Разработка наносомных препаратов на основе флаволигнанов и антиангиогенных белков

• Автор: Луценко, Елена Валерьевна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 210 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Гепатопротекторное действие силимарина
1.1.1. Механизмы гепатопротекторного действия силимарина
1.1.2. Роль силимарина в снижении уровня холестерола в крови
1.1.3. Действие силимарина при повреждениях печени алкогольного генеза
1.1.4. Терапевтическое действие силибинина при отравлении токсинами зеленой поганки (Amanita phalloïdes)
1.2. Действие силибинина и силикристина на клетки почек
1.3. Биодоступность силимарина
1.4. Дозы и токсичность силимарина
1.5. Противоопухолевая активность силимарина
1.5.1. Химический канцерогенез и противоопухолевое действие силимарина
1.5.2. Индуцирующее влияние силибинина на дифференцировку опухолевых клеток
1.5.3. Роль силимарина/силибинина в регуляции клеточного цикла
1.5.4. Влияние силимарина/силибинина на регуляторные белки семейства Rb и факторы транскрипции E2F

1.5.5. Блокирование силимарином/силибинином каскада передачи регуляторного сигнала ЕОЕ11-»МАРК/Е11К1/2..
1.5.6. Действие силимарина/силибинииа на каскад передачи регуляторных сигналов, индуцируемых инсулиноподобными факторами роста
1.5.7. Подавление силимарином/силибинином сигнального пути, приводящего к активации фактора транскрипции ИЕ-кВ
1.5.8. Антиоксидативное фотопротекторное действие си лимарина/силибинина
1.5.9. Противовоспалительное действие сюшмарина
1.5.10. Иммуномодулирующие эффекты силимарина
1.6. Антиангиогенный потенциал силимарина
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Выделение силибинина из экстракта расторопши пятнистой.
2.2. Тонкослойная хроматография препаратов
силимарина/силибинииа
2.3. Получение нативного ангиостатина
2.4. Получение рекомбинантного эндостатина человека
2.5. Получение липосомной формы силимарина
2.6. Определение степени включения веществ в липосомы
2.7. Изучение липосомных частиц с помощью электронной микроскопии
2.8. Определение размеров липосомных частиц
2.9. Исследование накопления силибинина в тканях экспериментальных животных
2.10. Исследование антитоксической активности липосомной формы силимарина на модели острого токсического гепатита

2.11. Исследование антитоксической активности липосомной формы силимарина на модели алкогольной интоксикации экспериментальных животных
2.12. Микроскопическое исследование морфологии печени экспериментальных животных
2.13. Клинические исследования безопасности и эффективности липосомного силимарина (БАД «Липосил»)
2.14. Изучение безопасности липосомной формы силимарина и ее влияния на основные зоотехнические и физиологические показатели цыплят-бройлеров
2.15. Исследование цитотоксической активности препаратов in vitro
2.15.1. Клеточные линии
2.15.2. Определение ЦТА препаратов в отношении культур клеток MCF-7, НТ1080, LNCaP, АВАЕ, SVEC4-10 и Р
2.15.3. Определение ЦТА препаратов в отношении клеток линии HUVEC
2.15.4. Оценка выживаемости клеток
2.16. Исследование влияния препаратов силимарина на образование капилляров в матригеле
2.17. Исследование противоопухолевой активности препаратов силимарина in vivo
2.18. Исследование антиметастатической активности препаратов силимарина
2.19. Исследование противоопухолевой активности доксорубицина и препаратов силимарина при их сочетанном применении
2.20. Получение полимерных мицелл с ангиостатином, эндостатином, силимарином и силибинином
2.21. Определение размеров наночастиц

A. phalloïdes представляют собой циклопептиды, формирующие две группы токсикологически различных веществ: аматотоксины,
вызывающие летальный исход в течение 2-8 дней (LD50 0,4-0,8 мг/кг), и фаллотоксины, вызывающие летальный исход в течение 2-5 ч и менее токсичные, чем аматотоксины (LD50 2-3 мг/кг). Следует отметить, что токсические пептиды аманитин и фаллоидины были найдены не только в A. phalloïdes, но также в трех других видах Amanita, восьми видах Galerina и одиннадцати видах Lepiota [127].
Детализированная информация по химическому действию аманитина была получена в результате эксперимента, демонстрирующего, что содержание РНК прогрессивно снижается в течение первых 24 ч отравления а-аманитином. Аманитин в концентрации 10 нг/мл ингибирует активность РНК-полимеразы II на 60-70% [170]. Взаимодействие между РНК-полимеразой II и аматотоксинами приводит к образованию прочного комплекса. Вообще эукариотические РНК-полимеразы сильно различаются по их чувствительности к аматотоксинам. Из трех типов (I, II и III) лишь РНК-полимераза II проявляет наибольшую чувствительность. РНК-полимераза II, выделенная из клеток рыб и насекомых, также высоко чувствительна к а-аманитину. Молекулярный механизм, приводящий к гибели клетки после взаимодействия с аматотоксином, до конца еще не установлен. Однако уже сейчас ясно, что основным токсическим проявлением действия аматотоксина после его проникновения в организм является подавление синтеза практически всех белков, приводящее к гибели клетки [66, 80, 226]. Повреждению в первую очередь подвергаются клетки, осуществляющие транспортные функции, и определенные органы-мишени в следующем порядке: слизистая оболочка
кишечника, гепатоциты печени и проксимальные канальцы почек.