Особенности индуцированного морфогенеза и регенерации у различных типов эксплантов in vitro культиваров видов рода Iris L.

• Автор: Тихомирова, Людмила Ивановна
• Шифр специальности: 03.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Барнаул
• Количество страниц: 187 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ В УСЛОВИЯХ IN VITRO
1.1. Морфогенез растений in vitro
1.1.1. Особенности протекания морфогенеза in vitro
1.1.2. Гистологический анализ в культуре органов и тканей
1.2. Факторы регуляции процессов морфогенеза
1.3. Основные методы регенерации растений in vitro
1.4. Ирис как объект биотехнологических исследований
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Исходный растительный материал
2.2. Условия асептики и стерилизация растительного материала
2.3. Методы исследования
ГЛАВА 3. РЕАЛИЗАЦИЯ МОРФОГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ ИРИСА (IRIS L.) В УСЛОВИЯХ IN VITRO ПУТЁМ ПРЯМОГО ОРГАНОГЕНЕЗА
3.1. Регенерационная способность почек вегетативного побега ириса
3.2. Эмбриокультура ириса
3.3. Морфогенез и регенерация фрагментов цветка видов ириса
3.3.1.1, sibirica
3.3.2.1, ensata
3.3.3.1, hybrida
ГЛАВА 4. ГИСТОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЭТАПОВ МОРФОГЕНЕЗА В ЭКСПЛАНТАХ ОРГАНОВ ЦВЕТКА ИРИСА В УСЛОВИЯХ IN VITRO.ЛОЗ
4.1, Этапы морфогенеза в эксплантах органов цветка видов ириса.
4.1.1. /. вШпса.

4.1.2.1. етМа
4.1.3.1. И.уЬг1с1а
4.2. Сравнительный анализ гистогенеза и органогенеза в эксплантах генеративных органов культиваров I. НуЬНс1а, I. етШа, I. яШпса
4.3. Морфогенез и регенерационная способность эксплантов околоцветник-завязь сортов и гибридов I. к1Ыгш1. I. ета!а и I. ЬуЬпс1а.
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
ПРИЛОЖЕНИЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ, ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ
Определения Гемморизогенез — образование корней и побегов; геммогенез - образование почек;
гидроциты - крупные клетки с сетчатым или спиралевидным утолщением клеточной стенки;
нативные органы — органы живого организма, не подвергавшиеся обработке в лаборатории;
пассаж - время между двумя субкультивированиями; полиада - группа клеток под одной оболочкой;
пролиферация - новообразование тканей и клеток путём размножения; регенерант - растение, возникшее in vitro из соматических тканей; регенерационная способность - сумма признаков, проявляющихся на изолированном органе in vitro: каллусообразование, ризогенез, геммогенез (Лутова и др., 1994);
ризогенез - образование корней;
субкультивирование - перенос клеток в другой культуральный сосуд на свежую питатльную среду.
Обозначения и сокращения
БАЛ - 6-бензиламинопурина, синтетический регулятор роста, цитокинин; НУК - а- нафтилуксусная кислота, синтетический регулятор роста, ауксин; имк-з -индолилмасляная кислота, синтетический регулятор роста, ауксин; MS - питательная среда MS (Murashige, Skoog, 1962);
В5 - питательная среда Гамборга (Gamborg et al., 1968)
Изучали биотехнологические аспекты культивирования декоративных крымских орхидных, используя экспланты из корней, бутонов и закрытых коробочек. Лучшими оказались корни и бутоны. Рост начинало 50-70% этих эксплантов, образуя со временем протокормоподобные структуры (Popkova, 2002).
По данным литературных источников метод, индукции возникновения адвентивных почек непосредственно тканями экспланта, наиболее изучен и применяем на видах и сортах лилии. В качестве эксплантов используют чешуи луковиц, листья верхней и низовой формации (Чурикова и др., 1991), а также различные фрагменты осевой природы и органы цветка: срезы оси соцветия, цветоложе, тычиночные нити (Мухаметвафина и др., 2002; Байбурина и др., 2004; Пугачёва, 2004; Набиева, 2005, 2008). В работах по микроразмножению ценных гибридов лилий хорошо себя проявили листья и завязи (Мухаметвафина, 2002).
Третий метод, практикуемый при клональном микроразмножении, основывается на дифференциации из соматических клеток зародышеподобных структур, которые по своему виду напоминают зиготические зародыши. Этот метод получил название соматического эмбриогенеза. В отличие от развития in vivo, соматические зародыши развиваются асексуально вне зародышевого мешка и по своему внешнему виду напоминают биполярные структуры, у которых одновременно наблюдается развитие апикальных меристем стебля и корня. Формирование эмбриоидов в культуре тканей осуществляется в несколько этапов. Сначала происходит дифференциация клеток под влиянием ауксинов, добавленных в питательную среду (2,4-Д) и превращение их в эмбриональные. Получить эмбриоиды из этих клеток можно уменьшая концентрацию ауксинов или исключая их из питательной среды. Соматические зародыши представляют собой полностью сформированные зародыши, из которых путем соответствующего капсулирования можно получить искусственные семена (Кузьмина, 2008).