Эпизоотическая ситуация по бешенству животных в Московской области и совершенствование методов экспресс-диагностики

• Автор: Анисина, Ольга Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Щёлково
• Количество страниц: 160 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
1. ВВЕДЕНИЕ
1.1 Актуальность темы
1.2 Цель и задачи исследования
1.3 Научная новизна
1.4 Основные положения работы, выносимые на защиту
1.5 Личный вклад соискателя
1.6 Апробация результатов работы
1.7 Публикация результатов исследования
1.8 Объем и структура диссертации
2.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1 Экология и география распространения бешенства
2.2 Эпизоотическая ситуация по бешенству в РФ
2.3 Экологическая обстановка и социально-экономическое положение МО
2.4 Эпизоотическая ситуация по бешенству в МО
2.5 Роль безнадзорных собак в эпизоотии бешенства в МО
2.6 Возбудитель бешенства
2.6.1 Классификация Еуьзаухгиь
2.6.2 Морфология и свойства вируса бешенства
2.6.3 Восприимчивость к бешенству животных
2.7 Патогенез
2.8 Формирование иммунитета у животных при бешенстве
2.9 Диагностика бешенства
2.9.1. Традиционные методы диагностики бешенства
2.9.2. Метод иммунохроматографического анализа (ИХА)
2.10 Профилактика и меры борьбы с бешенством
2.11 Мероприятия по борьбе с бешенством
Заключение

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материалы и методы
3.1.1 Материалы
3.1.2 Методы
3.2. Результаты исследований
3.2.1 Характеристика современной экологической обстановки и социально-экономического положения МО
3.2.2 Эпизоотическая ситуация по бешенству животных в МО за период 2008-2012 гг
3.2.3 Оценка роли собак в эпизоотическом процессе бешенства на территории МО
3.2.4 Заболевание людей гидрофобией в МО
3.2.5 Результаты определения эффективности вакцинации собак антирабическими вакцинами
3.2.6 Разработка тест-системы ИХА для выявления вируса бешенства
3.2.6.1 Получение компонентов тест-системы ИХА
3.2.6.2 Очистка нуклеокапсида вируса бешенства
3.2.6.3 Получение антирабических сывороток
3.2.6.4 Выделение из антирабических сывороток
3.2.6.5 Получение анти-^в барана
3.2.6.6 Получение конъюгата высокоаффинных антирабических 1^0 с частицами коллоидного золота
3.2.6.7 Конструирование тест-системы ИХА
3.2.6.8 Определение условий проведения ИХА
3.2.6.9 Оценка эффективности тест-системы ИХА
4. ОБСУЖДЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

8. ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1 Стандарт организации «Набор реагентов для количественного определения антител к антигену вируса бешенства в сыворотке крови животных в непрямом варианте иммуноферментного
анализа»
Приложение 2 Технологический регламент по изготовлению и контролю набора реагентов для количественного определения антител к антигену вируса бешенства в сыворотке крови животных в непрямом
варианте иммуноферментного анализа
Приложение 3 Временная инструкция по применению набора
реагентов для количественного определения антител к антигену вируса бешенства в сыворотке крови животных в непрямом варианте
иммуноферментного анализа
Приложение 4 Акт комиссионной проверки набора реагентов для количественного определения антител к антигену вируса бешенства в сыворотке крови животных в непрямом варианте иммуноферментного
анализа
Приложение 5 Методические положения «Количественное определение антител к антигену вируса бешенства в сыворотке крови
животных в непрямом варианте иммуноферментного анализа»
Приложение 6 Стандарт организации «Набор реагентов для
выявления вируса бешенства методом иммунохроматографического
анализа»
Приложение 7 Технологический регламент по изготовлению и
контролю набора реагентов для выявления вируса бешенства методом
иммунохроматографического анализа
Приложение 8 Временная инструкция по применению набора
реагентов для выявления вируса бешенства методом иммунохроматографического анализа

2. Обзор литературы
Отличать уличное бешенство от вакцинных штаммов, а также устанавливать географическое происхождение полевых штаммов, позволяет метод ИФА с панелью моноклональных антител, ПЦР и тест-системы с применением антиидиотипических антител [10, 18, 61, 130, 149, 204].
Прижизненная диагностика бешенства может быть затруднена до клинического проявления болезни, развития особых признаков бешенства, таких как гидрофобия и аэрофобия. Поэтому, постановка диагноза до появления клинических признаков основана на анамнезе, симптомах и признаках, а также анализе эпизоотологической информации.
В настоящее время имеется возможность прижизненной верификации диагноза бешенства: обнаружение антигена Rabies virus в отпечатках роговой оболочки глаза, в волосяных фолликулах, кожного биоптата шеи с помощью прямого МФА (корнеальный тест) или обнаружение вирусной РНК в цереброспинальной жидкости, слюне или луковицах волос шеи с помощью RT-PCR [39, 42, 68, 112, 128, 202, 233, 236, 237].
Резкое повышение уровня моноцитов в крови может также быть диагностическим признаком при бешенстве. Окончательное подтверждение диагноза возможно посмертно с использованием методов исследования ткани ЦНС.
Методом световой микроскопии диагностируют уличное бешенство исследованием отпечатков мозга, окрашенных по Sellers гистологическими методами с помощью световой микроскопии на присутствие цитоплазматических включений - вирусных агрегатов телец Бабеша-Негри (Babec-Negri) [16, 233, 236, 237]. Преимуществом метода является экспрессность (45-60 мин). Недостатками - низкая чувствительность (40-73%) и необходимость проведения дополнительных исследований в случае получения отрицательных результатов.