Роль опиоидных рецепторов, протеинкиназы С, тирозинкиназ, PI3-киназы и NO-синтаз в реализации кардиопротекторного эффекта адаптации к непрерывной нормобарической гипоксии

• Автор: Цибульников, Сергей Юрьевич
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 122 с. : 7 ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Механизмы кардиопротекторного эффекта гипоксии
1.2. Патогенез ишемических и реперфузионных повреждений
миокарда
1.3. Опиоидная система и ее роль в регуляции функции миокарда в
норме и при патологии
1.4. Опиоидная система в процессах адаптации сердца
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Характеристика методов исследования
2.2.1. Моделирование хронической непрерывной нормобарической гипоксии
2.2.2. Моделирование коронароокклюзии-реперфузии
2.2.3. Регистрация и оценка ишемических и реперфузионных нарушений сердечного ритма
2.2.4. Оценка ишемичсских-репсрфузионных повреждений миокарда
2.2.5 Лабораторные методы исследования крови
2.2.6 Исследование гемодинамики
2.2.7 Определение содержания опиоидных пептидов в крови и ткани миокарда
2.3. Характеристика используемых фармакологических агентов
2.3.1. Антагонисты опиоидных рецепторов
2.3.2. Фармакологические инструменты для оценки вклада N0-синтазы, протеинкиназы С и тирозинкиназ в реализацию кардиотропного эффекта хронической непрерывной нормобарической гипоксии
2.4. Методы статистической обработки результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Изменения показателей периферической крови у крыс, подвергшихся хронической непрерывной нормобарической гипоксии
3.2 Изменение уровня опиоидных пептидов у крыс, подвергнутых хронической непрерывной нормобарической гипоксии
3.3 Исследование гемодинамики
3.4 Влияние хронической непрерывной нормобарической гипоксии на частоту и характер нарушений сердечного ритма при коронароокклюзии и реперфузии

3.5. Кардиопротекторный эффект хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
3.5.1 Изучение роли опиоидных рецепторов в реализации
кардиопротекторного эффекта хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
3.5.2 Изучение внутриклеточных регуляторных механизмов в кардиопротекторном эффекте хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
3.5.2.1 Изучение участия ТЮ-синтазы в реализации
кардиопротекторного эффекта хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
3.5.2.2 Изучение участия протеинкиназы С в реализации кардиопротекторного эффекта хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
3.5.2.3 Изучение участия тирозинкиназ в реализации
кардиопротекторного эффекта хронической непрерывной
нормобарической гипоксии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений
АФК - активные формы кислорода ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ЗИ/ЗР - соотношение зона инфаркта/ зона риска ЗН - зоны некроза
ЗР - зона риска (зона гипоперфузии) индуцибельная iNOS inducible NO-synthase
ИП - ишемическое прекондиционирование (ischemic preconditioning)
конститутивная eNOS endothelial NO-synthase
КФК - креатинфосфокиназа
лдг- лактатдегидрогенеаза
МАПК - Митоген-активируемые протеинкиназы
МАПК - митоген-активируемые протеинкиназы
митоСОД - митохондриальная супероксиддисмутаза
НО-1 - индуцибельная гемоксигеназа
ОИМ - острый инфаркт миокарда
ОП - опиоидные пептиды
ОР - опиоидные рецепторы
ПКС - протеинкиназа С
ПОЛ - перекисное окисление липидов
СПР - саркоплазматический ретикулум
ХННГ - хроническая непрерывная нормобарическая гипоксия
цАМФ - циклический аденозин монофосфат
цГМФ - циклический гуанозин монофосфат
чсс - частота сердечных сокращений
ADP - аденозиндифосфат
AIF - апоптоз-индупирующий факгор
АМР - аденозинмонофосфат
АТР - аденозинтрифосфат
ERK1/2 (extracellular signal-regulated kinase) - киназа

являющихся, как и все регуляторные пептиды, сегрегируемыми продуктами, происходит путем посттрансляционного процессинга белковых предшественников [Панченко Л.Ф. и др., 1999; Younes A. et al., 2000]. Секретируемые белковопептидные продукты синтезируются на мембрапосвязанных полисомах эндоплазматического ретикулума [Панченко Л.Ф. и др., 1999; Younes A. et al., 2000].
Основными известными эффектами в спектре биологической активности опиоидных пептидов можно считать участие энкефалинов и эндорфинов в регуляции болевых рефлексов, деятельности сердечно-сосудистой, дыхательной и эндокринной систем, функций желудочно-кишечного тракта, поведения и психоэмоциональных процессов [Лишманов Ю.Б. и Маслов Л.М. 2004; Маслов Л.Н. и др., 2009, 2010; Fryer R.M. et al., 2001; Zatta A.J. et al., 2008]. Такое многообразие эффектов, выявленное у эндогенных опиоидных пептидов объясняется полиморфизмом опиоидных рецепторов, а также широкой распространенностью их как в центральной нервной системе, так и в периферических органах и тканях.
Энкефалины, ß-эндорфин, динорфины были обнаружены в миокарде млекопитающих [Ventura C. et al., 1992]. Содержание мРНК, определяющей структуру проэнкефалина, в кардиомиоцитах значительно превосходит аналогичный показатель, характерный для ткани головного мозга и надпочечников [Springhorn J.P. и Claucomb W.C., 1992].
Первые сведения о позитивном влиянии агонистов ОР в отношении скорости репаративных процессов в сердечной мышце при экспериментальном инфаркте миокарда отмечены в работах Афонской и соавт. [Афонская H.A. и др., 1986]. В опытах с введением даларгина кроликам на фоне острой ишемии миокарда было установлено, что этот опиоид стимулировал рост капилляров, пролиферацию клеточных элементов, образование коллагена и миофибробластов, а также способствовал более полноценному рубцеванию и ускорению заживления [Афонская H.A. и др., 1986]. Позднее эти данные нашли свое подтверждение в опытах Г.Ф. Дворцина (1990) [Дворцин Г.Ф. 1990]. Кроме того, согласно результатам Золоева с соавт. [Золоев Г.К. и др., 1985; 1987], введение животным с экспериментальным инфарктом миокарда опиоидных пептидов - лей-эикефалина,