кальпаиновая система
1.2.3. Взаимосвязь систем деградации белков в клетке
1.2.4. Роль протеасомной системы в молекулярном патогенезе
злокачественных новообразований
1.2.5. Роль кальпаинов в развитии злокачественных новообразований
1.3. Транскрипционные и ростовые факторы, их роль в развитии
злокачественных новообразований
1.3.1. Транскрипционный фактор ОТ-кВ, его роль в онкогенезе
1.3.2. Транскрипционный фактор НП7, его связь с развитием
онкологических заболеваний
1.3.3. Сосудистый эндотелиальный фактор роста (УЕОБ), его роль в патогенезе онкологических заболеваний
1.3.4. Система инсулиноподобных факторов роста и металлопротеиназа РАРР-А, их роль в патогенезе онкологических заболеваний

1.4. Регуляция содержания транскрипционных и ростовых факторов внутриклеточными протеиназами при раке почки, мочевого пузыря, раке
эндометрия и плоскоклеточных карциномах головы и шеи
ЗАКЛЮЧЕНИЕ К ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1.1. Клиническая характеристика больных раком почки
2.1.2. Клиническая характеристика больных раком мочевого пузыря
2.1.3. Клиническая характеристика больных раком эндометрия
2.1.4. Клиническая характеристика больных плоскоклеточными
карциномами области головы и шеи
2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2.1. Определение тотальной активности протеасом и активности пулов протеасом
2.2.2. Определение активности кальпаинов
2.2.3. Определение субъединичного состава протеасом методом Вестерн-блоттинг
2.2.4. Определение содержания транскрипционных факторов НИМ а и ЫБ-кВ (р50 и р65 форм)
2.2.5. Определение содержания ростовых факторов УЕвР, ИФР-І, ИФР-ІІ, белков связывающих ИФР ЮБВР-З, ЮРВР-4 и металлопротеиназы РАРР-А
2.2.6. Определение содержания белка по методу Лоури
2.2.7. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Роль внутриклеточных протеиназ в развитии рака почки, в регуляции содержания транскрипционных факторов и ростового фактора УЕОБ
3.1.1. Активность протеасом, их субъединичный состав в ткани рака почки, связь с клинико-морфологическими параметрами заболевания

3.1.2. Активность кальпаинов в ткани рака почки, связь с клиникоморфологическими параметрами заболевания
3.1.3. Взаимосвязь между активностями внутриклеточных протеиназ в ткани рака почки
3.1.4. Экспрессия транскрипционного фактора ОТ-кВ в ткани рака почки, связь с клинико-морфологическими параметрами заболевания
3.1.5. Экспрессия транскрипционного фактора НІР-1 и ростового фактора УЕОБ при раке почки, связь с клинико-морфологическими параметрами заболевания
3.1.6. Взаимосвязь между экспрессией транскрипционных факторов №-кВ р65, №-кВ р50, НПМа и ростового фактора УЕОБ при раке почки
3.1.7. Протеолитическая регуляция содержания транскрипционных факторов и ростового фактора УЕОБ при раке почки
3.1.8. Прогностическая значимость определения показателей внутриклеточного протеолиза, экспрессии транскрипционных факторов и ростового фактора УЕОР при раке почки
3.1.9. Создание прогностической модели развития гематогенных
метастазов при раке почки
3.2. Роль внутриклеточных протеиназ в развитии рака мочевого пузыря, в регуляции содержания транскрипционных факторов и ростового фактора УЕИР
3.2.1. Активность протеасом и их субъединичный состав в ткани рака мочевого пузыря, связь с клинико-морфологическими параметрами заболевания
3.2.2. Активность кальпаинов в ткани рака мочевого пузыря, связь с клинико-морфологическими параметрами заболевания
3.2.3. Взаимосвязь между активностями внутриклеточных протеиназ в ткани рака мочевого пузыря

встречается преимущественно в желудочно-кишечном тракте,
кальпаин-3 - в скелетных мышцах, сердце и печени [54, 142].
В активном состоянии кальпаины представлены гетеродимерами, состоящими из малой регуляторной субъединицы (28-30кДа) и большой каталитической субъединицы (80кДа). Их активация происходит при увеличении концентрации внутриклеточного кальция. Кальпаины являются цитоплазматическими ферментами, однако их активные формы найдены во фракции плазматической мембраны, что предполагает связь их активации с нахождением на мембране [15, 130].
Выявлено, что основными субстратами данных калиций зависимых ферментов являются некоторые белки цитоскелета, такие как виментин, актин, фодрины [127], а также белки, связанные с апоптозом и пролиферацией клеток: Вах, Bid, Bcl-XL, c-Fos, р53 [127, 307].
Кальпаины необходимы для нормального развития организма. В их отсутствии нарушается процесс эмбриогенеза, что приводит к развитию пороков, связанных с формированием сердечно-сосудистой недостаточности, обычно несовместимой с жизнедеятельностью [52].
Большое значение в регуляции активности и субстратной специфичности ферментов имеет их эндогенный ингибитор - кальпастатин [221, 246]. Однако механизм его влияния на активность кальпаинов до сих пор непонятен [343]. В экспериментальных исследования, проведенных с использованием кальпастатина, выявлена роль данных внутриклеточных протеаз в регуляции пролиферации клеток, апоптоза, клеточной подвижности [307].
Отмечается, что протеолиз, осуществляемый кальпаинами является лимитированным, результат которого заключается в активации белков и пептидов, модификации их структуры и субстратной специфичности [293]. В целом, широкая субстратная специфичность определяет значение кальпаиновой системы в жизнедеятельности клетки. Ее роль тесным образом связана с протеасомами, что является свидетельством тесных ассоциаций