Свободно-радикальное окисление при гипокинезии в условиях экспериментального перитонита

• Автор: Попов, Cергей Владимирович
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 126 с.

Содержание
Список использованных сокращений
Введение
Актуальность темы
Цель исследования
Задачи исследования
Научная новизна
Теоретическое значение и практическое значение
Положения, выносимые на защиту
Апробация работы
Публикации
Структура и объем диссертации
Глава 1. Роль стресса и процесса свободнорадикального окисления в
патогенезе перитонита
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.2. Общая характеристика экспериментальных моделей
2.3.Методы анализа изучаемых явлений
Определение биохимических параметров
Гематологические методы
Статистический анализ результатов
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Реакция системы крови при ложной операции
3.2. Соотношение между ПОЛ и карбонизированием белков во внутренних органах у ложноперированных животных
3.3. Реакция системы крови при СЬР - перитоните
3.4 Состояние свободнорадикального окисления внутренних органов при
СЬР - перитоните
3.5 Особенности реакции системы крови при гипокинезии
3.6 Влияние процедуры ложной операции на реакцию системы крови у стрессированных животных
3.7 Влияние процедуры ложной операции на свободнорадикальное окисление внутренних органов у стрессированных животных
3.8 Влияние дополнительной процедуры ложной операции на вызванные 30 - суточной гипокинезией изменения свободнорадикального окисления в брюшине, крови и во внутренних органов у стрессированных животных
3.9 Влияние предварительных стрессорных воздействий на реакцию лейкоцитарного звена системы крови при септическом перитоните
3.10 Влияние предварительных стрессорных воздействий на состояние
свободно-радикального окисления в условиях СЬР - перитонита
Обсуждение
Заключение
Выводы
Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АОЗ - антиоксидантная защита
ГГ АС - гипотоламо-гипофизарно-адреналовая система ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа ГК-гипокинезия
ДБФ - дибензилфлюоресцеиндебензилазная активность
ОМБ-окислительно-модифицированные белки
IL-1 - интерлейкин
IL-6 - интерлейкин
TNF - туморнекротический фактор
U - критерий Манна-Уитни
X - критерий Колмогорова-Смирнова
ТКФ - точный критерий Фишера
ФНО - фактор некроза опухолей
WW - критерий Вальда-Вольфовица
ПОЛ - перекисное окисление липидов

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность. Патогенез перитонита включает в себя развитие воспалительного процесса в результате абдоминальной инфекции с возможной делокализацией воспалительного очага, что сопровождается интоксикацией, синдромом системного воспалительного ответа (SIRS) и полиорганной недостаточностью, развитие которой приводит к летальному исходу. По мере прогрессирования перитонита больной в течение продолжительного времени вынужден находиться в условиях ограничения двигательной активности (гипокинезии).
Дезадаптивные последствия гипокинезии как состояния с низкой двигательной активностью очевидны. Накоплен значительный фактический материал, свидетельствующий о нарушении процесса окисления и фосфорилирования в митохондриях, снижении активности ключевых ферментов цикла трикарбоновых кислот, нарушении белкового, углеводного и липидного обмена, активацией свободно-радикального окисления. Гипокинезия может выступать в качестве кондиционального фактора, способствующего развитию как самого перитонита, так и формированию его осложнений. Это связано с нарушениями моторики желудочно-кишечного тракта, а также барьерной функции слизистой оболочки кишечной стенки, вызванными ограничением двигательной активности. Кроме того, в результате сопутствующего стресса, гипокинезия может способствовать развитию глюкокортикоид-зависимой бактериемии интестинального происхождения (Зурочка А.В.,1984).
Не исключено, что в результате гипокинетического стресса модифицируется функциональная активность фагоцитирующих клеток в воспалительном очаге, что может само по себе снижать антимикробную резистентность и способствовать прогрессированию перитонита. Известно, что функциональная активность полиморфноядерных лейкоцитов непосредственно зависит от свободно-радикального окисления. Вместе с тем, имеются данные о причастности процессов свободно-радикального

Определение активности моноаминоксидазы
В печени и головном мозге определяли активность моноаминоксидазы (МАО-Б, аминкислородоксидоредуктазы (дезаминирующей,
флавинсодержащей), К.Ф. 1.4.З.4.). Применяли модифицированный Волчегорским И.А. и др. (1991) метод. Источником фермента являлся цельный гомогенат, приготовленный на 0,25М сахарозе в 0,0627М Na-фосфатном буфере. В качестве субстрата МАО-Б использовали бензиламина гидрохлорид, о дезаминировании которого судили по накоплению в среде бензальдегида. Для регистрации продукта реакции использовали принцип образования семикарбазона с последующей детекцией по поглощению при длине волны 270 нм (Волчегорский И.А. и соавт 19932).
Гематологические и иммунологические методы
Изучение периферической крови проводилось общепринятыми методами (Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Шахов В.П., 1992) и заключалось в подсчете эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, определении содержания гемоглобина гемоглобинцианидным методом. Лейкоцитарную формулу изучали в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе (проводился подсчет не менее чем 200 клеток). Мазки периферической крови, также как мазки-отпечатки костного мозга и селезёнки, перед окраской фиксировали метанолом. Клеточные суспензии тимуса и селезёнки получали при помощи стеклянного гомогенизатора, осторожно “выжимая” клетки пестиком. Костный мозг забирали из диафиза бедренной кости, промывая костномозговой канал 0,9% раствором NaCl после удаления эпифизов. Суспензию миелокариоцитов перемешивали пипетированием. Кариоциты костного мозга и лимфоидных органов (также как и лейкоциты крови) подсчитывали в камере Горяева после ресуспендирования в 0,1% растворе метиленового синего в 3% уксусной кислоте. Содержание кариоцитов в тимусе и селезёнке рассчитывали на весь орган, на 1 мг массы органа и на 1 г массы тела (Волчегорский И.А., 1993). Количество миелокариоцитов